| 摘要 | 第1-14页 |
| Abstract | 第14-19页 |
| 前言 | 第19-22页 |
| 第一部分 微流控芯片细胞共培养检测平台的构建 | 第22-34页 |
| 引言 | 第22页 |
| 材料和方法 | 第22-26页 |
| 1. 材料 | 第22-23页 |
| ·主要试剂 | 第22-23页 |
| ·主要仪器和设备 | 第23页 |
| 2. 方法 | 第23-26页 |
| ·芯片体系设计过程 | 第23-24页 |
| ·芯片制作及处理 | 第24页 |
| ·芯片细胞培养条件的筛选 | 第24-25页 |
| ·不同细胞培养条件的微流控体系构建 | 第25页 |
| ·微流控芯片平台的验证 | 第25-26页 |
| 结果 | 第26-31页 |
| 1. 芯片细胞培养条件的筛选 | 第26-28页 |
| ·二维细胞培养池规格的筛选 | 第26-27页 |
| ·三维培养液灌流模式的筛选 | 第27-28页 |
| 2. 细胞非直接接触共培养体系的构建 | 第28-29页 |
| ·通道内微柱结构的设计 | 第28页 |
| ·三维细胞-基质胶混合物在培养室的注入 | 第28-29页 |
| ·外界环境液体流速对三维结构的影响 | 第29页 |
| 3. 微流控芯片体系验证 | 第29-31页 |
| ·平行对照实验及培养基供应 | 第29-30页 |
| ·FITC-Dextran 在凝胶中的扩散 | 第30-31页 |
| 讨论 | 第31-33页 |
| 总结 | 第33-34页 |
| 第二部分 微流控芯片细胞共培养平台的细胞培养及药物干预研究 | 第34-42页 |
| 引言 | 第34-35页 |
| 材料和方法 | 第35-38页 |
| 1. 材料 | 第35-36页 |
| ·细胞株 | 第35页 |
| ·主要试剂及配制 | 第35-36页 |
| ·主要仪器和设备 | 第36页 |
| 2. 方法 | 第36-38页 |
| ·细胞培养、传代、冻存和复苏 | 第36页 |
| ·微流控芯片实验平台中的细胞培养 | 第36-37页 |
| ·不同培养体系下细胞分组及药物干预 | 第37-38页 |
| 结果 | 第38-40页 |
| 1. 常规检测平台的细胞培养 | 第38页 |
| 2. 微流控芯片平台中的细胞培养 | 第38-39页 |
| ·二维培养体系 | 第38-39页 |
| ·三维培养体系 | 第39页 |
| 3. 不同条件培养体系中细胞药物干预研究 | 第39-40页 |
| 讨论 | 第40-41页 |
| 总结 | 第41-42页 |
| 第三部分 微流控芯片细胞共培养平台的细胞耐药性检测及分析 | 第42-59页 |
| 引言 | 第42页 |
| 材料和方法 | 第42-49页 |
| 1. 材料 | 第42-43页 |
| ·主要试剂 | 第42-43页 |
| ·主要仪器 | 第43页 |
| 2. 方法 | 第43-49页 |
| ·实验技术路线 | 第43-45页 |
| ·蛋白检测 | 第45-48页 |
| ·细胞在化疗药物 VP-16 作用下生存检测 | 第48-49页 |
| ·统计学处理 | 第49页 |
| 结果 | 第49-55页 |
| 1. 微流控芯片中二维培养体系的检测 | 第49-53页 |
| ·葡萄糖调节蛋白 GRP78 的表达检测 | 第49-52页 |
| ·NCI-H460 细胞在 VP-16 作用下的生存检测 | 第52-53页 |
| 2. 微流控芯片中三维培养体系的检测 | 第53-55页 |
| ·α-SMA 与 GRP78 蛋白表达检测 | 第53-54页 |
| ·HFL1 细胞在 VP-16 作用下细胞生存检测 | 第54-55页 |
| 讨论 | 第55-58页 |
| 总结 | 第58-59页 |
| 第四部分 基于微流控芯片检测平台的细胞因子筛选及验证 | 第59-65页 |
| 引言 | 第59页 |
| 材料和方法 | 第59-61页 |
| 1. 材料 | 第59-60页 |
| ·主要试剂 | 第59页 |
| ·主要仪器 | 第59-60页 |
| 2. 方法 | 第60-61页 |
| ·实验技术路线 | 第60页 |
| ·肺癌细胞上清液 TGF-β1 检测 | 第60-61页 |
| ·免疫荧光检测方法见第三部分 | 第61页 |
| 结果 | 第61-63页 |
| 1. 肺癌细胞上清液中 TGF-β1 检测结果 | 第61页 |
| 2. TGF-β1 对肺成纤维细胞蛋白表达的影响 | 第61-63页 |
| ·TGF-β1 对肺成纤维细胞α-SMA 蛋白表达的影响 | 第61-62页 |
| ·TGF-β1 对肺成纤维细胞 GRP78 蛋白表达的影响 | 第62-63页 |
| 讨论 | 第63-64页 |
| 总结 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-72页 |
| 综述 | 第72-84页 |
| 参考文献 | 第79-84页 |
| 攻读学位期间发表文章情况 | 第84-85页 |
| 致谢 | 第85-86页 |
