蛋白酶高产菌株的选育及酶学性质研究
| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-9页 |
| 1 前言 | 第9-29页 |
| ·蛋白酶的分类、应用及研究现状 | 第9-17页 |
| ·酸性蛋白酶 | 第9-12页 |
| ·中性蛋白酶 | 第12-14页 |
| ·碱性蛋白酶 | 第14-17页 |
| ·人工诱变技术 | 第17-22页 |
| ·物理诱变 | 第18-19页 |
| ·化学诱变 | 第19-20页 |
| ·生物处理 | 第20页 |
| ·复合诱变 | 第20页 |
| ·人工诱变技术在微生物育种中的研究概况 | 第20-22页 |
| ·种属鉴定 | 第22-27页 |
| ·植物鉴定方法 | 第22-23页 |
| ·动物鉴定方法 | 第23-24页 |
| ·传统的菌种鉴定方法 | 第24页 |
| ·分子生物学鉴定方法及研究概况 | 第24-27页 |
| ·蛋白酶分子量的测定 | 第27-28页 |
| ·化学组成法测定 | 第27页 |
| ·凝胶过滤法 | 第27页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第27页 |
| ·沉降法(超速离心法) | 第27-28页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第28-29页 |
| 2 材料和方法 | 第29-37页 |
| ·材料 | 第29-31页 |
| ·菌株和载体 | 第29页 |
| ·引物 | 第29页 |
| ·试剂 | 第29页 |
| ·本实验常用配方 | 第29-31页 |
| ·方法 | 第31-37页 |
| ·菌种初筛 | 第31页 |
| ·菌种复筛 | 第31-32页 |
| ·蛋白酶活力测定 | 第32页 |
| ·酶学性质测定 | 第32-33页 |
| ·诱变选育 | 第33页 |
| ·菌株DNA 的制备 | 第33-34页 |
| ·菌株基因组16S PCR | 第34页 |
| ·PCR 产物的回收 | 第34页 |
| ·扩增产物的克隆 | 第34页 |
| ·重组克隆的筛选与鉴定 | 第34-35页 |
| ·16S 基因的序列分析 | 第35页 |
| ·蛋白酶分子量测定 | 第35页 |
| ·诱变菌株的遗传稳定性测定 | 第35-37页 |
| 3 结果 | 第37-49页 |
| ·菌种的分离筛选 | 第37页 |
| ·蛋白酶活力测定 | 第37-41页 |
| ·蛋白酶活力标准曲线 | 第37-38页 |
| ·蛋白酶活力及酶学性质测定结果 | 第38-41页 |
| ·菌株诱变结果 | 第41-44页 |
| ·紫外线照射致死率 | 第41-42页 |
| ·紫外线诱变结果 | 第42-44页 |
| ·基因组DNA 的提取 | 第44-45页 |
| ·基因组 16S PCR 扩增 | 第45页 |
| ·16S rRNA 阳性克隆的测序 | 第45-46页 |
| ·筛选菌株聚类分析 | 第46-47页 |
| ·蛋白酶分子量测定 | 第47-48页 |
| ·遗传稳定性测定 | 第48-49页 |
| 4 讨论 | 第49-55页 |
| ·培养条件 | 第49-50页 |
| ·透明圈 | 第50页 |
| ·菌种的诱变 | 第50-51页 |
| ·发酵条件及酶学性质 | 第51-52页 |
| ·菌种鉴定 | 第52-55页 |
| 参考文献 | 第55-67页 |
| 致谢 | 第67-69页 |
| 攻读硕士学位期间的研究成果 | 第69-70页 |