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β-葡萄糖苷酶分泌表达型乙醇发酵E.coli工程菌的构建

摘要第1-6页
Abstract第6-9页
前言第9-10页
第1章 文献综述第10-23页
   ·生物乙醇概述第10-11页
     ·开发生物乙醇的意义第10-11页
     ·生物乙醇的历史和现状第11页
   ·木质纤维素第11-14页
     ·木质纤维素的概述第11-12页
     ·木质纤维素的组成第12-14页
   ·β-葡萄糖苷酶概述第14-15页
     ·β-葡萄糖苷酶的分类第14-15页
     ·β-葡萄糖苷酶的性质第15页
     ·β-葡萄糖苷酶活力的测定方法第15页
   ·木质纤维质的利用第15-19页
     ·木质纤维素的代谢工艺第15-16页
     ·整合生物加工工艺第16-17页
     ·常见的CBP构建菌第17-19页
   ·常见的乙醇路径第19-21页
   ·课题研究的意义与内容第21-23页
第2章 材料与方法第23-36页
   ·实验材料第23-26页
     ·菌株与载体第23-24页
     ·主要试剂第24页
     ·实验仪器第24-25页
     ·培养基和主要溶液的配制第25-26页
   ·实验及分析方法第26-36页
     ·基因组DNA的提取第26-27页
     ·基因pdc、adhB的PCR扩增第27-28页
     ·Overlap PCR添加启动子P_(tac)第28-29页
     ·pdc、adhB和bglB表达系统的构建第29-30页
     ·基因pdc和adhB的定性检测第30-31页
     ·Red重组整合乙醇路径第31-33页
     ·蛋白浓度的测定和SDS-PAGE电泳第33页
     ·重组菌的酶活测定第33-35页
     ·重组菌发酵纤维二糖的条件第35-36页
第3章 代谢纤维二糖产乙醇CBP工程菌的构建第36-49页
   ·乙醇路径的构建第36-39页
     ·基因pdc-adhB的克隆第36-37页
     ·乙醛指示平板定性检测酶活第37-38页
     ·pdc和adhB的蛋白质表达第38-39页
   ·Red重组整合乙醇生产路径第39-41页
     ·Red重组相关质粒的构建第39-40页
     ·整合乙醇路径第40-41页
   ·重组菌E. coli P81(pUC19-bglB)的构建第41页
   ·重组菌E. coli P81(pUC19-bglB)的酶活测定第41-43页
     ·乙醛指示平板定性检验第41-42页
     ·重组菌E. coli P81(pUC19-bglB)的AdhB酶活测定第42页
     ·重组菌中BglB酶活测定第42-43页
   ·纤维二糖为碳源的乙醇发酵第43-49页
     ·重组菌E. coli P81(pUC19-bglB)以纤维二糖为唯一碳源的发酵第43-44页
     ·重组菌E. coli P81(pUC19-bglB)发酵纤维二糖生产乙醇第44-46页
     ·纤维二糖的浓度对重组菌E. coli P81(pUC19-bglB)发酵的影响第46-47页
     ·葡萄糖对重组菌E. coli P81(pUC19-bglB)代谢纤维二糖的影响第47-49页
第4章 结论与展望第49-51页
参考文献第51-57页
致谢第57页

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