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鸭源呼肠孤病毒致BHK-21细胞凋亡的研究

摘要第1-9页
Abstract第9-11页
縮略词表第11-13页
前言第13-23页
 1 禽呼肠孤病毒(ARV)病概述第13-16页
   ·呼肠孤病毒病第13-14页
   ·流行病学第14-15页
     ·传染源第14页
     ·传播途径第14-15页
     ·易感动物第15页
   ·鸡呼肠孤病毒感染第15页
   ·鸭呼肠孤病毒感染第15-16页
 2 禽呼肠孤病毒第16-20页
   ·呼肠孤病毒的形态特点第16页
   ·病毒对细胞的致病性第16-18页
   ·病毒的基因组结构第18-20页
 3 呼肠孤病毒与细胞凋亡第20-23页
本研究的目的与意义第23-24页
材料与方法第24-35页
 1 材料第24-27页
   ·病毒第24页
   ·细胞第24页
   ·参考序列第24页
   ·主要实验耗材第24-25页
   ·主要仪器设备第25页
   ·主要溶液及其配制第25-27页
     ·细胞生长(营养)液第25页
     ·细胞维持液第25-26页
     ·PBS(0.1M,pH=7.2,无钙镁)配制第26页
     ·4%中性多聚甲醛第26页
     ·50×TAE电泳缓冲液第26页
     ·琼脂糖凝胶第26页
     ·TBS(0.01M,pH=7.5)配法第26页
     ·2.5%戊二醛固定液配制第26-27页
     ·LB配方第27页
 2 方法第27-34页
   ·BHK-21细胞的传代培养第27页
   ·鸭源呼肠孤病毒的接种和增殖第27-28页
   ·鸭源呼肠孤病毒致BHK-21细胞的病变第28页
   ·TUNEL法染色检测细胞凋亡第28-29页
   ·鸭源呼肠孤病毒致BHK-21细胞的超微病变及观察第29页
   ·实时荧光定量RT-PCR检测DRV感染后BHK-21细胞和其培养液混合物中的病毒含量第29-31页
   ·流式细胞仪对4株DRV攻毒后BHK-21细胞凋亡的检测第31页
   ·鸭源呼肠孤病毒S组基因的扩增第31-32页
   ·产物的回收和纯化第32-33页
   ·产物连接和转化第33-34页
   ·菌液PCR鉴定第34页
   ·序列分析第34页
 3 数据统计与处理第34-35页
结果与分析第35-50页
 1 病毒致BHK-21细胞的病理变化观察第35-41页
   ·倒置显微镜下观察细胞的形态第35-38页
   ·光镜下观察细胞病变第38-39页
   ·鸭源呼肠孤病毒致BHK-21细胞的超微病变第39-41页
 2 实时荧光定量RT-PCR检测DRV感染后BHK-21细胞和其培养液混合物中的病毒含量第41-42页
 3 BHK-21细胞感染DRV后,应用流式细胞仪进行细胞凋亡检测结果第42-44页
 4 BHK-21细胞感染DRV后,应用TUNEL进行细胞凋亡检测的结果第44-45页
 5 DRV S基因组的扩增结果及序列分析第45-50页
   ·DRV S基因组的扩增第45-46页
     ·S2基因的扩增第45页
     ·S3基因的扩增第45-46页
     ·S4基因的扩增第46页
   ·DRV S组基因序列分析第46-50页
     ·DRV S2基因核苷酸序列遗传进化分析结果第46-47页
     ·DRV S3基因核苷酸序列遗传进化分析结果第47-48页
     ·DRV S4基因核苷酸序列遗传进化分析结果第48-50页
讨论第50-55页
 1 DRV致BHK-21细胞病变特点第50-51页
 2 各株DRV细胞凋亡与病毒增殖特点第51-52页
 3 DRV S组基因分析第52-55页
结论第55-56页
参考文献第56-66页
致谢第66页

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