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产漆酶茶叶内生真菌的筛选、酶的分离纯化及酶学特性的研究

中文摘要第1-3页
Abstract第3-5页
中文文摘第5-12页
第一章 绪论第12-26页
 1 茶叶概述第12页
   ·中国茶叶资源现状第12页
   ·茶叶的生物活性成分第12页
 2 植物内生真菌第12-13页
   ·内生真菌的多样性第12-13页
   ·内生真菌代谢产物的多样性第13页
 3 漆酶概述第13-19页
   ·漆酶的介绍第13-14页
   ·漆酶的来源第14-17页
   ·漆酶的发酵生产第17-18页
   ·漆酶酶活测定第18页
   ·漆酶的分离纯化第18-19页
 4 漆酶的应用第19-21页
   ·环境保护中的应用第19页
   ·工业中的应用第19-20页
   ·食品工业中的应用第20页
   ·生物检测中的应用第20页
   ·医药中的应用第20页
   ·对茶多酚转化的应用第20-21页
 5 茶多酚的介绍第21-22页
 6 本课题研究的内容和意义第22-26页
   ·主要内容及技术路线第22-23页
   ·研究意义第23-26页
第二章 产漆酶茶叶内生真菌的筛选第26-34页
 1 前言第26页
 2 材料与方法第26-32页
   ·材料第26-27页
     ·供试菌株第26页
     ·培养基第26-27页
     ·主要试剂第27页
     ·主要仪器设备第27页
     ·茶水浸提液制备第27页
   ·方法第27-29页
     ·菌种活化第28页
     ·漆酶酶活测定第28页
     ·产漆酶菌株平板初筛第28页
     ·产漆酶菌株摇瓶复筛第28-29页
   ·结果与分析第29-32页
     ·平板初筛第29-31页
     ·摇瓶复筛第31-32页
     ·菌株CSN-4发酵产酶曲线第32页
 3 小结与讨论第32-34页
第三章 菌株CSN-4产漆酶培养基及培养条件研究第34-48页
 1 前言第34页
 2 材料与方法第34-37页
   ·材料第34-35页
     ·供试菌株第34页
     ·培养基第34页
     ·主要试剂第34-35页
     ·主要仪器设备第35页
   ·方法第35-37页
     ·漆酶活力测定第35页
     ·不同营养成分对菌株CSN-4产漆酶酶活的影响第35-36页
     ·不同培养条件对菌株CSN-4菌株产漆酶酶活的影响第36页
     ·正交试验第36-37页
     ·数据处理第37页
 3 结果与分析第37-45页
   ·不同C源物质对菌株CSN-4漆酶酶活的影响第37页
   ·麸皮用量对菌株CSN-4漆酶酶活的影响第37-38页
   ·不同N源物质对菌株CSN-4漆酶酶活的影响第38页
   ·蛋白胨加入量对菌株CSN-4漆酶酶活的影响第38-39页
   ·茶水浓度对菌株CSN-4漆酶酶活的影响第39页
   ·CuSO_4加入量对菌株CSN-4漆酶酶活的影响第39-40页
   ·培养基成分的正交试验第40-41页
   ·不同装液量对菌株CSN-4漆酶酶活的影响第41-42页
   ·不同接菌量对菌株CSN-4漆酶酶活的影响第42页
   ·培养基初始pH对菌株CSN-4漆酶酶活的影响第42-43页
   ·培养温度对菌株CSN-4漆酶酶活的影响第43页
   ·不同摇床转速对菌株CSN-4漆酶酶活的影响第43-44页
   ·培养条件的正交试验优化第44-45页
 4 小结与讨论第45-48页
第四章 菌株CSN-4漆酶分离纯化及酶学性质的研究第48-64页
 1 前言第48页
 2 材料和方法第48-54页
   ·材料第48-50页
     ·菌株及培养第48页
     ·主要试剂第48-49页
     ·主要仪器第49页
     ·试剂配制第49-50页
   ·方法第50-54页
     ·蛋白质的聚丙烯酰胺凝胶电泳第50-51页
     ·蛋白含量的测定第51页
     ·漆酶的分离纯化第51-53页
       ·硫酸铵饱和度的确定第51-52页
       ·酶粗液硫酸铵分级沉淀第52页
       ·DEAE-纤维素阴离子交换柱层析第52页
       ·葡聚糖G-150凝胶层析第52-53页
       ·SDS-PAGE凝胶电泳第53页
       ·纯化倍数及回收率的计算第53页
     ·漆酶酶学性质的研究第53-54页
       ·最适反应温度第53页
       ·最适反应pH第53页
       ·漆酶的热稳定性第53页
       ·漆酶的酸碱稳定性第53-54页
       ·Cu~(2+)对酶活性的影响第54页
 3 结果与分析第54-61页
   ·漆酶的分离纯化第54-59页
     ·粗酶液阶段第54页
     ·硫酸铵分级沉淀的确定第54-55页
     ·酶粗液硫酸铵分级沉淀第55页
     ·DEAE-纤维素阴离子交换柱层析第55-56页
     ·葡聚糖G-150凝胶层析第56-57页
     ·漆酶各步纯化结果及纯度鉴定第57-59页
   ·漆酶酶学性质第59-61页
     ·最适反应温度第59页
     ·最适反应pH第59-60页
     ·漆酶的热稳定性第60页
     ·漆酶的酸碱稳定性第60页
     ·Cu~(2+)对酶活性的影响第60-61页
 4 小结与讨论第61-64页
第五章 漆酶转化茶多酚的初步研究第64-74页
 1 前言第64页
 2 材料与方法第64-65页
   ·漆酶第64页
   ·主要试剂和仪器第64页
   ·方法第64-65页
     ·漆酶对茶多酚溶液生物转化第65页
     ·转化产物的HPLC分析第65页
 3 结果与分析第65-71页
   ·酶液量对茶多酚溶液生物转化的影响第65-67页
   ·反应时间对茶多酚溶液生物转化的影响第67-68页
   ·转化产物的HPLC分析第68-71页
     ·标样和空白对照的HPLC分析第68-69页
     ·粗酶和纯酶对茶多酚转化后的HPLC分析第69-71页
 4 小结与讨论第71-74页
第六章 结论与展望第74-76页
 1 结论第74-75页
 2 展望第75-76页
参考文献第76-84页
攻读学位期间承担的科研任务与主要成果第84-86页
致谢第86-88页
个人简历第88-92页

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