| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 引言 | 第11-13页 |
| 1 绪论 | 第13-26页 |
| ·香鱼的生物学特性 | 第13-14页 |
| ·香鱼养殖中的病害 | 第14-16页 |
| ·香鱼寄生虫病 | 第14-15页 |
| ·香鱼细菌性疾病 | 第15-16页 |
| ·香鱼真菌性疾病 | 第16页 |
| ·NFκB/IκB 家族 | 第16-22页 |
| ·NF-κB 蛋白家族及其结构特征 | 第17-19页 |
| ·IκB 蛋白家族及其结构特征 | 第19-20页 |
| ·I-κK 蛋白家族及其结构特征 | 第20-22页 |
| ·NF-κB 信号转导机制 | 第22-26页 |
| ·TNFα介导的 NF-κB 信号通路 | 第23页 |
| ·IL-1Rs/TLRs 介导的 NF-κB 信号通路 | 第23-24页 |
| ·T 细胞受体介导的 NF-κB 激活 | 第24页 |
| ·B 细胞受体介导的 NF-κB 激活 | 第24页 |
| ·旁路 NF-κB 途径 | 第24-26页 |
| 2 香鱼 PaIκBα 的基因克隆 | 第26-38页 |
| ·实验材料 | 第26-28页 |
| ·实验动物 | 第26页 |
| ·酶与试剂盒 | 第26页 |
| ·引物 | 第26页 |
| ·培养基及常用试剂配制 | 第26-27页 |
| ·菌株和载体 | 第27页 |
| ·实验仪器 | 第27页 |
| ·多序列比对和进化树分析中用到的各物种 IκBα 的氨基酸序列 | 第27-28页 |
| ·实验方法 | 第28-34页 |
| ·香鱼 RNA 的提取 | 第28-29页 |
| ·转录合成香鱼 cDNA 第一链 | 第29页 |
| ·目的基因 PaIκBα 的核心片段扩增 | 第29-30页 |
| ·切胶回收目的基因 PaIκBα | 第30-31页 |
| ·PCR 产物回收纯化后与 pMd19-Tvector 的连接 | 第31页 |
| ·CaCl2法制备大肠杆菌感受态细胞 | 第31页 |
| ·重组质粒的转化 | 第31-32页 |
| ·菌落 PCR 鉴定 | 第32页 |
| ·测序 | 第32页 |
| ·RACE cDNA 文库的构建 | 第32-33页 |
| ·RACE 法扩增 PaIκBα 基因的 3’末端序列 | 第33-34页 |
| ·RACE 法扩增 PaIκBα 基因的 5’末端序列 | 第34页 |
| ·PaIκBα 基因全长序列的获得 | 第34页 |
| ·结果与分析 | 第34-38页 |
| ·香鱼总 RNA 提取及检测 | 第34-35页 |
| ·核心片段克隆 | 第35-36页 |
| ·3’-RACE 结果和 5’-RACE 结果 | 第36-37页 |
| ·全长序列 | 第37-38页 |
| 3 香鱼 PaIκBα 序列生物信息学分析 | 第38-49页 |
| ·PaIκBα 同源性分析 | 第38-41页 |
| ·香鱼 PaIκBα 一级结构分析 | 第41页 |
| ·香鱼 PaIκBα 二级结构分析 | 第41-42页 |
| ·香鱼 PaIκBα 三级结构分析 | 第42-43页 |
| ·PaIκBα 跨膜结构分析 | 第43-44页 |
| ·PaIκBα 结构域分析 | 第44页 |
| ·PaIκBα 亚细胞定位分析 | 第44页 |
| ·PaIκBα 信号肽预测分析 | 第44-45页 |
| ·PaIκBα 磷酸化位点预测 | 第45页 |
| ·香鱼 PaIκBα 系统进化树建立 | 第45-47页 |
| ·讨论 | 第47-49页 |
| 4 半定量技术检测 PaIκBα 基因的表达模式 | 第49-61页 |
| ·实验材料 | 第49页 |
| ·实验动物 | 第49页 |
| ·实验所用菌种等材料 | 第49页 |
| ·实验方法 | 第49-52页 |
| ·香鱼各组织解剖及总 RNA 提取 | 第49页 |
| ·半定量技术分析 PaIκBα 的组织表达差异 | 第49-51页 |
| ·病原刺激实验 | 第51页 |
| ·脂多糖刺激试验 | 第51-52页 |
| ·氯化钠刺激试验 | 第52页 |
| ·黄芪多糖试验 | 第52页 |
| ·半定量检测 PaIκBα 在香鱼肝脏的表达模式分析 | 第52页 |
| ·实验结果 | 第52-61页 |
| ·总 RNA 提取及检测 | 第52页 |
| ·香鱼 PaIκBα 基因 mRNA 的组织表达特征 | 第52-53页 |
| ·不同处理对香鱼 PaIκBα 基因的表达模式分析 | 第53-57页 |
| ·讨论 | 第57-61页 |
| 5 结论 | 第61-64页 |
| ·香鱼核转录抑制因子 PaIκBα 的序列克隆 | 第61页 |
| ·半定量检测 PaIκBα 的表达模式 | 第61-62页 |
| ·半定量 RT-PCR 与荧光定量 PCR | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-77页 |
| 在学研究成果 | 第77-79页 |
| 致谢 | 第79页 |
