| 摘要 | 第1-13页 |
| ABSTRACT | 第13-17页 |
| 第一章 文献综述 | 第17-43页 |
| ·γ-PGA简介 | 第17-18页 |
| ·γ-PGA的发现 | 第17页 |
| ·γ-PGA的结构 | 第17-18页 |
| ·γ-PGA的分子量 | 第18页 |
| ·γ-PGA的理化性质 | 第18-19页 |
| ·γ-PGA产生菌 | 第19-20页 |
| ·γ-PGA的提取纯化 | 第20-21页 |
| ·从液体发酵液中提取纯化y-PGA | 第20-21页 |
| ·从固体发酵基质中提取纯化γ-PGA | 第21页 |
| ·γ-PGA的分析 | 第21-23页 |
| ·γ-PGA的定性分析 | 第21-22页 |
| ·γ-PGA的定量分析 | 第22-23页 |
| ·γ-PGA合成方法 | 第23-25页 |
| ·化学合成法 | 第23页 |
| ·酶转化法 | 第23-24页 |
| ·微生物发酵法 | 第24-25页 |
| ·发酵条件对γ-PGA生产的影响 | 第25-28页 |
| ·碳源对γ-PGA发酵生产的影响 | 第25-26页 |
| ·氮源对γ-PGA发酵生产的影响 | 第26-27页 |
| ·金属离子对γ-PGA发酵生产的影响 | 第27页 |
| ·发酵工艺对γ-PGA发酵生产的影响 | 第27-28页 |
| ·γ-PGA的合成机制 | 第28-31页 |
| ·γ-PGA的前体物质的合成机制 | 第28-30页 |
| ·γ-PGA的合成机制 | 第30-31页 |
| ·γ-PGA合成酶基因 | 第31-32页 |
| ·γ-PGA合成酶系统 | 第32-34页 |
| ·γ-PGA的降解 | 第34-36页 |
| ·γ-PGA的物理降解 | 第34-35页 |
| ·γ-PGA化学降解 | 第35页 |
| ·γ-PGA酶降解 | 第35-36页 |
| ·γ-PGA的应用 | 第36-40页 |
| ·γ-PGA在食品工业中的应用 | 第36-37页 |
| ·γ-PGA在化妆品业中的应用 | 第37页 |
| ·γ-PGA在医疗医药业中的应用 | 第37-38页 |
| ·γ-PGA在环境中的应用 | 第38-39页 |
| ·γ-PGA在农业中的应用 | 第39-40页 |
| ·本课题的研究意义、内容及目标 | 第40-43页 |
| 第二章 产γ-多聚谷氨酸菌株的分离与鉴定 | 第43-55页 |
| ·引言 | 第43页 |
| ·材料与方法 | 第43-47页 |
| ·材料 | 第43-44页 |
| ·方法 | 第44-47页 |
| ·结果与分析 | 第47-52页 |
| ·γ-PGA产生菌的筛选 | 第47页 |
| ·γ-PGA紫外扫描光谱分析 | 第47-48页 |
| ·菌株C1摇瓶发酵γ-PGA的产量 | 第48页 |
| ·γ-PGA分子量 | 第48-49页 |
| ·菌株鉴定 | 第49-52页 |
| ·讨论 | 第52-53页 |
| ·本章小结 | 第53-55页 |
| 第三章 菌株C1的诱变选育及其突变株C1-6液体发酵产物(γ-PGA)对黄瓜种子萌发和玉米苗期生长的影响 | 第55-73页 |
| ·引言 | 第55-56页 |
| ·材料与方法 | 第56-59页 |
| ·材料 | 第56页 |
| ·方法 | 第56-59页 |
| ·数据分析 | 第59页 |
| ·结果与分析 | 第59-70页 |
| ·菌株C1的生长曲线 | 第59-60页 |
| ·菌株C1紫外诱变存活率 | 第60页 |
| ·菌株C1亚硝基胍诱变存活率 | 第60-61页 |
| ·突变株γ-PGA的产量 | 第61-62页 |
| ·缺水条件下γ-PGA对黄瓜种子发芽的影响 | 第62-64页 |
| ·γ-PGA对玉米苗期生长的影响 | 第64-70页 |
| ·讨论 | 第70-72页 |
| ·本章小结 | 第72-73页 |
| 第四章 固体发酵生产含γ-PGA有机肥培养基的优化及其发酵产物对玉米苗期生长的影响 | 第73-95页 |
| ·引言 | 第73-74页 |
| ·材料与方法 | 第74-80页 |
| ·材料 | 第74页 |
| ·方法 | 第74-80页 |
| ·结果与分析 | 第80-91页 |
| ·单因素实验筛选固体发酵基质及发酵参数 | 第80-83页 |
| ·Plackket-Burman Design(PBD)实验结果 | 第83-84页 |
| ·最陡爬坡实验结果 | 第84-85页 |
| ·中心复合实验(Central composite design,CCD)实验结果 | 第85-87页 |
| ·固体发酵验证实验 | 第87页 |
| ·优化条件下菌株C1-6生长曲线及γ-PGA产量曲线测定 | 第87-88页 |
| ·固体发酵生产的γ-PGA的分子量 | 第88页 |
| ·含γ-PGA的生物有机肥(CBIOF)对玉米苗期农艺性状的影响 | 第88-89页 |
| ·含γ-PGA的生物有机肥(CBIOF)对玉米苗期生物量的影响 | 第89页 |
| ·含γ-PGA的生物有机肥(CBIOF)对玉米苗期可溶性蛋白含量的影响 | 第89-90页 |
| ·含γ-PGA的生物有机肥(CBIOF)对玉米苗期可溶性糖含量的影响 | 第90-91页 |
| ·含γ-PGA的生物有机肥(CBIOF)对玉米苗期根系活力的影响 | 第91页 |
| ·讨论 | 第91-93页 |
| ·本章小结 | 第93-95页 |
| 第五章 利用PCR-DGGE技术研究固体发酵生产γ-PGA过程中微生物群落的变化 | 第95-107页 |
| ·引言 | 第95页 |
| ·材料与方法 | 第95-98页 |
| ·固体发酵菌株及种子液制备 | 第95-96页 |
| ·固体发酵 | 第96页 |
| ·发酵产物中γ-PGA的提取 | 第96页 |
| ·γ-PGA产量分析 | 第96页 |
| ·从固体发酵样品中提取微生物总DNA | 第96-97页 |
| ·PCR-DGGE | 第97-98页 |
| ·切胶测序 | 第98页 |
| ·结果与分析 | 第98-104页 |
| ·固体发酵过程中温度变化 | 第98-99页 |
| ·γ-PGA产量 | 第99-100页 |
| ·肥料样品中微生物总DNA的提取 | 第100页 |
| ·细菌16S rRNA基因V6-V8区间的DGGE | 第100-102页 |
| ·相关条带所代表菌群的聚类分析 | 第102-104页 |
| ·讨论 | 第104-106页 |
| ·本章小结 | 第106-107页 |
| 第六章 荧光定量PCR检测固体发酵过程中细菌总数和B.amyloliquefaciens数量 | 第107-125页 |
| ·引言 | 第107-108页 |
| ·材料与方法 | 第108-113页 |
| ·细菌,培养基和培养条件 | 第108页 |
| ·固体发酵 | 第108页 |
| ·DNA提取 | 第108页 |
| ·pgsB基因的常规PCR检测 | 第108-110页 |
| ·含目标基因的real-time PCR模板质粒的构建 | 第110页 |
| ·TaqMan real-time PCR引物和探针的设计 | 第110-111页 |
| ·Real-time PCR反应 | 第111-112页 |
| ·TaqMan real-time PCR检测的特异性和灵敏度 | 第112页 |
| ·标准曲线制作 | 第112-113页 |
| ·TaqMan real-time PCR法检测人工接种的样品 | 第113页 |
| ·SYBR Green real-time PCR和TaqMan real-time PCR法检测固体发酵样品 | 第113页 |
| ·结果与分析 | 第113-121页 |
| ·pgsB基因的检测 | 第113页 |
| ·TaqMan real-time PCR引物和探针的设计 | 第113-114页 |
| ·TaqMan real-time PCR反应的优化 | 第114页 |
| ·TaqMan real-time PCR检测的特异性和灵敏度 | 第114-116页 |
| ·标准曲线 | 第116-119页 |
| ·TaqMan real-time PCR检测人工接种的样品 | 第119页 |
| ·固体发酵样品检测 | 第119-121页 |
| ·讨论 | 第121-123页 |
| ·本章小结 | 第123-125页 |
| 第七章 B.amyloliquefaciens C1-6的γ-PGA降解酶基因ywtD的克隆与表达 | 第125-143页 |
| ·引言 | 第125-126页 |
| ·材料与方法 | 第126-131页 |
| ·菌株与质粒 | 第126页 |
| ·培养基与试剂 | 第126页 |
| ·抗生素及使用浓度 | 第126页 |
| ·基因组DNA和质粒DNA的提取 | 第126-127页 |
| ·ywtD基因的PCR扩增 | 第127-128页 |
| ·ywtD重组表达载体的构建 | 第128页 |
| ·SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析 | 第128-129页 |
| ·重组表达产物YwtD的纯化 | 第129页 |
| ·YwtD降解特性研究 | 第129-130页 |
| ·凝胶渗透色谱法(GPC)检测γ-PGA分子量 | 第130-131页 |
| ·YwtD降解方式初探 | 第131页 |
| ·结果与分析 | 第131-140页 |
| ·ywtD基因结构的分析 | 第131-132页 |
| ·ywtD重组表达载体的构建 | 第132-134页 |
| ·YwtD重组蛋白的IPTG诱导表达 | 第134-135页 |
| ·YwtD重组蛋白的纯化 | 第135-136页 |
| ·YwtD降解特性研究 | 第136-139页 |
| ·YwtD降解方式 | 第139-140页 |
| ·讨论 | 第140-142页 |
| ·本章小结 | 第142-143页 |
| 参考文献 | 第143-161页 |
| 全文总结 | 第161-163页 |
| 创新点 | 第163-165页 |
| 附录 | 第165-169页 |
| 攻读博士期间发表及待发表的学术论文及发明专利 | 第169-171页 |
| 致谢 | 第171-172页 |
