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由Toll like receptors介导的布拉氏酵母菌和枯草芽孢杆菌B10对肉鸡肠黏膜免疫功能影响的研究

ACKNOWLEDGEMENTS第1-17页
LIST OF TABLES第17-18页
LIST OF FIGURES第18-21页
ABSTRACT第21-25页
摘要第25-28页
ABBREVIATIONS第28-30页
CHAPTER-Ⅰ INTRODUCTION第30-35页
CHAPTER-Ⅱ REVIEW OF LITERATURE第35-59页
   ·Beneficial effects ofprobiotics on intestinal health第35-39页
     ·Helpful in lactose intolerance第35-36页
     ·Prevention of diarrhea第36-37页
     ·Reprieve from constipation第37页
     ·Colon cancer第37页
     ·Inflammatory bowel disease第37-38页
     ·Necrotizing enterocolitis第38-39页
     ·Beneficial effects for homeostasis第39页
   ·Effect of probiotics on intestinal immunity and chicken health第39-41页
   ·Mechanisms of Probiotic Action第41-42页
   ·Mechanism of action in intestinal defense第42-46页
     ·Antagonistic effects against pathogens第42-44页
     ·Competitive exclusion along the epithelium第44-45页
     ·Improving epithelial structure第45-46页
   ·Boost intestinal immunity第46-47页
   ·Importance of intestinal cells receptor signaling第47页
   ·Cytokine production in response of TLRs signaling第47-50页
   ·In vitro culture of chicken bone marrow derived dendritic cells第50-53页
     ·Dendritic cells and their sub types第51-53页
   ·Biological function of DCs第53-54页
   ·Effect of probiotics on DCs functionality第54-59页
CHAPTER-Ⅲ Supplementary effects of Saccharomyces boulardii and Bacillus subtilis B10 ongrowth performance, digestive enzyme activities, antioxidation capacity and bloodhomeostasis in broilers第59-77页
   ·INTRODUCTION第59-61页
   ·MATERIALS AND METHODS第61-65页
     ·Culturing of probiotics第61页
     ·Experiment design and feeding method第61页
     ·growth perfermance and internal organs weight第61-62页
     ·Blood collection第62页
     ·Sampling of digesta and liver第62页
     ·Enzymatic activities analysis第62-63页
     ·Antioxidation capacity assays第63页
     ·Statistical analysis第63-65页
   ·RESULTS第65-73页
     ·Growth performance第65页
     ·Digestive enzymes activity assay第65页
     ·Serum antioxidation analysis第65-69页
     ·Liver antioxidation firnctioning第69页
     ·Blood biochemical examination第69-73页
   ·DISCUSSION第73-77页
CHAPTER-Ⅳ Effect of Saccharomyces boulardii and Bacillus subtilis B10 on intestinalultrastructure and microbial community composition第77-100页
   ·INTRODUCTION第77-79页
   ·MATERIAL AND METHODS第79-87页
     ·Bacterial and yeast culture preparation第79页
     ·Experiment design and feeding procedure第79页
     ·Sampling procedure第79-80页
     ·Histological examination第80-81页
     ·Transmission electron microscopy第81页
     ·RNA extraction and cDNA svnthesis第81页
     ·Quantitative real time polymerase chain reaction (qRT-PCR)第81-82页
     ·Immunohistochemical staining for IgA positive cells第82-83页
     ·Determination of cvtokines by ELISA第83-84页
     ·DNA isolation from fecal contents第84-85页
     ·PCR and pyrosequencing第85页
     ·Post-run analvsis第85-86页
     ·Statistical Analyses第86-87页
   ·RESULTS第87-97页
     ·Histological observation第87页
     ·Intestinal ultrastructure examination第87页
     ·Ocln, Cldn2 and Cldn3 mRNA expressions第87-91页
     ·Microbial community diversity and species richness in the jejunum and ileum第91页
     ·Microbial coMmunity structure modulation in the Jejunum第91-94页
     ·Microbial community structure modulation in the Ileum第94-97页
   ·DISCUSSION第97-99页
   ·CONCLUSION第99-100页
CHAPTER-Ⅴ The effect of Saccharomyces boulardii and Bacillus subtilis B10 on intestinalimmunity and mRNA expression of TLR signaling pathway in broiler第100-118页
   ·INTRODUCTION第100-102页
   ·MATERIALS AND METHODS第102-107页
     ·Preparation of probiotics第102页
     ·Experimental Designing第102页
     ·Sampling procedure第102-103页
     ·Determination of cytokines by ELISA第103页
     ·Immunohistochemistry of jejunum and ileum第103-104页
     ·RNA extraction and cDNA synthesis第104-105页
     ·Quantitative real time polymerase chain reaction (qRT-PCR)第105页
     ·Statistical analyses第105-107页
   ·RESULTS第107-113页
     ·Cytokine production level第107页
     ·IgA positive cells and sIgA concentration in the jejunum and ileum第107页
     ·Serum Immunoglobulin Assay第107-111页
     ·Surface Toll like receptor and down streaming expressions response第111-113页
   ·DISCUSSION第113-118页
CHAPTER-Ⅵ Cloning approach coordinated with IL-4 to asses optimal growth and biologicalactivity of bone marrow derive denderitic cells第118-136页
   ·INTRODUCTION第118-120页
   ·MATERIALS AND METHODS第120-124页
     ·Cloning of chicken rGM-CSF and construction of expression vector第120页
     ·Chicken rGM-CSF protein expression and purification第120-121页
     ·SDS-PAGE and western blotting第121页
     ·Isolation of progenitor cells from chicken bone marrow第121-122页
     ·Growth and maturation of dendrite cells (DCs)第122页
     ·Cell yield evaluation第122页
     ·Morphological examination第122页
     ·Extraction of RNA and cDNA Synthesis第122-123页
     ·Quantitative real time polymerase chain reaction (qRT-PCR)第123页
     ·Bone marrow cells, developmental and morphological changes第123-124页
     ·Statistical analysis第124页
   ·RESULTS第124-130页
     ·Cloning, expression and purification of chicken GM-CSF第124页
     ·Cell culture yield第124-127页
     ·Morphological examination of cultured BMDCs第127页
     ·Phenotype of immature and mature chi-BMDCs第127-130页
     ·Genes expression level of surface markers第130页
     ·Inflammatory and anti-inflammatory cytokines genes expression第130页
   ·DISCUSSION第130-135页
   ·CONCLUSION第135-136页
CHAPTER-Ⅶ Effects of Saccharomyces boulardii and Bacillus subtilis B10 on immunity of chickenbone marrow dendritic cells modulated by TLRs signaling pathway第136-157页
   ·INTRODUCTION第136-137页
   ·MATERIALS AND METHODS第137-141页
     ·Isolation and culturing of chicken bone marrow, dendrite cells (chi-BMDCs)第137-138页
     ·Probiotics and culture conditions第138页
     ·Experimental design第138-139页
     ·Morphological observation第139页
     ·Scan electron microscopy (SEM)第139页
     ·Transmission electron Microscopy第139-140页
     ·Extraction of RNA and cDNA Synthesis第140页
     ·Quantitation of mRNA qRT-PCR第140-141页
     ·Cytokines production by ELISA essay第141页
     ·Statistical Analysis第141页
   ·RESULTS第141-152页
     ·Morphological changes in chicken bone marrow derived dendrite cells第141-144页
     ·Scan electron microscopy第144页
     ·Transmission electron microscopy (TEM)第144-147页
     ·Gene expression of sanface markers第147页
     ·TLRs and associated factors expression response第147-150页
     ·Cytokines and chemokine determination第150-152页
   ·DISCUSSION第152-156页
   ·CONCLUSION第156-157页
CHAPTER-Ⅷ SUMMARY, CONCLUSIONS AND SUGGESTIONS第157-163页
 Summary第157-161页
 Conclusions第161-162页
 Suggestions第162-163页
REFRENCES第163-183页

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