摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
縮略词表 | 第11-13页 |
前言 | 第13-23页 |
1 禽呼肠孤病毒(ARV)病概述 | 第13-16页 |
·呼肠孤病毒病 | 第13-14页 |
·流行病学 | 第14-15页 |
·传染源 | 第14页 |
·传播途径 | 第14-15页 |
·易感动物 | 第15页 |
·鸡呼肠孤病毒感染 | 第15页 |
·鸭呼肠孤病毒感染 | 第15-16页 |
2 禽呼肠孤病毒 | 第16-20页 |
·呼肠孤病毒的形态特点 | 第16页 |
·病毒对细胞的致病性 | 第16-18页 |
·病毒的基因组结构 | 第18-20页 |
3 呼肠孤病毒与细胞凋亡 | 第20-23页 |
本研究的目的与意义 | 第23-24页 |
材料与方法 | 第24-35页 |
1 材料 | 第24-27页 |
·病毒 | 第24页 |
·细胞 | 第24页 |
·参考序列 | 第24页 |
·主要实验耗材 | 第24-25页 |
·主要仪器设备 | 第25页 |
·主要溶液及其配制 | 第25-27页 |
·细胞生长(营养)液 | 第25页 |
·细胞维持液 | 第25-26页 |
·PBS(0.1M,pH=7.2,无钙镁)配制 | 第26页 |
·4%中性多聚甲醛 | 第26页 |
·50×TAE电泳缓冲液 | 第26页 |
·琼脂糖凝胶 | 第26页 |
·TBS(0.01M,pH=7.5)配法 | 第26页 |
·2.5%戊二醛固定液配制 | 第26-27页 |
·LB配方 | 第27页 |
2 方法 | 第27-34页 |
·BHK-21细胞的传代培养 | 第27页 |
·鸭源呼肠孤病毒的接种和增殖 | 第27-28页 |
·鸭源呼肠孤病毒致BHK-21细胞的病变 | 第28页 |
·TUNEL法染色检测细胞凋亡 | 第28-29页 |
·鸭源呼肠孤病毒致BHK-21细胞的超微病变及观察 | 第29页 |
·实时荧光定量RT-PCR检测DRV感染后BHK-21细胞和其培养液混合物中的病毒含量 | 第29-31页 |
·流式细胞仪对4株DRV攻毒后BHK-21细胞凋亡的检测 | 第31页 |
·鸭源呼肠孤病毒S组基因的扩增 | 第31-32页 |
·产物的回收和纯化 | 第32-33页 |
·产物连接和转化 | 第33-34页 |
·菌液PCR鉴定 | 第34页 |
·序列分析 | 第34页 |
3 数据统计与处理 | 第34-35页 |
结果与分析 | 第35-50页 |
1 病毒致BHK-21细胞的病理变化观察 | 第35-41页 |
·倒置显微镜下观察细胞的形态 | 第35-38页 |
·光镜下观察细胞病变 | 第38-39页 |
·鸭源呼肠孤病毒致BHK-21细胞的超微病变 | 第39-41页 |
2 实时荧光定量RT-PCR检测DRV感染后BHK-21细胞和其培养液混合物中的病毒含量 | 第41-42页 |
3 BHK-21细胞感染DRV后,应用流式细胞仪进行细胞凋亡检测结果 | 第42-44页 |
4 BHK-21细胞感染DRV后,应用TUNEL进行细胞凋亡检测的结果 | 第44-45页 |
5 DRV S基因组的扩增结果及序列分析 | 第45-50页 |
·DRV S基因组的扩增 | 第45-46页 |
·S2基因的扩增 | 第45页 |
·S3基因的扩增 | 第45-46页 |
·S4基因的扩增 | 第46页 |
·DRV S组基因序列分析 | 第46-50页 |
·DRV S2基因核苷酸序列遗传进化分析结果 | 第46-47页 |
·DRV S3基因核苷酸序列遗传进化分析结果 | 第47-48页 |
·DRV S4基因核苷酸序列遗传进化分析结果 | 第48-50页 |
讨论 | 第50-55页 |
1 DRV致BHK-21细胞病变特点 | 第50-51页 |
2 各株DRV细胞凋亡与病毒增殖特点 | 第51-52页 |
3 DRV S组基因分析 | 第52-55页 |
结论 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-66页 |
致谢 | 第66页 |