| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 缩略词表(Abbreviation words) | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第11-21页 |
| ·梅花鹿的概述 | 第11-12页 |
| ·概述 | 第11-12页 |
| ·鹿茸的化学成分 | 第12页 |
| ·IGF-Ⅰ的研究概况 | 第12-15页 |
| ·IGF-Ⅰ的结构 | 第12-13页 |
| ·IGF-Ⅰ的作用机理及与鹿茸生长的研究 | 第13-15页 |
| ·IGF-Ⅱ研究概况 | 第15-17页 |
| ·IGF-Ⅱ的结构 | 第15页 |
| ·IGFs受体和结合蛋白 | 第15-16页 |
| ·IGF-Ⅱ的生理功能与鹿茸生长的研究 | 第16-17页 |
| ·RNA干扰技术研究概况 | 第17-18页 |
| ·RNAi的基本概念 | 第17页 |
| ·分子机制 | 第17-18页 |
| ·siRNA导入哺乳动物体内的方法 | 第18页 |
| ·RNAi技术及其应用 | 第18-20页 |
| ·基因功能的研究 | 第18-19页 |
| ·转基因动物的研究 | 第19页 |
| ·抗病毒作用 | 第19页 |
| ·抗肿瘤作用 | 第19-20页 |
| ·药物开发 | 第20页 |
| ·研究信号传导的新途径 | 第20页 |
| ·RNAi技术的应用前景 | 第20页 |
| ·研究目的与意义 | 第20-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-36页 |
| ·实验材料 | 第21-24页 |
| ·样本采集 | 第21页 |
| ·主要仪器设备 | 第21-22页 |
| ·干扰载体 | 第22页 |
| ·主要试剂 | 第22页 |
| ·主要溶液及相关缓冲液的配制 | 第22-24页 |
| ·实验方法 | 第24-35页 |
| ·鹿茸软骨细胞及其间充质细胞的分离和培养 | 第24-25页 |
| ·IGF-Ⅰ和IGF-Ⅱ基因RNAi重组干扰质粒构建 | 第25-28页 |
| ·重组质粒克隆及提取 | 第28页 |
| ·重组质粒转染鹿茸软骨细胞和间充质细胞 | 第28-29页 |
| ·实时荧光定量PCR(QPCR) | 第29-31页 |
| ·转染后软骨及间充质细胞相关蛋白的Western blot分析 | 第31-34页 |
| ·转染后软骨及间充质细胞增殖检测 | 第34页 |
| ·转染后软骨及间充质细胞凋亡检测 | 第34-35页 |
| ·转染后软骨及间充质细胞周期检测 | 第35页 |
| ·统计分析 | 第35-36页 |
| 3 结果与分析 | 第36-46页 |
| ·重组质粒的构建及其鉴定 | 第36页 |
| ·重组质粒转染软骨及间充质细胞的转染效果检测 | 第36-37页 |
| ·细胞总RNA的检测 | 第37页 |
| ·重组质粒的效果鉴定 | 第37-40页 |
| ·IGF-Ⅰ和IGF-Ⅱ沉默抑制软骨及间充质细胞增殖 | 第40-41页 |
| ·IGF-Ⅰ和IGF-Ⅱ沉默诱导软骨及间充质细胞凋亡 | 第41-43页 |
| ·IGF-Ⅰ和IGF-Ⅱ沉默影响软骨及间充质细胞周期 | 第43-46页 |
| 4 讨论 | 第46-48页 |
| ·IGF-Ⅰ和IGF-Ⅱ对软骨细胞及间充质细胞生长发育的影响 | 第46页 |
| ·IGF-Ⅰ和IGF-Ⅱ对软骨细胞及间充质细胞生长周期的影响 | 第46-47页 |
| ·IGF-Ⅰ和IGF-Ⅱ引起软骨细胞及间充质细胞凋亡的作用机制 | 第47-48页 |
| 5 小结 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-61页 |
| 致谢 | 第61页 |
