| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-8页 |
| 1 前言 | 第8-19页 |
| ·黑曲霉概述 | 第8-9页 |
| ·黑曲霉的生理特征 | 第8页 |
| ·黑曲霉的应用 | 第8页 |
| ·黑曲霉基因组 | 第8-9页 |
| ·组蛋白乙酰转移酶 | 第9-11页 |
| ·组蛋白乙酰转移酶的分类 | 第9页 |
| ·组蛋白乙酰转移酶的功能 | 第9-10页 |
| ·组蛋白乙酰转移酶的研究 | 第10-11页 |
| ·黑曲霉的研究进展 | 第11-12页 |
| ·黑曲霉基因功能的研究进展 | 第11页 |
| ·黑曲霉菌种改造的研究进展 | 第11-12页 |
| ·丝状真菌基因敲除技术 | 第12-13页 |
| ·基因敲除原理 | 第12页 |
| ·同源重组 | 第12页 |
| ·基因敲除的载体设计 | 第12页 |
| ·基因敲除技术的应用 | 第12-13页 |
| ·丝状真菌遗传转化系统 | 第13-17页 |
| ·可转化的丝状真菌种类 | 第13页 |
| ·丝状真菌遗传转化方法 | 第13-15页 |
| ·丝状真菌转化的选择标记 | 第15-16页 |
| ·丝状真菌转化系统的应用 | 第16-17页 |
| ·本论文立题背景及研究内容 | 第17-19页 |
| ·立题背景 | 第17-18页 |
| ·研究意义 | 第18页 |
| ·研究内容 | 第18-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-37页 |
| ·实验材料 | 第19-24页 |
| ·菌种与质粒 | 第19页 |
| ·工具酶及实验主要试剂 | 第19-21页 |
| ·主要仪器和设备 | 第21页 |
| ·培养基及主要溶液 | 第21-24页 |
| ·实验方法 | 第24-37页 |
| ·黑曲霉(Aspergillus niger ATCC1015)基因组DNA的提取 | 第24-25页 |
| ·琼脂糖DNA凝胶电泳 | 第25页 |
| ·大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备 | 第25页 |
| ·敲除载体pLH109的构建 | 第25-32页 |
| ·质粒pLH111的构建 | 第32-33页 |
| ·质粒pLH112的构建 | 第33页 |
| ·农杆菌的电转化 | 第33-34页 |
| ·农杆菌介导黑曲霉转化 | 第34-35页 |
| ·敲除菌株的筛选及验证 | 第35-36页 |
| ·黑曲霉发酵 | 第36页 |
| ·柠檬酸产量的检测方法 | 第36-37页 |
| 3 结果与讨论 | 第37-56页 |
| ·A.niger基因组DNA的提取 | 第37页 |
| ·敲除载体pLH109、pLH111和pLH112的构建 | 第37-49页 |
| ·敲除载体pLH109的构建 | 第38-42页 |
| ·敲除载体pLH111的构建 | 第42-45页 |
| ·敲除载体pLH112的构建 | 第45-49页 |
| ·敲除载体pLH109、pLH111和pLH112的农杆菌电转化与A.niger介导转化 | 第49-53页 |
| ·敲除载体pLH109、pLH111和pLH112的农杆菌电转化 | 第49页 |
| ·△GNAT、AMOZ/SAS和AHATb敲除菌株的筛选 | 第49-53页 |
| ·突变株△GNAT、△MOZ/SAS、△ HATb与野生株的表型比较 | 第53-54页 |
| ·柠檬酸产量的测定 | 第54-56页 |
| 4 结论 | 第56-57页 |
| 5 展望 | 第57-58页 |
| 6 参考文献 | 第58-66页 |
| 7 攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第66-67页 |
| 8 致谢 | 第67页 |
