| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-11页 |
| 简写说明 | 第11-17页 |
| 第一章 概论 | 第17-39页 |
| 1 基因表达的表观遗传调控 | 第17-18页 |
| 2 基因沉默 | 第18-20页 |
| ·转录水平基因沉默 | 第19页 |
| ·转录后水平基因沉默 | 第19-20页 |
| ·基因沉默的生物学意义 | 第20页 |
| 3 DNA 甲基化 | 第20-28页 |
| ·DNA 甲基化及其建立 | 第20-21页 |
| ·DNA 甲基化转移酶 | 第21页 |
| ·DNA 甲基化与基因表达 | 第21-22页 |
| ·DNA 甲基化与肿瘤 | 第22-25页 |
| ·肿瘤基因中的DNA 甲基化异常与肿瘤发生 | 第22-23页 |
| ·DNA甲基化与肿瘤的治疗 | 第23-25页 |
| ·基于抑癌基因启动子区高甲基化而进行的去甲基化治疗 | 第23页 |
| ·基于肿瘤相关癌基因启动子区低甲基化而进行的甲基化治疗 | 第23-25页 |
| ·RNA 介导的DNA 甲基化 | 第24页 |
| ·DNA 介导的DNA 甲基化 | 第24-25页 |
| ·DNA 甲基化检测的方法 | 第25-28页 |
| 4 组蛋白密码与基因表达 | 第28-33页 |
| ·组蛋白甲基化 | 第29-31页 |
| ·组蛋白甲基化与基因表达 | 第29-30页 |
| ·组蛋白去甲基化 | 第30页 |
| ·组蛋白甲基化与DNA 甲基化 | 第30-31页 |
| ·组蛋白甲基化与肿瘤 | 第31页 |
| ·组蛋白乙酰化和去乙酰化与基因表达 | 第31-32页 |
| ·组蛋白乙酰化/去乙酰化与DNA 甲基化的关系 | 第31-32页 |
| ·组蛋白乙酰化/去乙酰化与组蛋白甲基化的关系 | 第32页 |
| ·组蛋白乙酰化/去乙酰化与肿瘤 | 第32页 |
| ·组蛋白的其他修饰方式 | 第32-33页 |
| ·研究组蛋白共价修饰的分析方法 | 第33页 |
| 5 凋亡抑制因子survivin 与肿瘤 | 第33-35页 |
| ·survivin 的分子结构与功能 | 第33-34页 |
| ·survivin 与肿瘤 | 第34页 |
| ·针对survivin 的肿瘤靶向治疗 | 第34-35页 |
| 6 本文的研究内容及意义 | 第35-39页 |
| ·前期研究基础 | 第35-38页 |
| ·核酸药物SurKex 的设计 | 第35-37页 |
| ·SurKex 的药效学实验 | 第37-38页 |
| ·对SurKex 诱导survivin 沉默机理的初步探讨 | 第38页 |
| ·本论文主要研究内容 | 第38页 |
| ·本论文的研究意义 | 第38-39页 |
| 第二章 SurKex诱导survivin启动子部位甲基化的方式 | 第39-49页 |
| 1 材料与方法 | 第39-44页 |
| ·材料与主要试剂 | 第39页 |
| ·主要仪器 | 第39-40页 |
| ·细胞培养 | 第40页 |
| ·转染 | 第40页 |
| ·基因组抽提 | 第40-41页 |
| ·亚硫酸氢钠处理基因组DNA | 第41页 |
| ·纯化基因组DNA 及终止亚硫酸氢钠反应 | 第41页 |
| ·PCR 扩增目的片断 | 第41-42页 |
| ·电泳检测 | 第42页 |
| ·回收目的条带 | 第42-43页 |
| ·TA 克隆 | 第43页 |
| ·挑取并PCR 鉴定转化子，对正确插入的转化子进行扩大培养 | 第43页 |
| ·测序 | 第43-44页 |
| 2 结果 | 第44-49页 |
| 3 讨论 | 第49页 |
| 第三章 SurKex 对与survivin 特异结合的组蛋白的共价修饰的影响 | 第49-59页 |
| 1 材料与方法 | 第49-53页 |
| ·材料与主要试剂 | 第49-50页 |
| ·主要仪器 | 第50页 |
| ·细胞培养 | 第50页 |
| ·转染 | 第50页 |
| ·染色质免疫沉淀分析 | 第50-53页 |
| ·超声剪切基因组DNA | 第50-51页 |
| ·免疫沉淀 | 第51-52页 |
| ·PCR 扩增结合在免疫沉淀的组蛋白上的DNA | 第52-53页 |
| 2 结果 | 第53-57页 |
| ·超声条件的确定 | 第54-55页 |
| ·免疫沉淀实验系统的可靠性验证 | 第55-56页 |
| ·SurKex 对H3、H4 特定位点乙酰化、甲基化修饰的影响 | 第56-57页 |
| 3 讨论 | 第57-59页 |
| 第四章 DNA 甲基化、组蛋白共价修饰在survivin 沉默中的作用 | 第59-71页 |
| 1 材料与方法 | 第60-63页 |
| ·材料与主要试剂 | 第60页 |
| ·主要仪器 | 第60页 |
| ·细胞培养 | 第60页 |
| ·转染 | 第60页 |
| ·RT-PCR | 第60-63页 |
| ·RNA 抽提 | 第60-61页 |
| ·反转录 | 第61-62页 |
| ·PCR | 第62-63页 |
| ·电泳 | 第63页 |
| ·Bisulfite sequencing | 第63页 |
| ·ChIP 分析 | 第63页 |
| 2 结果 | 第63-69页 |
| ·不同抑制剂对SurKex 抑制survivin mRNA 表达的影响 | 第63-65页 |
| ·不同抑制剂对SurKex 诱导survivin 启动子区特定CpG位点甲基化的影响 | 第65-67页 |
| ·不同抑制剂对survivin 启动子区结合的组蛋白共价修饰的影响 | 第67-69页 |
| 3 讨论 | 第69-71页 |
| 第五章 组蛋白共价修饰对DNMT1 表达的影响 | 第71-73页 |
| 1 材料与方法 | 第71页 |
| ·材料与主要试剂 | 第71页 |
| ·主要仪器 | 第71页 |
| ·细胞培养 | 第71页 |
| ·转染 | 第71页 |
| ·RT-PCR | 第71页 |
| 2 结果 | 第71-73页 |
| ·组蛋白去乙酰化对DNMT1 表达的影响 | 第71-72页 |
| ·组蛋白甲基化对DNMT1 表达的影响 | 第72-73页 |
| 3 讨论 | 第73页 |
| 第六章 总结与展望 | 第73-78页 |
| 参考文献 | 第78-89页 |
| 附录1 | 第89-99页 |
| 附录2 | 第99-100页 |
| 附录3 | 第100-101页 |
| 攻读博士学位期间发表论文情况 | 第101页 |
| 攻读博士学位期间发表会议论文情况 | 第101-102页 |
| 致谢 | 第102-104页 |
