| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 1 引言 | 第11-18页 |
| ·MC4R 基因的概述 | 第11-13页 |
| ·黑素皮质素受体的研究进展 | 第11-12页 |
| ·MC4R 基因的研究概况 | 第12-13页 |
| ·中枢黑素皮质素系统（CMS）的研究进展 | 第13-16页 |
| ·神经肽 Y | 第13-14页 |
| ·阿黑皮质素原 | 第14-15页 |
| ·瘦素 | 第15页 |
| ·刺鼠相关蛋白 | 第15-16页 |
| ·四环素诱导的基因表达系统 | 第16-17页 |
| ·四环素诱导表达系统的原理 | 第16页 |
| ·Tet-Off 调控系统 | 第16-17页 |
| ·Tet-on 调控系统 | 第17页 |
| ·实验目的与意义 | 第17-18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-30页 |
| ·实验材料 | 第18-19页 |
| ·实验用的载体 | 第18页 |
| ·细胞和菌株 | 第18页 |
| ·主要仪器设备 | 第18页 |
| ·主要药品、试剂 | 第18-19页 |
| ·主要分子生物学软件 | 第19页 |
| ·实验方法 | 第19-30页 |
| ·重组质粒 pTRE-MC4R（P1）的构建及鉴定 | 第19-21页 |
| ·重组质粒 P1 细胞转染及诱导表达水平的检测 | 第21-25页 |
| ·重组质粒 pcDNA3.1（+）-rtTA- PTight-MC4R(P2)的构建及鉴定 | 第25-27页 |
| ·重组质粒 P2 细胞转染及诱导表达水平的检测 | 第27-28页 |
| ·诱导表达 MC4R 基因对成纤维细胞 CMS 系统关键因子的影响 | 第28-30页 |
| 3 结果与分析 | 第30-41页 |
| ·P1 载体的构建 | 第30-33页 |
| ·民猪的 MC4R 基因的克隆 | 第30-32页 |
| ·诱导表达载体 P1 的鉴定 | 第32-33页 |
| ·重组质粒 P1 诱导表达水平结果 | 第33-35页 |
| ·成纤维细胞的培养及转染效果 | 第33-34页 |
| ·MC4R 基因诱导表达效果检测 | 第34-35页 |
| ·P2 载体的构建 | 第35-41页 |
| ·启动子调控区扩增结果 | 第35-36页 |
| ·转录元件 rTetR 片段扩增结果 | 第36-37页 |
| ·P2 载体的酶切鉴定 | 第37-38页 |
| ·MC4R 基因诱导表达效果检测 | 第38-39页 |
| ·诱导表达 MC4R 基因时 CMS 系统关键因子的相对表达量 | 第39-41页 |
| 4 讨论 | 第41-44页 |
| ·诱导表达载体的构建 | 第41页 |
| ·Tet-on 系统的优点 | 第41-42页 |
| ·诱导表达基因的检测 | 第42页 |
| ·诱导 MC4R 基因对 CMS 系统的影响 | 第42-44页 |
| 5 结论 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-51页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第51页 |
