| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 縮略语表 | 第11-12页 |
| 1 前言 | 第12-23页 |
| ·脂肪组织 | 第12-13页 |
| ·脂肪细胞的分化 | 第13-22页 |
| ·定向：MSC到前脂肪细胞系 | 第13-14页 |
| ·前脂肪细胞的诱导与分化 | 第14-15页 |
| ·生长抑制和有丝分裂克隆性扩增 | 第15-17页 |
| ·终末分化 | 第17页 |
| ·脂肪细胞分化的转录调控 | 第17-21页 |
| ·过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARγ) | 第17-18页 |
| ·CCAAT增强子结合蛋白(C/EBP) | 第18-20页 |
| ·细胞周期蛋白(cell-cycle proteins) | 第20-21页 |
| ·fad24的研究进展 | 第21-22页 |
| ·研究目的与意义 | 第22-23页 |
| 2 实验材料与方法 | 第23-39页 |
| ·实验材料 | 第23页 |
| ·实验细胞 | 第23页 |
| ·实验菌株 | 第23页 |
| ·实验质粒 | 第23页 |
| ·实验试剂 | 第23-26页 |
| ·主要实验试剂 | 第23-24页 |
| ·主要溶液的配置 | 第24-25页 |
| ·细菌培养基的配置 | 第24页 |
| ·质粒抽提试剂 | 第24页 |
| ·琼脂糖电泳试剂配置 | 第24页 |
| ·细胞培养相关培养基的配置 | 第24-25页 |
| ·主要实验仪器 | 第25页 |
| ·分子生物学相关软件 | 第25-26页 |
| ·实验方法 | 第26-36页 |
| ·细胞基因组DNA的制备 | 第26-27页 |
| ·细胞培养无菌环境的准备 | 第26页 |
| ·细胞复苏 | 第26页 |
| ·细胞培养与传代 | 第26-27页 |
| ·细胞基因组DNA的提取 | 第27页 |
| ·小鼠fad24基因启动子序列的扩增及双荧光报告真核表达载体的构建 | 第27-29页 |
| ·DNA电泳检测PCR产物检测及回收纯化 | 第29页 |
| ·DNA片段的克隆与测序 | 第29-31页 |
| ·质粒的大量提取 | 第31-33页 |
| ·细胞的瞬时转染 | 第33页 |
| ·细胞总RNA提取、纯化和反转录 | 第33-35页 |
| ·实时定量PCR | 第35-36页 |
| ·双荧光素酶报告系统检测 | 第36-37页 |
| ·试剂准备 | 第36-37页 |
| ·细胞裂解 | 第37页 |
| ·被动裂解 | 第37页 |
| ·检测样品 | 第37页 |
| ·染色质免疫共沉淀 | 第37-38页 |
| ·RNA干扰 | 第38页 |
| ·数据统计分析 | 第38-39页 |
| 3 实验结果与分析 | 第39-53页 |
| ·C/EBPβ和C/EBPδ调控小鼠fad24转录 | 第39-41页 |
| ·小鼠fad24基因启动子的克隆及转录因子结合位点分析 | 第41-43页 |
| ·小鼠fad24全长启动子及截短启动子活性鉴定 | 第43页 |
| ·C/EBPβ和C/EBPδ对小鼠fad24启动子活性的调节作用 | 第43-46页 |
| ·fad24启动子上受C/EBPβ和C/EBP6调节的关键位点 | 第46-48页 |
| ·C/EBPβ和C/EBPδ与fad24启动子特异性结合 | 第48-49页 |
| ·C/EBPβ和C/EBPδ对fad24的协同调控作用 | 第49页 |
| ·C/EBPδ和fad24对MCE过程的调控 | 第49-51页 |
| ·fad24可挽救因敲减C/EBP6抑制MCE的过程 | 第51-53页 |
| 4 讨论 | 第53-55页 |
| 5 结论与创新点 | 第55-56页 |
| ·结论 | 第55页 |
| ·创新点 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
