摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
目录 | 第8-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-21页 |
·过敏反应及过敏原 | 第11-15页 |
·过敏反应的机制 | 第11页 |
·过敏反应的分类 | 第11-12页 |
·过敏原及其分类 | 第12-14页 |
·荞麦过敏原研究进展 | 第14-15页 |
·过敏原的检测及治疗 | 第15-17页 |
·酶联免疫吸附试验(ELISA) | 第15页 |
·酶标记/放射过敏原吸附试验(EAST/RAST) | 第15-16页 |
·点杂交免疫印迹法 | 第16页 |
·火箭免疫电泳法(RIE) | 第16页 |
·过敏症的治疗 | 第16-17页 |
·抗原表位的研究进展 | 第17-19页 |
·抗原表位的分类 | 第17页 |
·B 细胞表位预测 | 第17-18页 |
·T 细胞表位预测 | 第18页 |
·抗原表位的应用 | 第18-19页 |
·包涵体研究进展 | 第19-20页 |
·包涵体的形成 | 第19页 |
·包涵体的分离提取 | 第19页 |
·包涵体复性 | 第19-20页 |
·本研究的目的和意义 | 第20-21页 |
第二章 苦荞 16kD 过敏原核心表位的生物信息学分析 | 第21-27页 |
·实验材料 | 第21页 |
·试验方法 | 第21页 |
·苦荞 16kD 过敏原 B 细胞表位预测 | 第21页 |
·苦荞 16kD 过敏原 T 细胞表位预测 | 第21页 |
·实验结果 | 第21-25页 |
·苦荞 16kD 过敏原 B 细胞表位预测结果 | 第21-24页 |
·苦荞 16kD 过敏原 T 细胞表位预测结果 | 第24-25页 |
·讨论 | 第25-27页 |
第三章 TBW16 中 B 细胞表位的定点突变 | 第27-34页 |
·实验材料 | 第27页 |
·表达载体及菌株 | 第27页 |
·工具酶及试剂 | 第27页 |
·实验仪器 | 第27页 |
·实验方法 | 第27-31页 |
·突变引物设计 | 第27-28页 |
·定点突变 PCR 及条件优化 | 第28-29页 |
·突变产物转化 Top10 感受态细胞 | 第29页 |
·突变质粒的提取 | 第29-30页 |
·突变质粒的浓缩及测序 | 第30-31页 |
·实验结果 | 第31-32页 |
·TBW16 定点突变 PCR 扩增结果 | 第31页 |
·TBW16 定点突变的测序结果 | 第31-32页 |
·讨论 | 第32-34页 |
第四章 TBW16 突变蛋白的原核表达 | 第34-43页 |
·实验材料 | 第34-35页 |
·质粒和菌株 | 第34页 |
·实验试剂 | 第34页 |
·主要仪器 | 第34-35页 |
·实验步骤 | 第35-37页 |
·突变质粒的诱导表达 | 第35页 |
·突变蛋白表达的 SDS-PAGE 检测 | 第35-36页 |
·突变蛋白的可溶性检测 | 第36页 |
·包涵体复性 | 第36页 |
·突变蛋白的纯化 | 第36页 |
·突变蛋白的 HIS 标签鉴定 | 第36-37页 |
·突变蛋白的浓缩及浓度测定 | 第37页 |
·实验结果 | 第37-42页 |
·突变蛋白诱导表达结果 | 第37-38页 |
·突变蛋白的可溶性分析结果 | 第38-39页 |
·蛋白纯化及 HIS 标签鉴定结果 | 第39-40页 |
·突变蛋白的浓度测定 | 第40-41页 |
·突变蛋白圆二色谱分析结果 | 第41-42页 |
·讨论 | 第42-43页 |
第五章 TBW16 的核心表位鉴定 | 第43-49页 |
·实验材料 | 第43-44页 |
·实验材料 | 第43页 |
·实验试剂 | 第43页 |
·实验仪器 | 第43-44页 |
·试验方法 | 第44-46页 |
·突变蛋白的竞争性 ELISA | 第44-45页 |
·点杂交 | 第45-46页 |
·实验结果 | 第46-47页 |
·ELISA 结果 | 第46页 |
·点杂交结果 | 第46-47页 |
·讨论 | 第47-49页 |
第六章 结论与展望 | 第49-50页 |
·结论 | 第49页 |
·展望 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-55页 |
附录 | 第55-60页 |
致谢 | 第60-61页 |
作者简介 | 第61页 |