摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-11页 |
英文缩略表 | 第11-12页 |
图表目录 | 第12-13页 |
第一章 引言 | 第13-21页 |
·鸭坦布苏病毒病概述 | 第13-16页 |
·病原学 | 第13页 |
·基因组结构 | 第13-14页 |
·结构蛋白与功能 | 第14-15页 |
·流行病学 | 第15页 |
·诊断与防控 | 第15-16页 |
·荧光微量中和试验概述 | 第16-17页 |
·黄病毒E蛋白研究进展 | 第17-20页 |
·E蛋白结构域Ⅲ(EDⅢ)的研究进展 | 第18-19页 |
·E蛋白B细胞抗原表位研究进展 | 第19-20页 |
·本文研究目的及意义 | 第20-21页 |
第二章 鸭坦布苏病毒荧光微量中和试验的建立 | 第21-29页 |
摘要 | 第21页 |
·材料 | 第21-22页 |
·病毒和细胞 | 第21页 |
·单克隆抗体和相关血清 | 第21页 |
·主要溶液及细胞培养基的配制 | 第21-22页 |
·方法 | 第22-23页 |
·病毒滴度测定 | 第22页 |
·鸡胚中和试验和细胞病变微量中和试验 | 第22页 |
·荧光微量中和试验 | 第22-23页 |
·荧光微量中和试验特异性试验 | 第23页 |
·荧光微量中和试验重复性试验 | 第23页 |
·临床样品检测结果 | 第23页 |
·结果 | 第23-28页 |
·荧光微量中和试验与鸡胚中和试验对比 | 第23页 |
·荧光微量中和试验与细胞病变微量中和试验对比 | 第23-24页 |
·荧光微量中和试验重复性 | 第24-26页 |
·荧光微量中和试验特异性 | 第26页 |
·荧光微量中和试验检测临床样品 | 第26-28页 |
·讨论 | 第28-29页 |
第三章 鸭坦布苏病毒EDⅢ结构域的原核表达与抗原性分析 | 第29-40页 |
摘要 | 第29页 |
·材料 | 第29-31页 |
·病毒株、菌株和质粒 | 第29页 |
·细胞系和实验动物 | 第29页 |
·主要试剂及溶液配置 | 第29-30页 |
·主要仪器设备和器材 | 第30-31页 |
·方法 | 第31-34页 |
·EDⅢ核苷酸序列密码子优化与合成 | 第31页 |
·原核表达载体构建 | 第31-32页 |
·重组蛋白的诱导表达 | 第32页 |
·重组蛋白的纯化 | 第32-33页 |
·SDS-PAGE和Western Blot鉴定 | 第33页 |
·BALB/c小鼠免疫 | 第33-34页 |
·间接ELISA检测血清抗体 | 第34页 |
·间接免疫荧光试验检测血清抗体 | 第34页 |
·中和抗体检测 | 第34页 |
·结果 | 第34-39页 |
·编码鸭坦布苏病毒E蛋白结构域Ⅲ核苷酸序列的优化 | 第35页 |
·重组质粒的构建与鉴定 | 第35-36页 |
·SDS-PAGE和Western Blot鉴定重组蛋白 | 第36-37页 |
·间接ELISA和IFA检测结果 | 第37-38页 |
·微量血清中和试验检测免疫小鼠血清 | 第38-39页 |
·讨论 | 第39-40页 |
第四章 鸭坦布苏病毒E蛋白线性B细胞抗原表位鉴定 | 第40-49页 |
摘要 | 第40页 |
·材料 | 第40页 |
·病毒株、实验动物 | 第40页 |
·主要试剂及仪器 | 第40页 |
·方法 | 第40-42页 |
·抗原肽的截短设计与合成 | 第40-41页 |
·偶联多肽免疫小鼠 | 第41页 |
·小鼠血清间接免疫荧光检测 | 第41-42页 |
·小鼠血清ELISA检测 | 第42页 |
·小鼠血清中和活性检测 | 第42页 |
·抗原表位的同源性分析 | 第42页 |
·结果 | 第42-48页 |
·小鼠血清间接免疫荧光检测结果 | 第42-45页 |
·小鼠血清ELISA检测结果 | 第45-46页 |
·小鼠血清中和活性检测结果 | 第46页 |
·抗原表位同源性分析 | 第46-48页 |
·讨论 | 第48-49页 |
第五章 全文结论 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-55页 |
致谢 | 第55-56页 |
作者简历 | 第56页 |