摘要 | 第1-10页 |
Abstract | 第10-13页 |
第0章 引言 | 第13-20页 |
·目前中药活性组分研究的关键科学问题 | 第13-14页 |
·细胞膜色谱技术用于中药活性组分和靶标研究的现状及发展 | 第14-16页 |
·细胞膜色谱应用于中药活性组分研究存在的方法学问题 | 第16-18页 |
·问题的对策和本课题的研究思路 | 第18-20页 |
第1章 细胞膜色谱技术的系统方法学考察和柱效优化研究 | 第20-30页 |
·引言 | 第20-21页 |
·实验部分 | 第21-23页 |
·试剂和材料 | 第21页 |
·细胞培养 | 第21页 |
·HSCT6 细胞膜色谱模型和 SMMC7721 细胞膜色谱模型的建立 | 第21-22页 |
·细胞破碎条件的优化 | 第22页 |
·装柱用细胞膜量的优化 | 第22页 |
·细胞膜色谱柱柱效优化 | 第22页 |
·细胞膜色谱分析 | 第22-23页 |
·结果和讨论 | 第23-29页 |
·细胞破碎度的优化 | 第23-24页 |
·细胞膜用量的优化 | 第24-25页 |
·细胞膜色谱模型的选择性和重现性验证 | 第25-27页 |
·细胞膜色谱柱效优化 | 第27-29页 |
·本章小结 | 第29-30页 |
第2章 全二维 HepG2 细胞膜色谱整体柱飞行时间质谱系统的构建及其应用 | 第30-45页 |
·引言 | 第30-31页 |
·材料与方法 | 第31-36页 |
·试剂与药材 | 第31页 |
·制备药材提取液 | 第31页 |
·细胞培养 | 第31-32页 |
·建立 HepG2 肝癌细胞膜色谱模型 | 第32页 |
·全二维细胞膜色谱-整体柱反相色谱系统的建立 | 第32-34页 |
·全二维系统实验 | 第34-35页 |
·全二维系统选择性的考察 | 第35页 |
·竞争置换模型的考察 | 第35页 |
·阳性药和潜在活性化合物对 HepG2 肝癌细胞增殖的影响 | 第35-36页 |
·结果与讨论 | 第36-44页 |
·全二维系统选择性的考察 | 第36-37页 |
·全二维系统筛选中药活性组分 | 第37-40页 |
·竞争置换实验 | 第40-43页 |
·药物对 HepG2 肝癌细胞增殖的影响 | 第43-44页 |
·本章小结 | 第44-45页 |
第3章 正常/衰竭心肌细胞膜色谱比较分析系统的构建及其在中药附子和四逆汤活性组分筛选中的应用 | 第45-72页 |
·引言 | 第45-47页 |
·材料与方法 | 第47-53页 |
·试剂与材料 | 第47页 |
·仪器设备 | 第47页 |
·样品制备和标准溶液配制 | 第47-48页 |
·动物实验 | 第48页 |
·血流动力学评估 | 第48页 |
·正常心肌/细胞膜色谱(NM/CMC)和衰竭心肌/细胞膜色谱(FM/CMC)模型制备 | 第48-49页 |
·全二维比较细胞膜色谱分析系统 | 第49-51页 |
·H9c2 细胞活力测定 | 第51页 |
·细胞外液乳酸脱氢酶(LDH)水平的测定 | 第51-52页 |
·分子对接研究 | 第52页 |
·竞争置换实验 | 第52页 |
·细胞凋亡和死亡的流式细胞仪检测 | 第52页 |
·蛋白印迹分析(Western bloting) | 第52-53页 |
·结果和讨论 | 第53-71页 |
·附子对阿霉素诱导的心肌病的心脏保护作用 | 第53-54页 |
·细胞膜色谱柱制备过程的优化 | 第54-55页 |
·全二维比较细胞膜色谱/整体柱/飞行时间质谱分析系统的专属性考察 | 第55-57页 |
·应用于附子和四逆汤抗心衰活性组分的筛选 | 第57-64页 |
·TALA 对 H9c2 细胞活力和细胞膜的完整性的影响 | 第64-66页 |
·TALA 和 14乙酰 TALA 的结合靶标分析 | 第66-69页 |
·TALA 与 K+通道阻滞剂 4AP 的协同作用 | 第69-71页 |
·本章小结 | 第71-72页 |
第4章 四逆汤活性组分作用靶标群的鉴定研究 | 第72-97页 |
·引言 | 第72页 |
·材料与方法 | 第72-76页 |
·试剂和材料 | 第72-73页 |
·大鼠心梗模型构建和心功能评价 | 第73页 |
·组织蛋白提取和酶解 | 第73-74页 |
·H9c2 心肌细胞培养 | 第74页 |
·DARTS 实验 | 第74页 |
·DIGE 实验和胶内蛋白酶解 | 第74-75页 |
·nanoLC-LTQ-Orbitrap-MS 分析 | 第75页 |
·蛋白组学信息分析 | 第75-76页 |
·结果与讨论 | 第76-95页 |
·心脏超声心动图和病理切片分析 | 第76-78页 |
·Label-free 蛋白组学分析 | 第78-81页 |
·差异蛋白筛选和功能分析 | 第81-90页 |
·DARTS 技术应用于四逆汤心肌直接作用靶标筛选分析 | 第90-93页 |
·靶标蛋白功能和网络分析 | 第93-95页 |
·本章小结 | 第95-97页 |
综述 | 第97-102页 |
参考文献 | 第102-116页 |
在读期间发表论文和获奖情况 | 第116-118页 |
致谢 | 第118-119页 |