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鲈鱼CD4、TGF-β1基因的克隆与表达分析

摘要第1-5页
Abstract第5-10页
引言第10-12页
1 综述第12-21页
   ·CD4 基因第12-17页
     ·CD4 的结构第13页
     ·CD4~+T 发生第13-14页
     ·CD4 的 T 细胞作用第14-15页
     ·CD4 在鱼类中的研究状况第15-17页
   ·转化生长因子-β概述第17-20页
     ·转化生长因子的结构第17-18页
     ·TGF-β的信号通路第18页
     ·TGF-β的功能第18-19页
     ·TGF-β的在鱼类中研究状况第19-20页
   ·展望第20-21页
2 鲈鱼 CD4 基因的克隆第21-39页
   ·实验材料第21-22页
     ·实验对象第21页
     ·实验试剂第21页
     ·实验器材第21-22页
     ·实验试剂盒第22页
   ·实验方法第22-31页
     ·取样第22页
     ·鲈鱼总 RNA 提取第22-23页
     ·鲈鱼肝脏 RNA 第一链 cDNA 模板的合成第23页
     ·CD4 基因 5’Ready cDNA 和 3’Ready cDNA 的合成第23-24页
     ·鲈鱼 CD4 基因 cDNA 克隆第24-31页
     ·鲈鱼 CD4 全长的拼接第31页
   ·实验结果与分析第31-38页
     ·鲈鱼总 RNA 的提取第31-32页
     ·鲈鱼 CD4 基因核心、5’RACE、3’RACE 片段 PCR 结果第32-33页
     ·CD4 基因全长分析第33-34页
     ·CD4 系统发育分析第34-36页
     ·鲈鱼 CD4 基因同源性比较第36-37页
     ·鲈鱼 CD4 基因三维模型分析第37-38页
   ·讨论第38-39页
3 CD4 基因组织表达与溶藻弧菌对鲈鱼 CD 基因的表达影响第39-47页
   ·CD4 基因的组织表达第39-40页
     ·实验材料第39页
     ·实验方法第39-40页
   ·溶藻弧菌对鲈鱼 CD4 基因的表达的影响第40-41页
     ·材料与方法第40页
     ·荧光定量检测鲈鱼 CD4 与 18S 基因表达第40-41页
   ·实验结果第41-46页
     ·鲈鱼 CD4 组织表达结果第41-42页
     ·标准曲线第42页
     ·荧光定量 PCR 法检测标准品质粒第42-45页
     ·RT-PCR 检测高盐对鲈鱼 CD4 表达的影响第45-46页
   ·讨论第46-47页
4 鲈鱼 CD4 基因原核表达第47-54页
   ·实验材料第47-48页
     ·实验试剂第47-48页
     ·实验器材第48页
   ·实验方法第48-51页
     ·设计原核表达引物第48页
     ·PCR 获得目的片段第48-49页
     ·重组质粒第49-50页
     ·诱导第50页
     ·SDS-PAGE 电泳第50-51页
   ·实验结果第51-53页
     ·鲈鱼 CD4 基因胞外区 PCR 结果第51-52页
     ·克隆载体与表达载体酶切结果第52页
     ·诱导表达第52-53页
   ·讨论第53-54页
5 TGF-β1 基因的克隆第54-63页
   ·实验材料第54页
   ·实验方法第54-58页
     ·取样第54页
     ·鲈鱼总 RNA 提取第54页
     ·鲈鱼肝脏 RNA 第一链 cDNA 模板的合成第54页
     ·TGF-β1 基因 5’Ready cDNA 和 3’Ready cDNA 的合成第54页
     ·鲈鱼 TGF-β1 基因 cDNA 克隆第54-58页
   ·实验结果第58-59页
     ·鲈鱼总 RNA 的提取第58-59页
     ·鲈鱼 TGF-β1 基因核心、5’RACE、3’RACE 片段 PCR 结果第59页
   ·讨论第59-62页
     ·鲈鱼 TGF-β1 序列分析第59-61页
     ·TGF-β1 系统发育分析第61-62页
     ·鲈鱼 TGF-β1 基因同源性比较第62页
   ·讨论第62-63页
6 总结和展望第63-66页
   ·鲈鱼 CD4 总结第63-64页
     ·鲈鱼 CD4 分子的结构第63-64页
     ·鲈鱼 CD4 的系统发生及同源性分析第64页
     ·鲈鱼 CD4 基因分布与表达第64页
   ·鲈鱼 TGF-β1 总结第64-65页
     ·鲈鱼 TGF-β1 分子的结构第64-65页
     ·鲈鱼 TGF-β1 的系统发生及同源性分析第65页
   ·展望第65-66页
参考文献第66-73页
在学研究成果第73-74页
致谢第74页

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