| 摘要 | 第1-14页 |
| Abstract | 第14-20页 |
| 第一部分 Caveolin-1 对小鼠肝癌细胞 ST6Gal-I 表达的调控 | 第20-58页 |
| （一） 前言 | 第20-21页 |
| （二） 材料和方法 | 第21-35页 |
| 1. 材料 | 第21-23页 |
| ·实验对象 | 第21页 |
| ·质粒、菌株来源 | 第21-22页 |
| ·主要试剂 | 第22页 |
| ·主要仪器 | 第22-23页 |
| 2. 方法 | 第23-35页 |
| ·细胞培养 | 第23页 |
| ·Cav-1 重组表达载体的构建 | 第23页 |
| ·稳定表达 Cav-1 的 Hepa1-6 细胞的获得 | 第23页 |
| ·Cav-1 短发夹 RNA（shRNA） 干扰载体的构建 | 第23-26页 |
| ·ST6Gal-I 重组表达载体的构建 | 第26-29页 |
| ·重组荧光素酶报告基因载体pGL3-basic/ST6Gal-I 的构建 | 第29-30页 |
| ·细胞转染 | 第30-33页 |
| ·荧光素酶活性检测 | 第33页 |
| ·Real-time PCR 分析 | 第33-34页 |
| ·免疫印迹（Western blot） 分析 | 第34-35页 |
| ·凝集素印迹（Lectin blot） 分析 | 第35页 |
| ·统计学分析 | 第35页 |
| （三） 结果 | 第35-50页 |
| 1. 分析 Cav-1 及三种唾液酰基转移酶在小鼠肝癌细胞 Hca-F 和Hepa1-6 中的表达 | 第35-37页 |
| 2. 过表达 Cav-1 上调 Hepa1-6 细胞的 ST6Gal-I 表达 | 第37-39页 |
| 3. Cav-1 沉默抑制了 Hca-F 细胞的 ST6Gal-I 表达，其能够被野生型 Cav-1 及 ST6Gal-I 的重新引入所恢复 | 第39-43页 |
| 4. Cav-1 通过其绞手架结构域（CSD） 上调 ST6Gal-I表达 | 第43-45页 |
| 5. Cav-1 通过诱导 ST6Gal-I 启动子活性促进 H22细胞的ST6Gal-I表达 | 第45-50页 |
| （四） 讨论 | 第50-53页 |
| （五） 小结 | 第53-54页 |
| （六） 参考文献 | 第54-58页 |
| 第二部分 Caveolin-1、ST6Gal-I 对小鼠肝癌细胞与细胞外基质及淋巴结黏附的影响 | 第58-76页 |
| （一） 前言 | 第58-59页 |
| （二） 材料和方法 | 第59-62页 |
| 1. 材料 | 第59-60页 |
| ·实验对象 | 第59页 |
| ·主要试剂 | 第59-60页 |
| ·主要仪器 | 第60页 |
| 2. 方法 | 第60-62页 |
| ·细胞培养 | 第60-61页 |
| ·RNA 干扰（RNAi） 检测（ST6Gal-I-siRNAs 转染 Hca-F细胞） | 第61页 |
| ·体外细胞黏附检测 | 第61页 |
| ·免疫印迹分析蛋白磷酸化水平 | 第61页 |
| ·体外淋巴结黏附检测 | 第61页 |
| ·体内淋巴结黏附检测 | 第61页 |
| ·Lectin 组织化学 | 第61-62页 |
| ·统计学分析 | 第62页 |
| （三） 结果 | 第62-69页 |
| 1. 检测小鼠肝癌 Hca-F 和 Hepa1-6 细胞与细胞外基质主要成分 FN、COL、LN 的黏附能力 | 第62-63页 |
| 2. Cav-1 过表达上调 Hepa1-6 细胞与 FN 的黏附及 FAK 信号，其能够被 ST6Gal-I 的下调所抑制 | 第63-65页 |
| 3. 下调Cav-1 表达抑制Hca-F 细胞与FN 的黏附及FAK 信号，其能够被野生型Cav-1或ST6Gal-I的重新引入所恢复 | 第65-66页 |
| 4. 下调 ST6Gal-I 表达抑制 Hca-F 细胞与淋巴结的黏附 | 第66-69页 |
| （四） 讨论 | 第69-71页 |
| （五） 小结 | 第71-72页 |
| （六） 参考文献 | 第72-76页 |
| 第三部分 ST6Gal-I 介导小鼠肝癌细胞与 FN 及淋巴结黏附的分子机制 | 第76-97页 |
| （一） 前言 | 第76-77页 |
| （二） 材料和方法 | 第77-81页 |
| 1. 材料 | 第77-79页 |
| ·实验对象 | 第77页 |
| ·主要试剂 | 第77-78页 |
| ·主要仪器 | 第78-79页 |
| 2. 方法 | 第79-81页 |
| ·细胞培养 | 第79页 |
| ·总膜蛋白提取 | 第79页 |
| ·Lectin blot 分析 | 第79页 |
| ·免疫印记（Western blot） 分析 | 第79页 |
| ·流式细胞分析 | 第79-80页 |
| ·体外细胞黏附分析 | 第80页 |
| ·Immunopreciptation assay（免疫沉淀分析） | 第80页 |
| ·体外淋巴结黏附分析 | 第80页 |
| ·统计学分析 | 第80-81页 |
| （三） 结果 | 第81-89页 |
| 1. Cav-1 上调 H22 细胞表面α2,6 连接唾液酸水平，细胞表面α2,6 唾液酸化促进了 H22 细胞与 FN 的黏附及FAK 信号的活化 | 第81-84页 |
| 2. Integrin α5β1 中α5-亚基的α2,6 唾液酸化介导了 H22 细胞与FN 的黏附 | 第84-87页 |
| 3. ɑ2 ,6连接唾液酸与 CD22 的识别介导 Hca-F 细胞与淋巴结的黏附 | 第87-89页 |
| （四） 讨论 | 第89-91页 |
| （五） 小结 | 第91-92页 |
| （六） 参考文献 | 第92-97页 |
| 综述 | 第97-114页 |
| 参考文献 | 第106-114页 |
| 附录 | 第114-116页 |
| 攻读学位期间发表文章情况 | 第116-117页 |
| 致谢 | 第117-118页 |
