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猪繁殖与呼吸综合征病毒非结构蛋白Nsp4调控IFN-β的分子机制研究

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-10页
缩略语表(Abbreviation)第10-12页
第1章 文献综述第12-22页
   ·猪繁殖与呼吸综合征第12-15页
     ·PRRS概述第12页
     ·PRRSV的分子生物学简介第12-15页
     ·病毒的细胞致病机制第15页
   ·抗病毒天然免疫的信号通路第15-18页
     ·Toll样受体(TLR)途径第16-17页
     ·RIG-I/MDA5 信号通路第17-18页
     ·JAK-STAT信号通路第18页
   ·PRRSV与天然免疫第18-22页
     ·PRRSV抑制干扰素的产生第19页
     ·参与抑制干扰素合成的PRRSV蛋白第19-20页
     ·PRRSV抑制JAK-STAT通路和ISG的表达第20-22页
第2章 研究目的与意义第22-23页
第3章 材料与方法第23-36页
   ·实验材料第23-26页
     ·毒株与细胞第23页
     ·质粒与载体第23页
     ·工具酶及主要试剂第23-24页
     ·培养基和抗生素的其配制第24页
     ·主要缓冲液和试剂及其配制第24-25页
     ·主要实验仪器及设备第25页
     ·分子生物学分析软件第25-26页
   ·实验方法第26-36页
     ·载体构建第26-29页
     ·PCR产物或酶切产物回收与纯化第29页
     ·外源DNA片段与质粒载体的连接反应第29-30页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备(氯化钙法)第30页
     ·连接产物的转化第30页
     ·重组质粒的制备与酶切鉴定第30-33页
     ·质粒转染(脂质体介导转染法)第33页
     ·双荧光素酶检测实验第33页
     ·Western Blot检测目的基因在真核细胞中的表达第33-36页
第4章 结果与分析第36-49页
   ·PRRSV Nsp4 抑制SEV诱导的IFN-β 启动子的激活第36-37页
   ·PRRSV Nsp4 抑制RIG-I/MDA5 介导的IFN-β 激活第37-39页
   ·PRRSV Nsp4 抑制转录因子IRF3 的磷酸化第39页
   ·PRRSV Nsp4 的蛋白酶活性参与其抑制IFN-β 的产生第39-41页
   ·PRRSV Nsp4 通过切割MAVS和NEMO抑制IFN-β 的产生第41-43页
   ·PRRSV Nsp4 的蛋白酶活性参与其切割MAVS和NEMO第43-45页
   ·PRRSV Nsp4 切割MAVS的位点位于MAVS的第268位谷氨酸第45-47页
   ·PRRSV Nsp4 切割MAVS产生的片段诱导IFN-β 产生的能力基本丧失第47-49页
第5章 讨论与结论第49-52页
   ·讨论第49-51页
   ·结论第51-52页
参考文献第52-60页
致谢第60页

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