摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-7页 |
目录 | 第7-9页 |
图表清单 | 第9-10页 |
1 文献综述 | 第10-18页 |
·木质素组成及其分类 | 第10页 |
·木质素的生物合成途径及其关键酶 | 第10-13页 |
·苯丙烷(Phenylpropanoid)途径 | 第11-13页 |
·木质素单体合成的特异途径 | 第13页 |
·木质素在植物生物逆境中的作用 | 第13-14页 |
·肉桂醇脱氢酶研究进展 | 第14-18页 |
·肉桂醇脱氢酶的特征 | 第14-15页 |
·肉桂醇脱氢酶的家族分布和分类 | 第15页 |
·肉桂醇脱氢酶基因的克隆 | 第15页 |
·肉桂醇脱氢酶基因的表达特征分析 | 第15-18页 |
2 引言 | 第18-20页 |
·研究意义与目的 | 第18页 |
·研究内容和技术路线 | 第18-20页 |
·研究内容 | 第18-19页 |
·技术路线 | 第19-20页 |
3 材料与方法 | 第20-32页 |
·试验材料与处理 | 第20页 |
·实验材料 | 第20页 |
·试验处理 | 第20页 |
·主要试剂与仪器 | 第20-22页 |
·主要试剂 | 第20页 |
·主要仪器设备 | 第20-21页 |
·实验中主要试剂配方 | 第21-22页 |
·方法 | 第22-32页 |
·处理组与对照组茶树叶片总 RNA 提取 | 第22-23页 |
·RNA 的检测 | 第23页 |
·PCR 扩增产物的纯化回收和克隆 | 第23-24页 |
·cDNA 第一链的合成 | 第24页 |
·三个 CAD 基因的 cDNA 全长克隆 | 第24-26页 |
·CAD 基因的生物信息学分析 | 第26页 |
·三个 CAD 基因的原核表达 | 第26-28页 |
·原核表达 CAD 的纯化,包涵体复性 | 第28-29页 |
·原核表达 CAD 的酶活检测与酶学性质研究 | 第29-30页 |
·三个 CAD 基因的 Southern blot 分析 | 第30-31页 |
·三个 CAD 表达特征的 qRT-PCR 分析 | 第31-32页 |
4 结果与分析 | 第32-49页 |
·三个 CAD 基因的全长 CDNA克隆与序列分析 | 第32-38页 |
·CAD 基因的 3’-RACE 克隆 | 第32页 |
·CAD 基因的 5’-RACE 克隆 | 第32-33页 |
·三个 CAD 基因的全长 cDNA 验证 | 第33-34页 |
·三个 CAD 基因的序列分析 | 第34-36页 |
·三个茶树 CAD 的序列同源比对和进化树分析 | 第36-38页 |
·三个 CAD 基因的原核表达和蛋白纯化 | 第38-41页 |
·CAD 基因的 ORF 扩增 | 第38-39页 |
·重组表达载体的双酶切验证 | 第39-40页 |
·三个 CAD 基因的原核表达和纯化 | 第40页 |
·CAD2 上清中表达蛋白的条件优化 | 第40-41页 |
·三个原核表达的 CAD 酶活检测和酶学性质研究 | 第41-43页 |
·酶活检测 | 第41-42页 |
·原核表达的 CAD2 酶学性质研究 | 第42-43页 |
·三个 CAD 基因的 Southern blot 分析 | 第43-44页 |
·三个 CAD 基因的表达特征分析 | 第44-49页 |
·实时荧光定量 PCR 标准曲线的确定 | 第44-45页 |
·茶尺蠖取食诱导三个 CAD 基因的表达特征分析 | 第45页 |
·机械损伤诱导 CAD 基因的表达特征 | 第45-46页 |
·MeJA、SA、ABA 处理对三个 CAD 基因表达的影响 | 第46-49页 |
5 讨论 | 第49-53页 |
·茶树 CAD 的结构特征,进化分类和 Southern blot 分析 | 第49页 |
·原核表达,条件优化和蛋白纯化 | 第49-50页 |
·包涵体复性和酶活测定 | 第50页 |
·CAD 基因的表达特征分析 | 第50-53页 |
6 结论 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-61页 |
附录A 英文缩写词汇表 | 第61-62页 |
致谢 | 第62-63页 |
作者简介 | 第63页 |