鸭坦布苏病毒E蛋白单克隆抗体的制备及鉴定
| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 第一章 绪论 | 第9-16页 |
| 1 鸭坦布苏病毒概述 | 第9-12页 |
| ·病原学 | 第9-10页 |
| ·基因组结构和特征 | 第10页 |
| ·流行病学 | 第10-11页 |
| ·临床症状和病理变化 | 第11页 |
| ·鸭坦布苏病毒的检测 | 第11-12页 |
| 2 基因组编码蛋白的生物学功能 | 第12-14页 |
| ·C蛋白 | 第12页 |
| ·prM/M蛋白 | 第12-13页 |
| ·E蛋白 | 第13页 |
| ·NS1蛋白 | 第13页 |
| ·NS2A、NS2B、NS4A和NS4B蛋白 | 第13-14页 |
| ·NS3蛋白 | 第14页 |
| ·NS5蛋白 | 第14页 |
| 3 本研究的的目的与意义 | 第14-16页 |
| 第二章 鸭坦布苏病毒E蛋白的原核表达、纯化及鉴定 | 第16-21页 |
| 1 实验材料 | 第16-17页 |
| ·基因、菌株、质粒和细胞 | 第16页 |
| ·主要试剂 | 第16页 |
| ·主要溶液和培养基的配制 | 第16-17页 |
| ·主要仪器设备 | 第17页 |
| 2 实验方法 | 第17-19页 |
| ·E基因的原核表达 | 第17-18页 |
| ·原核表达重组E蛋白的纯化 | 第18页 |
| ·纯化后蛋白的定量 | 第18-19页 |
| 3 实验结果 | 第19-20页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE电泳分析 | 第19页 |
| ·表达产物的纯化 | 第19-20页 |
| ·蛋白的定量 | 第20页 |
| 4 讨论 | 第20-21页 |
| 第三章 鸭坦布苏病毒E蛋白单克隆抗体的制备与鉴定 | 第21-35页 |
| 1 实验材料 | 第21-23页 |
| ·病毒、细胞株、血清以质粒 | 第21页 |
| ·主要试剂 | 第21页 |
| ·主要溶液的配制 | 第21-22页 |
| ·主要仪器设备 | 第22-23页 |
| 2 实验方法 | 第23-29页 |
| ·动物免疫 | 第23页 |
| ·小鼠的骨髓瘤细胞的培养 | 第23页 |
| ·饲养细胞的制备 | 第23-24页 |
| ·细胞融合 | 第24-25页 |
| ·间接ELISA筛选阳性杂交瘤细胞 | 第25-26页 |
| ·克隆、扩大培养和冻存 | 第26页 |
| ·腹水的制备、纯化及浓度测定 | 第26-27页 |
| ·单克隆抗体的鉴定 | 第27-29页 |
| 3 实验结果 | 第29-32页 |
| ·细胞融合率和阳性率 | 第29-30页 |
| ·腹水的浓度测定 | 第30页 |
| ·Western blot鉴定 | 第30-31页 |
| ·间接免疫荧光分析 | 第31页 |
| ·抗体亚型的鉴定 | 第31-32页 |
| ·杂交瘤细胞稳定性检测 | 第32页 |
| 4 讨论 | 第32-35页 |
| ·动物免疫 | 第32-33页 |
| ·细胞融合 | 第33页 |
| ·阳性杂交瘤细胞株的筛选 | 第33页 |
| ·单克隆抗体的应用价值 | 第33-35页 |
| 第四章 全文结论 | 第35-36页 |
| 参考文献 | 第36-44页 |
| 英文缩略表 | 第44-45页 |
| 致谢 | 第45-46页 |
| 作者简介 | 第46页 |
