| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-12页 |
| 1 研究背景 | 第12-54页 |
| ·NF-κB及其在免疫反应中的作用 | 第12-29页 |
| ·NF-κB信号通路 | 第12-18页 |
| ·NF-κB家族成员及其调控机制 | 第12-13页 |
| ·IκB家族成员及其调控机制 | 第13-15页 |
| ·IκK家族成员及其调控机制 | 第15-17页 |
| ·经典与非经典NF-κB信号通路 | 第17-18页 |
| ·NF-κB在免疫过程中的作用 | 第18-29页 |
| ·NF-κB与天然免疫 | 第18-23页 |
| ·NF-κB与Toll样受体 | 第18-20页 |
| ·NF-κB与胞质内DNA受体 | 第20-21页 |
| ·NF-κB与NOD样受体(NLRs) | 第21-22页 |
| ·NF-κB与RIG-I样受体 | 第22-23页 |
| ·NF-κB与炎症反应 | 第23-24页 |
| ·NF-κB与适应性免疫 | 第24-29页 |
| ·NF-κB与免疫细胞的发育成熟 | 第25页 |
| ·NF-κB介导的T细胞的分化 | 第25-28页 |
| ·NF-κB介导的B细胞的成熟 | 第28-29页 |
| ·由抗原受体介导NF-κB激活的信号通路 | 第29-44页 |
| ·TCR、BCR抗原受体介绍 | 第29-30页 |
| ·TCR和BCR的近端信号元件 | 第30-32页 |
| ·由TCR/CD28介导的NF-κB激活的信号通路 | 第32-35页 |
| ·TCR通路中的关键分子 | 第35-44页 |
| ·PKCθ及其调控机制 | 第35-37页 |
| ·CARMA1及其调控机制 | 第37-39页 |
| ·BCL10及其调控机制 | 第39-41页 |
| ·MALT1及其调控机制 | 第41-43页 |
| ·TRAF6及其调控机制 | 第43-44页 |
| ·泛素化修饰与SUMO化修饰 | 第44-54页 |
| ·泛素化修饰简介 | 第44-45页 |
| ·泛素链类型 | 第45-48页 |
| ·去泛素化酶 | 第48-49页 |
| ·SUMO及SUMO修饰简介 | 第49-51页 |
| ·去SUMO化修饰的蛋白酶 | 第51-52页 |
| ·SUMO化的功能 | 第52-53页 |
| ·泛素化与SUMO化修饰之间的关系 | 第53-54页 |
| 2 实验材料和实验方法 | 第54-62页 |
| ·实验材料 | 第54-56页 |
| ·细胞培养实验所需材料 | 第54页 |
| ·构建表达载体所需试剂与材料 | 第54-55页 |
| ·免疫共沉淀及Western Blot所需试剂与材料 | 第55页 |
| ·实时定量PCR实验所需材料 | 第55页 |
| ·双荧光素酶报告基因所需材料 | 第55页 |
| ·串联亲和纯化所需载体与材料 | 第55-56页 |
| ·流式分离细胞所需载体与材料 | 第56页 |
| ·抗体及细胞因子 | 第56页 |
| ·其他试剂及耗材 | 第56页 |
| ·实验方法 | 第56-62页 |
| ·质粒的构建与纯化 | 第56-57页 |
| ·细胞的培养和瞬时转染 | 第57页 |
| ·串联亲和纯化 | 第57-58页 |
| ·逆转录病毒感染建立稳定表达的细胞系 | 第58页 |
| ·免疫共沉淀和Western Blot实验 | 第58-59页 |
| ·过表达外源蛋白免疫其沉淀实验 | 第58-59页 |
| ·内源性蛋白免疫其沉淀 | 第59页 |
| ·Western Blot实验 | 第59页 |
| ·荧光定量PCR实验 | 第59-60页 |
| ·ELISA实验 | 第60页 |
| ·细胞的流式分选 | 第60页 |
| ·泛素化实验与SUMO化实验 | 第60-61页 |
| ·体内泛索化实验 | 第60-61页 |
| ·SUMO化实验 | 第61页 |
| ·荧光素酶报告基因实验 | 第61-62页 |
| 3 研究结果和讨论 | 第62-79页 |
| ·研究背景与立项依据 | 第62-63页 |
| ·研究结果与分析 | 第63-76页 |
| ·MALT1相互作用蛋白的亲和纯化及质谱鉴定 | 第63-64页 |
| ·USP2a是MALT1的相互作用蛋白 | 第64-66页 |
| ·下调USP2a的表达抑制TCR诱导的NF-κB的激活 | 第66-70页 |
| ·USP2a-RNAi载体的构建与效率检测 | 第66-67页 |
| ·下调USP2a抑制IκBα的磷酸化 | 第67-68页 |
| ·回复USP2a的表达可使IκBα的磷酸化水平恢复 | 第68-69页 |
| ·下调USP2a抑制IL-2的产生 | 第69-70页 |
| ·下调USP2a的表达抑制由TCR介导的MALT1以及TRAF6的多聚泛素化 | 第70-71页 |
| ·USP2a介导TRAF6被招募至MALT1 | 第71-74页 |
| ·下调USP2a的表达减弱了MALT1与TRAF6之间的相互作用 | 第71-73页 |
| ·介导MALT1与TRAF6相互作用需要USP2a的酶活性 | 第73-74页 |
| ·USP2a去除TRAF6上的SUMO化修饰 | 第74-76页 |
| ·研究结果讨论与展望 | 第76-79页 |
| 参考文献 | 第79-90页 |
| 作者简历 | 第90-92页 |
| 缩略语标注表 | 第92-94页 |
| 致谢 | 第94-95页 |
