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不结球白菜维生素C合成代谢相关基因GLDH和APX功能鉴定

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-11页
缩略词表第11-12页
引言第12-13页
第一部分 文献综述第13-35页
 1 植物抗坏血酸的研究进展第13-23页
   ·抗坏血酸的生物学功能第13-15页
     ·抗坏血酸在植物体的抗氧化系统中的作用第13-14页
     ·抗坏血酸在光合作用和光保护中的作用第14页
     ·抗坏血酸在细胞分裂和分化中的作用第14-15页
     ·抗坏血酸作为一系列重要酶反应的辅因子第15页
   ·抗坏血酸的生物合成第15-16页
   ·植物抗坏血酸的代谢第16-17页
   ·AsA合成代谢相关酶基因的克隆及基因调控研究第17-21页
     ·GLDH基因研究进展第18-19页
     ·APX基因研究进展第19-21页
   ·RNAi研究进展第21-23页
 2 芸薹属植物转基因研究进展第23-26页
   ·农杆菌介导法转基因第23-25页
     ·农杆菌介导遗传转化的优势第24页
     ·影响农杆菌介导的遗传转化的主要因素第24-25页
   ·不结球白菜转基因研究进展第25-26页
 参考文献第26-35页
第二部分 研究报告第35-63页
 第一章 不结球白菜GLDH基因过量表达转基因植株T_1代鉴定第35-43页
  摘要第35页
  Abstract第35-36页
  1 材料和方法第36-37页
   ·植物材料第36页
   ·转基因植株的鉴定第36-37页
     ·DNA提取及PCR检测第36页
     ·荧光定量PCR检测第36-37页
     ·植株Vc含量测定第37页
     ·植株光合特性测定第37页
  2 结果与分析第37-40页
   ·转基因植株PCR鉴定第37-38页
   ·荧光定量PCR检测第38-39页
   ·转基因植株Vc含量测定第39-40页
   ·转基因植株光合特性测定第40页
  3 讨论第40-42页
  参考文献第42-43页
 第二章 不结球白菜GLDH基因抑制表达转基因植株的获得和鉴定第43-55页
  摘要第43页
  Abstract第43-44页
  1 材料和方法第44-47页
   ·植物材料和表达载体第44页
   ·酶和试剂第44页
   ·植物材料的培养和转化第44-46页
     ·农杆菌侵染液的准备第44-45页
     ·外植体的预培养,侵染和共培养第45页
     ·不定芽再生,筛选和植株形成第45页
     ·实验所用培养基配方第45-46页
   ·转基因植株的鉴定第46-47页
     ·GUS组织化学染色第46页
     ·DNA提取及PCR检测第46页
     ·荧光定量PCR检测第46-47页
     ·植株Vc含量测定第47页
     ·植株GLDH酶活性测定第47页
  2 结果与分析第47-50页
   ·抑制表达转基因植株的获得第47页
   ·GUS瞬时表达检测第47-48页
   ·转基因植株PCR鉴定第48页
   ·荧光定量PCR检测第48-49页
   ·转基因植株Vc含量测定第49-50页
   ·转基因植株GLDH酶活性测定第50页
  3 讨论第50-52页
  参考文献第52-55页
 第三章 不结球白菜抗坏血酸过氧化物酶基因克隆及其原核表达载体构建第55-63页
  摘要第55页
  Abstract第55-56页
  1 试验材料第56-58页
   ·材料第56页
     ·实验材料第56页
     ·试剂第56页
   ·试验方法第56-58页
     ·总RNA的提取及单链cDNA的合成第56页
     ·APX基因cDNA全长序列的克隆第56-57页
     ·APX基因片段的回收纯化、连接和转化第57页
     ·原核表达载体的构建第57页
     ·重组质粒在大肠杆菌中的诱导表达及SDS-PAGE分析第57-58页
  2 结果与分析第58-61页
   ·不结球白菜APX基因RT-PCR扩增第58-60页
   ·原核表达载体PGEX4T-3-APX的构建及其鉴定第60页
   ·原核表达产物的检测第60-61页
  3 讨论第61-62页
  参考文献第62-63页
全文结论第63-65页
论文发表情况第65-67页
致谢第67页

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