| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 縮略词表 | 第11-13页 |
| 前言 | 第13-23页 |
| 1 禽呼肠孤病毒(ARV)病概述 | 第13-16页 |
| ·呼肠孤病毒病 | 第13-14页 |
| ·流行病学 | 第14-15页 |
| ·传染源 | 第14页 |
| ·传播途径 | 第14-15页 |
| ·易感动物 | 第15页 |
| ·鸡呼肠孤病毒感染 | 第15页 |
| ·鸭呼肠孤病毒感染 | 第15-16页 |
| 2 禽呼肠孤病毒 | 第16-20页 |
| ·呼肠孤病毒的形态特点 | 第16页 |
| ·病毒对细胞的致病性 | 第16-18页 |
| ·病毒的基因组结构 | 第18-20页 |
| 3 呼肠孤病毒与细胞凋亡 | 第20-23页 |
| 本研究的目的与意义 | 第23-24页 |
| 材料与方法 | 第24-35页 |
| 1 材料 | 第24-27页 |
| ·病毒 | 第24页 |
| ·细胞 | 第24页 |
| ·参考序列 | 第24页 |
| ·主要实验耗材 | 第24-25页 |
| ·主要仪器设备 | 第25页 |
| ·主要溶液及其配制 | 第25-27页 |
| ·细胞生长(营养)液 | 第25页 |
| ·细胞维持液 | 第25-26页 |
| ·PBS(0.1M,pH=7.2,无钙镁)配制 | 第26页 |
| ·4%中性多聚甲醛 | 第26页 |
| ·50×TAE电泳缓冲液 | 第26页 |
| ·琼脂糖凝胶 | 第26页 |
| ·TBS(0.01M,pH=7.5)配法 | 第26页 |
| ·2.5%戊二醛固定液配制 | 第26-27页 |
| ·LB配方 | 第27页 |
| 2 方法 | 第27-34页 |
| ·BHK-21细胞的传代培养 | 第27页 |
| ·鸭源呼肠孤病毒的接种和增殖 | 第27-28页 |
| ·鸭源呼肠孤病毒致BHK-21细胞的病变 | 第28页 |
| ·TUNEL法染色检测细胞凋亡 | 第28-29页 |
| ·鸭源呼肠孤病毒致BHK-21细胞的超微病变及观察 | 第29页 |
| ·实时荧光定量RT-PCR检测DRV感染后BHK-21细胞和其培养液混合物中的病毒含量 | 第29-31页 |
| ·流式细胞仪对4株DRV攻毒后BHK-21细胞凋亡的检测 | 第31页 |
| ·鸭源呼肠孤病毒S组基因的扩增 | 第31-32页 |
| ·产物的回收和纯化 | 第32-33页 |
| ·产物连接和转化 | 第33-34页 |
| ·菌液PCR鉴定 | 第34页 |
| ·序列分析 | 第34页 |
| 3 数据统计与处理 | 第34-35页 |
| 结果与分析 | 第35-50页 |
| 1 病毒致BHK-21细胞的病理变化观察 | 第35-41页 |
| ·倒置显微镜下观察细胞的形态 | 第35-38页 |
| ·光镜下观察细胞病变 | 第38-39页 |
| ·鸭源呼肠孤病毒致BHK-21细胞的超微病变 | 第39-41页 |
| 2 实时荧光定量RT-PCR检测DRV感染后BHK-21细胞和其培养液混合物中的病毒含量 | 第41-42页 |
| 3 BHK-21细胞感染DRV后,应用流式细胞仪进行细胞凋亡检测结果 | 第42-44页 |
| 4 BHK-21细胞感染DRV后,应用TUNEL进行细胞凋亡检测的结果 | 第44-45页 |
| 5 DRV S基因组的扩增结果及序列分析 | 第45-50页 |
| ·DRV S基因组的扩增 | 第45-46页 |
| ·S2基因的扩增 | 第45页 |
| ·S3基因的扩增 | 第45-46页 |
| ·S4基因的扩增 | 第46页 |
| ·DRV S组基因序列分析 | 第46-50页 |
| ·DRV S2基因核苷酸序列遗传进化分析结果 | 第46-47页 |
| ·DRV S3基因核苷酸序列遗传进化分析结果 | 第47-48页 |
| ·DRV S4基因核苷酸序列遗传进化分析结果 | 第48-50页 |
| 讨论 | 第50-55页 |
| 1 DRV致BHK-21细胞病变特点 | 第50-51页 |
| 2 各株DRV细胞凋亡与病毒增殖特点 | 第51-52页 |
| 3 DRV S组基因分析 | 第52-55页 |
| 结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
