| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 目录 | 第9-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-31页 |
| ·杆状病毒表达系统的介绍 | 第13-21页 |
| ·杆状病毒的的分类和基本结构 | 第13-15页 |
| ·杆状病毒的生活史 | 第15-17页 |
| ·AcMNPV 基因概述 | 第17-19页 |
| ·杆状病毒表达系统的优越性 | 第19-20页 |
| ·Bac-to-Bac 操作系统 | 第20-21页 |
| ·Gp64 蛋白介绍 | 第21-31页 |
| ·Gp64 蛋白结构 | 第22-25页 |
| ·Gp64 蛋白功能 | 第25-26页 |
| ·Gp64 蛋白研究进展 | 第26-31页 |
| 第二章 Gp64 基因在 E.coli 野生型 BL21 中的表达 | 第31-43页 |
| ·实验材料 | 第31-34页 |
| ·实验菌株 | 第31页 |
| ·实验药品 | 第31页 |
| ·各种实验所需溶液 | 第31-33页 |
| ·实验仪器 | 第33-34页 |
| ·实验试剂盒 | 第34页 |
| ·实验方案 | 第34-37页 |
| ·引物设计合成 | 第34-35页 |
| ·重组子 pET28a-Gp64 构建 | 第35-37页 |
| ·重组子 pET28a-Gp64 的检测 | 第37页 |
| ·蛋白的诱导表达 | 第37页 |
| ·实验结果 | 第37-41页 |
| ·Gp64 基因检测 | 第37-38页 |
| ·Gp64 基因 Ta 克隆和 pET28a 酶切检测 | 第38-39页 |
| ·Gp64 基因和 pET28a 凝胶电泳回收检测 | 第39页 |
| ·重组子 pET28a-Gp64 PCR 检测和酶切检测 | 第39-40页 |
| ·重组子 pET28a-Gp64 测序结果分析 | 第40-41页 |
| ·Gp64 蛋白表达结果 | 第41页 |
| ·小结及结果分析 | 第41-43页 |
| 第三章 截短 Gp64 基因在 E.coli 野生型 BL21 中的表达 | 第43-49页 |
| ·实验材料 | 第43页 |
| ·实验方案 | 第43-44页 |
| ·引物设计合成 | 第43-44页 |
| ·重组子的构建及检测 | 第44页 |
| ·重组蛋白的诱导表达 | 第44页 |
| ·实验结果 | 第44-48页 |
| ·截短 Gp64 基因检测 | 第44-45页 |
| ·截短 Gp64 基因 Ta 克隆酶切检测 | 第45页 |
| ·截短 Gp64 基因和 pET28a 凝胶电泳回收检测 | 第45-46页 |
| ·重组子 pET28a-截短 Gp64 PCR 检测和酶切检测 | 第46-47页 |
| ·重组子 pET28a-截短 Gp64 测序结果分析 | 第47页 |
| ·截短 Gp64 基因表达结果 | 第47-48页 |
| ·小结及结果分析 | 第48-49页 |
| 第四章 Gp64 蛋白的优化表达、纯化及抗体制备 | 第49-69页 |
| ·实验材料 | 第49-51页 |
| ·实验菌株 | 第49页 |
| ·实验药品 | 第49页 |
| ·实验所需溶液 | 第49-50页 |
| ·实验仪器 | 第50-51页 |
| ·试剂盒 | 第51页 |
| ·实验方案 | 第51-57页 |
| ·Gp64 蛋白在 E.coli 野生型 BL21 中的优化表达 | 第51-52页 |
| ·Gp64 蛋白在 E.coli 野生型 BL21 中的表达可溶性检测 | 第52-53页 |
| ·在 E.coli 野生型 BL21 中表达 Gp64 蛋白的初步纯化 | 第53-54页 |
| ·Gp64 蛋白的电透析纯化及定量（一） | 第54页 |
| ·Gp64 蛋白电透析纯化及定量（二） | 第54页 |
| ·目的蛋白获得 | 第54-55页 |
| ·Gp64 蛋白抗体的制备 | 第55页 |
| ·抗体特异性检测(一) | 第55-56页 |
| ·抗体特异性检测(二) | 第56-57页 |
| ·实验结果 | 第57-68页 |
| ·Gp64 蛋白优化表达结果 | 第57-62页 |
| ·Gp64 蛋白可溶性检测 | 第62-63页 |
| ·Gp64 蛋白纯化 | 第63-65页 |
| ·Gp64 蛋白电透析纯化及定量结果 | 第65-66页 |
| ·Gp64 蛋白抗体特异性检测(一) | 第66-67页 |
| ·Gp64 蛋白抗体特异性检测(二) | 第67-68页 |
| ·小结及结果分析 | 第68-69页 |
| 第五章 Gp64 蛋白在酵母细胞 AH109 中的表达 | 第69-79页 |
| ·实验材料 | 第69-70页 |
| ·实验菌株 | 第69页 |
| ·实验药品 | 第69页 |
| ·各种实验所需溶液 | 第69-70页 |
| ·实验仪器 | 第70页 |
| ·实验试剂盒 | 第70页 |
| ·实验方案 | 第70-72页 |
| ·引物设计合成 | 第70-71页 |
| ·重组子 pGBKT7-Gp64 构建 | 第71页 |
| ·重组子 pGBKT7-Gp64 的检测 | 第71页 |
| ·重组子 pGBKT7-Gp64 转化酵母细胞 AH109 | 第71-72页 |
| ·PCR 检测重组子 pGBKT7-Gp64 转化阳性菌 | 第72页 |
| ·蛋白质印记检测重组子 pGBKT7-Gp64 的表达 | 第72页 |
| ·实验结果 | 第72-78页 |
| ·pGBKT7 酶切验证结果 | 第72-73页 |
| ·Gp64 和 pGNKT7 凝胶电泳回收检测 | 第73-74页 |
| ·重组子 pGBKT7-Gp64PCR 检测和酶切检测 | 第74-75页 |
| ·重组子 pGBKT7-Gp64 测序结果分析 | 第75页 |
| ·重组子 pGBKT7-Gp64 转化酵母细胞 AH109 结果 | 第75-76页 |
| ·重组子 pGBKT7-Gp64 转化酵母阳性菌检测 | 第76-77页 |
| ·重组子 pGBKT7-Gp64 在酵母细胞中表达检测 | 第77-78页 |
| ·实验结果 | 第78-79页 |
| 第六章 结论与展望 | 第79-81页 |
| ·实验结论 | 第79-80页 |
| ·实验展望 | 第80-81页 |
| 参考文献 | 第81-91页 |
| 攻读硕士期间已发表论文 | 第91-93页 |
| 致谢 | 第93-95页 |
| 附录 | 第95-100页 |
| 附录一 Gp64 序列 | 第95-96页 |
| 附录二 pET28a-Gp64 正向和反向测序 | 第96-97页 |
| 附录三 稀有密码子分析图和跨膜区域稀有密码子分布 | 第97-98页 |
| 附录四 截短 Gp64 基因序列 | 第98-99页 |
| 附录五 pET28a-截短 Gp64 正向和反向测序 | 第99-100页 |
| 附录六 pGBKT7-Gp64 正向和反向测序 | 第100页 |
