| 摘要 | 第1-8页 |
| 文献综述 | 第8-15页 |
| 1 细胞因子研究进展 | 第8-10页 |
| ·细胞因子的产生和分类 | 第8-9页 |
| ·细胞因子作用特点 | 第9页 |
| ·白细胞介素的研究进展 | 第9-10页 |
| 2 IL-4的研究进展 | 第10-15页 |
| ·IL-4的产生 | 第11页 |
| ·IL-4的结构特点 | 第11页 |
| ·IL-4受体研究进展 | 第11-12页 |
| ·IL-4的生物学功能 | 第12-13页 |
| ·IL-4与疾病关系及免疫佐剂作用 | 第13-15页 |
| 前言 | 第15-16页 |
| 实验一 pcDNA3.1(+)-ChIL-4的构建 | 第16-34页 |
| 1 材料 | 第16-19页 |
| ·实验材料 | 第16页 |
| ·主要试剂 | 第16页 |
| ·主要试剂的配制 | 第16-18页 |
| ·主要仪器 | 第18-19页 |
| 2 方法 | 第19-25页 |
| ·提取鸡脾脏细胞总RNA | 第19-20页 |
| ·反转录 | 第20页 |
| ·PCR扩增鸡IL-4基因 | 第20-21页 |
| ·PCR产物的纯化回收 | 第21页 |
| ·PCR产物电泳切胶 | 第21页 |
| ·DNA目的条带的回收 | 第21页 |
| ·ChIL-4与克隆载体pMD-19T的连接 | 第21-22页 |
| ·ChIL-4与克隆载体pMD-19T的连接 | 第21页 |
| ·pMD19-T-ChIL-4的转化 | 第21-22页 |
| ·重组克隆载体pMD19-T-ChIL-4的小量制备 | 第22页 |
| ·pMD19-T-ChIL-4的鉴定 | 第22-23页 |
| ·pMD19-T-ChIL-4 PCR鉴定 | 第22页 |
| ·pMD19-T-ChIL-4双酶切鉴定 | 第22页 |
| ·pMD19-T-ChIL-4的序列测定 | 第22-23页 |
| ·真核表达载体pcDNA3.1(+)-ChIL-4的构建 | 第23-25页 |
| ·表达载体pcDNA3.1(+)和重组克隆载体pMD19-T-ChIL-4的双酶切 | 第23页 |
| ·表达载体pcDNA3.1(+)与目的片段ChIL-4的连接 | 第23-24页 |
| ·连接产物pcDNA3.1(+)-ChIL-4的转化 | 第24页 |
| ·重组表达载体pcDNA3.1(+)-ChIL-4的鉴定 | 第24页 |
| ·SDS碱裂解法大量制备pcDNA3.1(+)-ChIL-4 | 第24-25页 |
| ·聚乙二醇沉淀法纯化粗制pcDNA3.1(+)-CHIL-4 | 第25页 |
| 3 结果与分析 | 第25-32页 |
| ·pMD19-T-ChIL-4的构建 | 第25-29页 |
| ·鸡脾脏细胞总RNA的提取与检测结果 | 第25页 |
| ·PCR产物ChIL-4的电泳图谱 | 第25-26页 |
| ·纯化回收PCR产物的电泳检测 | 第26页 |
| ·重组克隆载体pMD19-T-ChIL-4的鉴定 | 第26-29页 |
| ·重组克隆载体pMD19-T-ChIL-4的序列测定 | 第29页 |
| ·重组表达载体pcDNA3.1(+)-ChIL-4的鉴定 | 第29-32页 |
| 4 讨论 | 第32-34页 |
| 实验二 pcDNA3.1(+)-ChIL-4对鸡免疫功能的影响 | 第34-43页 |
| 1 材料 | 第34-35页 |
| ·实验材料 | 第34页 |
| ·主要试剂的配置 | 第34-35页 |
| ·主要仪器 | 第35页 |
| 2 方法 | 第35-36页 |
| ·动物分组与处理 | 第35-36页 |
| ·鸡活性T、B淋巴细胞百分率的测定 | 第36页 |
| ·鸡新城疫抗体的测定-血凝抑制试验 | 第36页 |
| ·鸡传染性支气管炎抗体的检测 | 第36页 |
| ·免疫器官指数测定 | 第36页 |
| ·数据统计与处理 | 第36页 |
| 3 结果与分析 | 第36-41页 |
| ·pcDNA3.1(+)-ChIL-4对正常雏鸡血液中活性T、B淋巴细胞百分率的影响 | 第36-39页 |
| ·pcDNA3.1(+)-ChIL-4对雏鸡血液中活性T淋巴细胞百分率的影响 | 第36-38页 |
| ·pcDNA3.1(+)-ChIL-4对雏鸡血液中活性B淋巴细胞百分率的影响 | 第38-39页 |
| ·pcDNA3.1(+)-ChIL-4对ND-HI抗体效价的影响 | 第39-40页 |
| ·pcDNA3.1(+)-ChIL-4对IB抗体浓度的影响 | 第40-41页 |
| ·pcDNA3.1(+)-ChIL-4对鸡免疫器官指数的影响 | 第41页 |
| 4 讨论 | 第41-43页 |
| 结论 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-48页 |
| Abstract | 第48-50页 |
| 附录 | 第50-52页 |
| 致谢 | 第52页 |
