| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 缩略语表(Abbreviation) | 第10-12页 |
| 第1章 文献综述 | 第12-22页 |
| ·猪繁殖与呼吸综合征 | 第12-15页 |
| ·PRRS概述 | 第12页 |
| ·PRRSV的分子生物学简介 | 第12-15页 |
| ·病毒的细胞致病机制 | 第15页 |
| ·抗病毒天然免疫的信号通路 | 第15-18页 |
| ·Toll样受体(TLR)途径 | 第16-17页 |
| ·RIG-I/MDA5 信号通路 | 第17-18页 |
| ·JAK-STAT信号通路 | 第18页 |
| ·PRRSV与天然免疫 | 第18-22页 |
| ·PRRSV抑制干扰素的产生 | 第19页 |
| ·参与抑制干扰素合成的PRRSV蛋白 | 第19-20页 |
| ·PRRSV抑制JAK-STAT通路和ISG的表达 | 第20-22页 |
| 第2章 研究目的与意义 | 第22-23页 |
| 第3章 材料与方法 | 第23-36页 |
| ·实验材料 | 第23-26页 |
| ·毒株与细胞 | 第23页 |
| ·质粒与载体 | 第23页 |
| ·工具酶及主要试剂 | 第23-24页 |
| ·培养基和抗生素的其配制 | 第24页 |
| ·主要缓冲液和试剂及其配制 | 第24-25页 |
| ·主要实验仪器及设备 | 第25页 |
| ·分子生物学分析软件 | 第25-26页 |
| ·实验方法 | 第26-36页 |
| ·载体构建 | 第26-29页 |
| ·PCR产物或酶切产物回收与纯化 | 第29页 |
| ·外源DNA片段与质粒载体的连接反应 | 第29-30页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备(氯化钙法) | 第30页 |
| ·连接产物的转化 | 第30页 |
| ·重组质粒的制备与酶切鉴定 | 第30-33页 |
| ·质粒转染(脂质体介导转染法) | 第33页 |
| ·双荧光素酶检测实验 | 第33页 |
| ·Western Blot检测目的基因在真核细胞中的表达 | 第33-36页 |
| 第4章 结果与分析 | 第36-49页 |
| ·PRRSV Nsp4 抑制SEV诱导的IFN-β 启动子的激活 | 第36-37页 |
| ·PRRSV Nsp4 抑制RIG-I/MDA5 介导的IFN-β 激活 | 第37-39页 |
| ·PRRSV Nsp4 抑制转录因子IRF3 的磷酸化 | 第39页 |
| ·PRRSV Nsp4 的蛋白酶活性参与其抑制IFN-β 的产生 | 第39-41页 |
| ·PRRSV Nsp4 通过切割MAVS和NEMO抑制IFN-β 的产生 | 第41-43页 |
| ·PRRSV Nsp4 的蛋白酶活性参与其切割MAVS和NEMO | 第43-45页 |
| ·PRRSV Nsp4 切割MAVS的位点位于MAVS的第268位谷氨酸 | 第45-47页 |
| ·PRRSV Nsp4 切割MAVS产生的片段诱导IFN-β 产生的能力基本丧失 | 第47-49页 |
| 第5章 讨论与结论 | 第49-52页 |
| ·讨论 | 第49-51页 |
| ·结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-60页 |
| 致谢 | 第60页 |