| 摘要 | 第1-5页 |
| Summary | 第5-10页 |
| 缩略词中英文对照表 | 第10-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-20页 |
| 1 羊口疮病毒的研究进展 | 第11-15页 |
| ·羊口疮概述 | 第11页 |
| ·病原分类学特征 | 第11页 |
| ·病原形态特征 | 第11-12页 |
| ·病原基因组学 | 第12页 |
| ·病理变化与临床症状 | 第12-13页 |
| ·流行病学 | 第13页 |
| ·羊口疮的防控技术 | 第13-15页 |
| 2 锚定蛋白重复序列研究进展 | 第15-17页 |
| ·锚定蛋白家族概述 | 第15页 |
| ·痘病毒编码锚定蛋白的结构与数量 | 第15-16页 |
| ·痘病毒编码锚定蛋白的作用机制 | 第16-17页 |
| 3 G4L 蛋白的研究进展 | 第17-18页 |
| ·谷氧还蛋白研究进展 | 第17页 |
| ·痘病毒编码的 G4L 蛋白作用机制 | 第17-18页 |
| 4 研究目的及意义 | 第18页 |
| 5 研究内容和方法 | 第18-20页 |
| 第二章 羊口疮甘肃流行毒株的分离与鉴定 | 第20-29页 |
| 1 材料与方法 | 第20-22页 |
| ·材料 | 第20-21页 |
| ·病料 | 第20页 |
| ·细胞系与菌株 | 第20页 |
| ·主要试剂与耗材 | 第20-21页 |
| ·实验仪器设备 | 第21页 |
| ·方法 | 第21-22页 |
| ·病料处理 | 第21页 |
| ·病料检测 | 第21页 |
| ·羊口疮病毒 B2L 与 F1L 基因的扩增、克隆及系统发育分析 | 第21-22页 |
| ·病毒的分离及传代培养 | 第22页 |
| 2 结果与分析 | 第22-27页 |
| ·发病绵羊的临床症状 | 第22-23页 |
| ·临床样品的 PCR 检测 | 第23页 |
| ·病毒的体外分离培养 | 第23-24页 |
| ·羊口疮病毒 B2L 基因与 F1L 基因的扩增、克隆及系统发育分析 | 第24-27页 |
| 3 讨论 | 第27-29页 |
| 第三章 羊口疮病毒锚定蛋白基因的克隆、鉴定及在 BHK-21 中的表达 | 第29-39页 |
| 1 材料与方法 | 第29-32页 |
| ·材料 | 第29-30页 |
| ·菌种、质粒及细胞 | 第29页 |
| ·主要试剂和耗材 | 第29-30页 |
| ·实验仪器和设备 | 第30页 |
| ·方法 | 第30-32页 |
| ·引物的设计 | 第30页 |
| ·目的基因的 PCR 扩增及克隆 | 第30-31页 |
| ·生物信息学分析 | 第31页 |
| ·pEGFP-ORFV-ORF129 真核表达质粒的构建及提取 | 第31页 |
| ·BHK-21 细胞培养及重组质粒的转染 | 第31页 |
| ·pEGFP-ORFV-ORF129 真核表达质粒转染后鉴定 | 第31-32页 |
| 2 结果与分析 | 第32-37页 |
| ·目的基因的扩增、克隆及鉴定 | 第32-37页 |
| ·5种锚定蛋白分子的扩增、克隆及鉴定 | 第32页 |
| ·ORFV ORF129 基因的扩增、克隆及鉴定 | 第32页 |
| ·5种锚定蛋白基因的生物信息学分析 | 第32-35页 |
| ·重组表达质粒 pEGFP-ORFV-ORF129 的构建及鉴定 | 第35-36页 |
| ·重组表达质粒 pEGFP-ORFV-ORF129 在 BHK-21 细胞中的表达及鉴定 | 第36-37页 |
| 3 讨论 | 第37-39页 |
| 第四章 羊口疮病毒 ORF040 基因的克隆及在毕赤酵母中的表达与结构预测分析 | 第39-49页 |
| 1 材料与方法 | 第39-43页 |
| ·材料 | 第39-40页 |
| ·菌株与载体 | 第39-40页 |
| ·主要试剂和耗材 | 第40页 |
| ·主要培养试剂 | 第40页 |
| ·主要仪器设备 | 第40页 |
| ·方法 | 第40-43页 |
| ·表达引物的设计 | 第40-41页 |
| ·目的基因的扩增 | 第41页 |
| ·重组表达载体 pPIC9K-ORF040 的构建 | 第41页 |
| ·重组表达载体 pPIC9K-ORF040 电转化毕赤酵母 GS115 | 第41-42页 |
| ·高拷贝重组酵母菌株的筛选与鉴定 | 第42页 |
| ·重组酵母菌株 GS115-pPIC9K-ORF040 的诱导表达 | 第42页 |
| ·表达产物的 SDS-PAGE 分析 | 第42-43页 |
| ·表达产物的切胶纯化 | 第43页 |
| ·ORF040 基因的序列分析及蛋白质的结构预测 | 第43页 |
| 2 结果与分析 | 第43-47页 |
| ·目的基因的 PCR 扩增 | 第43页 |
| ·重组表达质粒 pPIC9K-ORF040 菌液 PCR 与双酶切鉴定 | 第43页 |
| ·重组酵母菌株 GS115-pPIC9K-ORF040 的鉴定 | 第43-44页 |
| ·目的蛋白的 SDS-PAGE 分析 | 第44页 |
| ·目的蛋白的纯化结果 | 第44-45页 |
| ·ORF040 基因的序列特性及二级结构的预测 | 第45-46页 |
| ·G4L 蛋白的信号肽及修饰位点预测 | 第46-47页 |
| 3 讨论 | 第47-49页 |
| 结论 | 第49-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-56页 |
| 作者简介 | 第56-57页 |
| 导师简介 | 第57-59页 |
