摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
缩略语表(Abbreviation) | 第10-12页 |
第1章 文献综述 | 第12-22页 |
·猪繁殖与呼吸综合征 | 第12-15页 |
·PRRS概述 | 第12页 |
·PRRSV的分子生物学简介 | 第12-15页 |
·病毒的细胞致病机制 | 第15页 |
·抗病毒天然免疫的信号通路 | 第15-18页 |
·Toll样受体(TLR)途径 | 第16-17页 |
·RIG-I/MDA5 信号通路 | 第17-18页 |
·JAK-STAT信号通路 | 第18页 |
·PRRSV与天然免疫 | 第18-22页 |
·PRRSV抑制干扰素的产生 | 第19页 |
·参与抑制干扰素合成的PRRSV蛋白 | 第19-20页 |
·PRRSV抑制JAK-STAT通路和ISG的表达 | 第20-22页 |
第2章 研究目的与意义 | 第22-23页 |
第3章 材料与方法 | 第23-36页 |
·实验材料 | 第23-26页 |
·毒株与细胞 | 第23页 |
·质粒与载体 | 第23页 |
·工具酶及主要试剂 | 第23-24页 |
·培养基和抗生素的其配制 | 第24页 |
·主要缓冲液和试剂及其配制 | 第24-25页 |
·主要实验仪器及设备 | 第25页 |
·分子生物学分析软件 | 第25-26页 |
·实验方法 | 第26-36页 |
·载体构建 | 第26-29页 |
·PCR产物或酶切产物回收与纯化 | 第29页 |
·外源DNA片段与质粒载体的连接反应 | 第29-30页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备(氯化钙法) | 第30页 |
·连接产物的转化 | 第30页 |
·重组质粒的制备与酶切鉴定 | 第30-33页 |
·质粒转染(脂质体介导转染法) | 第33页 |
·双荧光素酶检测实验 | 第33页 |
·Western Blot检测目的基因在真核细胞中的表达 | 第33-36页 |
第4章 结果与分析 | 第36-49页 |
·PRRSV Nsp4 抑制SEV诱导的IFN-β 启动子的激活 | 第36-37页 |
·PRRSV Nsp4 抑制RIG-I/MDA5 介导的IFN-β 激活 | 第37-39页 |
·PRRSV Nsp4 抑制转录因子IRF3 的磷酸化 | 第39页 |
·PRRSV Nsp4 的蛋白酶活性参与其抑制IFN-β 的产生 | 第39-41页 |
·PRRSV Nsp4 通过切割MAVS和NEMO抑制IFN-β 的产生 | 第41-43页 |
·PRRSV Nsp4 的蛋白酶活性参与其切割MAVS和NEMO | 第43-45页 |
·PRRSV Nsp4 切割MAVS的位点位于MAVS的第268位谷氨酸 | 第45-47页 |
·PRRSV Nsp4 切割MAVS产生的片段诱导IFN-β 产生的能力基本丧失 | 第47-49页 |
第5章 讨论与结论 | 第49-52页 |
·讨论 | 第49-51页 |
·结论 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-60页 |
致谢 | 第60页 |