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锦鲤疱疹病毒抗体血清学检测方法的建立及应用

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-10页
第一章 锦鲤疱疹病毒的研究进展第10-22页
 1 锦鲤疱疹病毒的生物学特征第10-12页
   ·锦鲤疱疹病毒的分类地位第10页
   ·KHV的形态学及其结构第10-12页
   ·理化特性第12页
   ·培养特性第12页
 2 KHV的临床症状和病理变化第12-13页
 3 流行病学第13页
 4 锦鲤疱疹病毒的诊断方法第13-15页
   ·临床诊断第13页
   ·病毒的分离第13-14页
   ·免疫学诊断方法第14页
   ·分子生物学诊断方法第14-15页
 5 锦鲤疱疹病毒的防控第15-17页
   ·预防接种第15页
   ·生物安全措施第15-16页
   ·抗病育种第16-17页
 参考文献第17-22页
第二章 锦鲤疱疹病毒的增殖与纯化第22-30页
 摘要第22页
 1 材料与方法第22-24页
   ·细胞及参考毒株第22页
   ·主要试剂第22页
   ·主要仪器设备第22-23页
   ·传代细胞培养方法第23页
   ·KHV-F347株的增殖第23页
   ·KHV-F347株的纯化第23-24页
 2 结果第24-27页
   ·KHV-F347株的增殖第24-26页
   ·SDS-PAGE和Western-blot鉴定含病毒的条带第26-27页
 3 讨论第27-28页
 参考文献第28-29页
 Abstract第29-30页
第三章 锦鲤疱疹病毒抗体的间接ELISA检测方法的建立及应用第30-40页
 摘要第30页
 1 材料与方法第30-34页
   ·标准血清、血清样品、酶标抗体第30-31页
   ·病毒的纯化与增殖第31页
   ·主要溶液的配置第31页
   ·抗原最佳包被浓度和阴阳性血清最佳稀释度的确定第31-32页
   ·兔抗鲤IgM最佳工作浓度的确定第32页
   ·山羊抗兔IgG-HRP最佳浓度的确定第32-33页
   ·最佳封闭液的选择第33页
   ·间接ELISA测定的基本步骤第33页
   ·检测欧盟能力认证血清样品第33-34页
   ·间接ELISA的临床应用第34页
 2 结果第34-37页
   ·抗原最佳包被浓度和阴阳性血清最佳稀释度的确定第34-35页
   ·兔抗鲤IgM最佳工作浓度的确定第35页
   ·山羊抗-HRP最佳工作浓度的确定第35-36页
   ·最佳封闭液的确定第36页
   ·检测欧盟能力认证血清样品第36-37页
   ·间接ELISA的临床应用第37页
 3 讨论第37-38页
 参考文献第38-39页
 Abstract第39-40页
第四章 锦鲤疱疹病毒ORF59蛋白的原核表达第40-48页
 摘要第40页
 1 材料与方法第40-43页
   ·菌种和载体第40页
   ·主要试剂第40-41页
   ·主要仪器第41页
   ·PCR扩增目的基因第41页
   ·KHV-F347 ORF59基因的PCR扩增第41-42页
   ·KHV-F347 ORF59基因的克隆及鉴定第42页
   ·重组表达载体的构建及鉴定第42页
   ·重组菌的诱导表达第42页
   ·表达产物的SDS-PAGE电泳检测以及Western-blot分析第42-43页
   ·蛋白纯化第43页
 2 结果第43-45页
   ·PCR扩增第43页
   ·TA质粒构建及序列鉴定第43-44页
   ·重组表达载体pET-ORF59的筛选与鉴定第44页
   ·表达产物的SDS-PAGE电泳检测以及Western-blot分析第44-45页
 3 讨论第45-46页
 参考文献第46-47页
 Abstract第47-48页
全文总结第48-50页
致谢第50页

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