平潭水仙组培快繁和抗病基因的克隆与转化
| 缩略词表 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 第一章 前言 | 第12-20页 |
| 1 平潭水仙资源概况 | 第12-14页 |
| 2 中国水仙离体组织再生研究 | 第14-16页 |
| ·通过愈伤组织再生途径 | 第14-15页 |
| ·通过直接诱导小鳞茎再生途径 | 第15-16页 |
| ·鳞茎盘的消毒 | 第15-16页 |
| ·影响鳞茎再生的因素 | 第16页 |
| 3 中国水仙遗传转化概况 | 第16-17页 |
| 4 植物抗病基因工程的研究 | 第17-18页 |
| 5 本研究的目的意义、内容及技术路线 | 第18-20页 |
| ·目的意义 | 第18页 |
| ·主要研究内容 | 第18-19页 |
| ·技术路线 | 第19-20页 |
| 第二章 平潭水仙花组培快繁 | 第20-31页 |
| 1 材料与方法 | 第20-23页 |
| ·植物材料 | 第20页 |
| ·试验方法 | 第20-23页 |
| ·外植体的预处理和消毒 | 第20页 |
| ·培养基及培养条件 | 第20-21页 |
| ·水仙外植体的筛选 | 第21页 |
| ·子房愈伤组织的诱导与分化 | 第21-22页 |
| ·鳞茎盘不定芽的诱导 | 第22-23页 |
| ·花葶不定芽的诱导 | 第23页 |
| ·数据计算 | 第23页 |
| 2 结果与分析 | 第23-28页 |
| ·水仙外植体的筛选 | 第23-24页 |
| ·子房愈伤组织的诱导与分化 | 第24-26页 |
| ·子房愈伤组织的诱导 | 第24-25页 |
| ·子房愈伤组织的分化 | 第25-26页 |
| ·鳞茎盘直接诱导不定芽 | 第26-28页 |
| ·花葶直接诱导不定芽 | 第28页 |
| 3 讨论 | 第28-31页 |
| ·水仙不同外植体的消毒方法 | 第28-29页 |
| ·激素配比对水仙外植体分化的影响 | 第29-30页 |
| ·鳞茎的生根与移栽 | 第30-31页 |
| 第三章 中国水仙抗病基因的克隆 | 第31-44页 |
| 1 材料及方法 | 第31-32页 |
| ·试验材料 | 第31页 |
| ·植物材料 | 第31页 |
| ·菌株、载体、试剂和试验引物 | 第31页 |
| ·方法 | 第31-32页 |
| ·材料处理 | 第32页 |
| ·总RNA的获得和检测及cDNA的合成 | 第32页 |
| ·目的基因的PCR扩增 | 第32页 |
| ·目的片段的回收纯化、连接、转化及鉴定 | 第32页 |
| ·目的基因生物信息学分析 | 第32页 |
| 2 结果与分析 | 第32-42页 |
| ·葡聚糖酶基因的克隆和分析 | 第32-38页 |
| ·葡聚糖酶基因的克隆 | 第32-35页 |
| ·葡聚糖酶基因生物信息学分析 | 第35-38页 |
| ·几丁质酶基因的克隆和分析 | 第38-42页 |
| ·几丁质酶基因序列分析 | 第38-40页 |
| ·几丁质酶基因生物信息学分析 | 第40-42页 |
| 3 讨论 | 第42-44页 |
| 第四章 平潭水仙抗病相关基因的遗传转化 | 第44-51页 |
| 1 试验材料 | 第44页 |
| ·植物材料 | 第44页 |
| ·质粒、菌株和试剂 | 第44页 |
| ·培养基和培养条件 | 第44页 |
| 2 试验方法 | 第44-47页 |
| ·水仙花葶的卡那霉素敏感性实验 | 第44页 |
| ·载体构建 | 第44-46页 |
| ·目的基因的获得 | 第44-45页 |
| ·pBI121质粒制备及酶切 | 第45页 |
| ·目的片段与表达载体的连接、转化和检测 | 第45页 |
| ·载体构建流程 | 第45-46页 |
| ·转基因植株的获取与检测 | 第46-47页 |
| ·农杆菌GV3101的活化和感受态制备 | 第46-47页 |
| ·重组质粒转化农杆菌 | 第47页 |
| ·农杆菌侵染和抗性再生芽的获得 | 第47页 |
| ·转基因植株的PCR检测 | 第47页 |
| 3 结果与分析 | 第47-49页 |
| ·水仙花葶的卡那霉素敏感性实验 | 第48页 |
| ·表达载体的构建结果 | 第48页 |
| ·抗性再生不定芽的PCR鉴定 | 第48-49页 |
| 4 讨论 | 第49-51页 |
| 小结与展望 | 第51-53页 |
| 参考文献 | 第53-57页 |
| 附录：图版和图版说明 | 第57-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
