| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-14页 |
| 英文缩略表 | 第14-15页 |
| 第一章 引言 | 第15-22页 |
| ·禽流感病毒概述 | 第15页 |
| ·历史上的H7亚型 | 第15-16页 |
| ·H7N9的发生、发展 | 第16-19页 |
| ·H7N9的危害 | 第19-20页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第20-22页 |
| 第二章 H7N9 DNA疫苗PVAH7的免疫保护效力研究 | 第22-36页 |
| ·材料和方法 | 第22-27页 |
| ·菌株、质粒及病毒 | 第22页 |
| ·细胞、SPF鸡胚及实验动物 | 第22页 |
| ·酶及主要试剂 | 第22页 |
| ·血清与抗体 | 第22-23页 |
| ·主要仪器 | 第23页 |
| ·H7N9质粒PVAH7的构建与鉴定 | 第23页 |
| ·重组质粒的构建 | 第23页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第23页 |
| ·重组质粒PVAH7在293T细胞中的表达 | 第23-24页 |
| ·转染用质粒的中量提取 | 第23页 |
| ·重组质粒的瞬时转染 | 第23-24页 |
| ·间接免疫荧光鉴定 | 第24页 |
| ·激光扫描共聚焦显微镜观察转染后0PTIAH7蛋白在293T细胞中的表达 | 第24页 |
| ·转染用质粒的中量提取 | 第24页 |
| ·重组质粒的瞬时转染 | 第24页 |
| ·激光扫描共聚焦显微镜的鉴定 | 第24页 |
| ·重组质粒PVAH7表达蛋白的WEASTERN-BLOT鉴定 | 第24-25页 |
| ·重组质粒的瞬时转染 | 第24-25页 |
| ·转染后细胞的裂解 | 第25页 |
| ·重组蛋白的WEASTERN-BLOT鉴定 | 第25页 |
| ·内参蛋白的WEASTERN-BLOT鉴定 | 第25页 |
| ·DNA疫苗PVAH7的大量制备及其纯化 | 第25页 |
| ·测定病毒的鸡胚半数致死量EID_(50) | 第25-26页 |
| ·对SPF鸡的免疫保护试验 | 第26页 |
| ·试验分组、免疫方法及免疫程序 | 第26页 |
| ·HI抗体的测定 | 第26页 |
| ·中和(NT)抗体的测定 | 第26页 |
| ·攻毒保护实验及病毒的分离和滴定 | 第26页 |
| ·对BALB/C小鼠的免疫保护试验 | 第26-27页 |
| ·试验分组、免疫方法及免疫程序 | 第26-27页 |
| ·HI抗体的测定 | 第27页 |
| ·中和(NT)抗体的测定 | 第27页 |
| ·攻毒保护实验及病毒的分离和滴定 | 第27页 |
| ·结果 | 第27-34页 |
| ·重组质粒PVAH7的酶切鉴定 | 第27-28页 |
| ·单酶切鉴定 | 第27-28页 |
| ·双酶切鉴定 | 第28页 |
| ·间接免疫荧光(IFA)检测结果 | 第28-29页 |
| ·PVAH7重组蛋白在细胞内的定位 | 第29页 |
| ·PVAH7重组蛋白的WEASTERN-BLOT鉴定 | 第29-30页 |
| ·鸡胚半数致死量EID_(50)的测定 | 第30页 |
| ·PVAH7 DNA疫苗超螺旋含量的测定 | 第30页 |
| ·PVAH7对SPF鸡免疫保护效力的评估 | 第30-32页 |
| ·免疫和攻毒后HI抗体和NT抗体的变化 | 第30-31页 |
| ·临床症状观察 | 第31页 |
| ·病毒的分离鉴定结果 | 第31-32页 |
| ·PVAH7对BALB/C小鼠免疫保护效力的评估 | 第32-34页 |
| ·免疫和攻毒后HI抗体和NT抗体的变化 | 第32-33页 |
| ·攻毒后小鼠体重变化 | 第33页 |
| ·发病与死亡情况 | 第33页 |
| ·小鼠的组织脏器的病毒滴定结果 | 第33-34页 |
| ·讨论 | 第34-36页 |
| 第三章 H7N9 DNA疫苗PCAH7的免疫保护效力评估 | 第36-51页 |
| ·材料和方法 | 第36-41页 |
| ·菌株、质粒及病毒 | 第36页 |
| ·细胞、SPF鸡胚及实验动物 | 第36页 |
| ·酶及主要试剂 | 第36页 |
| ·血清与抗体 | 第36-37页 |
| ·主要仪器 | 第37页 |
| ·H7N9 DNA质粒PCAH7的构建与鉴定 | 第37页 |
| ·重组质粒的构建 | 第37页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第37页 |
| ·重组质粒PCAH7在293T细胞中的表达 | 第37-38页 |
| ·转染用质粒的中量提取 | 第37页 |
| ·重组质粒的瞬时转染 | 第37-38页 |
| ·间接免疫荧光鉴定 | 第38页 |
| ·激光扫描共聚焦显微镜观察转染后OPTIAH7蛋白在293T细胞中的表达 | 第38页 |
| ·转染用质粒的中量提取 | 第38页 |
| ·重组质粒的瞬时转染 | 第38页 |
| ·激光扫描共聚焦显微镜的鉴定 | 第38页 |
| ·重组质粒PCAH7表达蛋白的WEASTERN-BLOT鉴定 | 第38-39页 |
| ·重组质粒的瞬时转染 | 第38-39页 |
| ·转染后细胞的裂解 | 第39页 |
| ·重组蛋白的WEASTERN-BLOT鉴定 | 第39页 |
| ·内参蛋白的WEASTERN-BLOT鉴定 | 第39页 |
| ·DNA疫苗PCAH7的大量制备及其纯化 | 第39页 |
| ·对SPF鸡的免疫保护试验 | 第39-40页 |
| ·试验分组、免疫方法及免疫程序 | 第39-40页 |
| ·HI抗体的测定 | 第40页 |
| ·中和(NT)抗体的测定 | 第40页 |
| ·攻毒保护实验及病毒的分离和滴定 | 第40页 |
| ·对BALB/C小鼠的免疫保护试验 | 第40-41页 |
| ·试验分组、免疫方法及免疫程序 | 第40页 |
| ·HI抗体的测定 | 第40-41页 |
| ·中和(NT)抗体的测定 | 第41页 |
| ·攻毒保护实验及病毒的分离和滴定 | 第41页 |
| ·结果 | 第41-48页 |
| ·重组质粒PCAH7的酶切鉴定 | 第41-42页 |
| ·单酶切鉴定 | 第41页 |
| ·双酶切鉴定 | 第41-42页 |
| ·间接免疫荧光(IFA)检测结果 | 第42页 |
| ·PCAH7重组蛋白在细胞内的定位 | 第42-43页 |
| ·PCAH7重组蛋白的WEASTERN-BLOT鉴定 | 第43页 |
| ·PCAH7 DNA疫苗超螺旋含量的测定 | 第43-44页 |
| ·PCAH7对SPF鸡免疫保护效力的评估 | 第44-46页 |
| ·免疫和攻毒后HI抗体和NT抗体的变化 | 第44-45页 |
| ·临床症状观察 | 第45页 |
| ·病毒的分离鉴定结果 | 第45-46页 |
| ·PCAH7对BALB/C小鼠免疫保护效力的评估 | 第46-48页 |
| ·免疫和攻毒后HI抗体和NT抗体的变化 | 第46-47页 |
| ·攻毒后小鼠体重变化 | 第47页 |
| ·发病与死亡情况 | 第47-48页 |
| ·小鼠的组织脏器的病毒滴定结果 | 第48页 |
| ·讨论 | 第48-51页 |
| 第四章 全文结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 作者简历 | 第59页 |
