| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 缩略词表 | 第8-11页 |
| 前言 | 第11-15页 |
| 1.材料与方法 | 第15-33页 |
| ·实验材料 | 第15-17页 |
| ·实验试剂 | 第15-16页 |
| ·实验仪器 | 第16-17页 |
| ·实验方法 | 第17-33页 |
| ·引物设计 | 第17-21页 |
| ·人外周血中淋巴细胞的分离 | 第21页 |
| ·总 RNA 的提取 | 第21-22页 |
| ·cDNA 的合成 | 第22页 |
| ·人抗体可变区 VH、VL 基因的巢式 PCR 扩增 | 第22-24页 |
| ·目的基因片段的胶回收 | 第24-25页 |
| ·重叠延伸 PCR 进行人单链 scFv 片段的组装 | 第25-26页 |
| ·目的片段 scFV 与载体 pcantab-5E 的双酶切 | 第26页 |
| ·scFv 与 pcantab-5E 的连接 | 第26-27页 |
| ·XL-Blue 电转感受态的制备 | 第27页 |
| ·辅助噬菌体 VCSM13 的扩增 | 第27页 |
| ·噬菌体滴度的测定 | 第27-28页 |
| ·电转化建立初级噬菌体抗体库 | 第28-29页 |
| ·初级噬菌体库的插入率、多样性分析 | 第29页 |
| ·BCA 法测定 DR5 抗原浓度 | 第29-30页 |
| ·第一轮富集筛选 | 第30-31页 |
| ·制备带筛选克隆 | 第31页 |
| ·ELISA 筛选阳性克隆 | 第31-33页 |
| 2.实验结果 | 第33-41页 |
| ·VH、VL 基因片段的扩增 | 第33-34页 |
| ·scFV 的扩增及纯化 | 第34-35页 |
| ·噬菌体抗体库容量的测定 | 第35页 |
| ·噬粒目的片段插入率的测定 | 第35-36页 |
| ·噬菌体抗体库多样性的测定 | 第36-37页 |
| ·BCA 测定蛋白浓度 | 第37页 |
| ·噬菌体文库的淘洗 | 第37-38页 |
| ·抗 DR5 阳性克隆的 ELISA 筛选 | 第38-41页 |
| 3.讨论 | 第41-45页 |
| 结论 | 第45-47页 |
| 参考文献 | 第47-51页 |
| 文献综述 | 第51-63页 |
| 参考文献 | 第58-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
