| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 缩略词表 | 第11-12页 |
| 引言 | 第12-13页 |
| 第一部分 文献综述 | 第13-35页 |
| 1 植物抗坏血酸的研究进展 | 第13-23页 |
| ·抗坏血酸的生物学功能 | 第13-15页 |
| ·抗坏血酸在植物体的抗氧化系统中的作用 | 第13-14页 |
| ·抗坏血酸在光合作用和光保护中的作用 | 第14页 |
| ·抗坏血酸在细胞分裂和分化中的作用 | 第14-15页 |
| ·抗坏血酸作为一系列重要酶反应的辅因子 | 第15页 |
| ·抗坏血酸的生物合成 | 第15-16页 |
| ·植物抗坏血酸的代谢 | 第16-17页 |
| ·AsA合成代谢相关酶基因的克隆及基因调控研究 | 第17-21页 |
| ·GLDH基因研究进展 | 第18-19页 |
| ·APX基因研究进展 | 第19-21页 |
| ·RNAi研究进展 | 第21-23页 |
| 2 芸薹属植物转基因研究进展 | 第23-26页 |
| ·农杆菌介导法转基因 | 第23-25页 |
| ·农杆菌介导遗传转化的优势 | 第24页 |
| ·影响农杆菌介导的遗传转化的主要因素 | 第24-25页 |
| ·不结球白菜转基因研究进展 | 第25-26页 |
| 参考文献 | 第26-35页 |
| 第二部分 研究报告 | 第35-63页 |
| 第一章 不结球白菜GLDH基因过量表达转基因植株T_1代鉴定 | 第35-43页 |
| 摘要 | 第35页 |
| Abstract | 第35-36页 |
| 1 材料和方法 | 第36-37页 |
| ·植物材料 | 第36页 |
| ·转基因植株的鉴定 | 第36-37页 |
| ·DNA提取及PCR检测 | 第36页 |
| ·荧光定量PCR检测 | 第36-37页 |
| ·植株Vc含量测定 | 第37页 |
| ·植株光合特性测定 | 第37页 |
| 2 结果与分析 | 第37-40页 |
| ·转基因植株PCR鉴定 | 第37-38页 |
| ·荧光定量PCR检测 | 第38-39页 |
| ·转基因植株Vc含量测定 | 第39-40页 |
| ·转基因植株光合特性测定 | 第40页 |
| 3 讨论 | 第40-42页 |
| 参考文献 | 第42-43页 |
| 第二章 不结球白菜GLDH基因抑制表达转基因植株的获得和鉴定 | 第43-55页 |
| 摘要 | 第43页 |
| Abstract | 第43-44页 |
| 1 材料和方法 | 第44-47页 |
| ·植物材料和表达载体 | 第44页 |
| ·酶和试剂 | 第44页 |
| ·植物材料的培养和转化 | 第44-46页 |
| ·农杆菌侵染液的准备 | 第44-45页 |
| ·外植体的预培养,侵染和共培养 | 第45页 |
| ·不定芽再生,筛选和植株形成 | 第45页 |
| ·实验所用培养基配方 | 第45-46页 |
| ·转基因植株的鉴定 | 第46-47页 |
| ·GUS组织化学染色 | 第46页 |
| ·DNA提取及PCR检测 | 第46页 |
| ·荧光定量PCR检测 | 第46-47页 |
| ·植株Vc含量测定 | 第47页 |
| ·植株GLDH酶活性测定 | 第47页 |
| 2 结果与分析 | 第47-50页 |
| ·抑制表达转基因植株的获得 | 第47页 |
| ·GUS瞬时表达检测 | 第47-48页 |
| ·转基因植株PCR鉴定 | 第48页 |
| ·荧光定量PCR检测 | 第48-49页 |
| ·转基因植株Vc含量测定 | 第49-50页 |
| ·转基因植株GLDH酶活性测定 | 第50页 |
| 3 讨论 | 第50-52页 |
| 参考文献 | 第52-55页 |
| 第三章 不结球白菜抗坏血酸过氧化物酶基因克隆及其原核表达载体构建 | 第55-63页 |
| 摘要 | 第55页 |
| Abstract | 第55-56页 |
| 1 试验材料 | 第56-58页 |
| ·材料 | 第56页 |
| ·实验材料 | 第56页 |
| ·试剂 | 第56页 |
| ·试验方法 | 第56-58页 |
| ·总RNA的提取及单链cDNA的合成 | 第56页 |
| ·APX基因cDNA全长序列的克隆 | 第56-57页 |
| ·APX基因片段的回收纯化、连接和转化 | 第57页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第57页 |
| ·重组质粒在大肠杆菌中的诱导表达及SDS-PAGE分析 | 第57-58页 |
| 2 结果与分析 | 第58-61页 |
| ·不结球白菜APX基因RT-PCR扩增 | 第58-60页 |
| ·原核表达载体PGEX4T-3-APX的构建及其鉴定 | 第60页 |
| ·原核表达产物的检测 | 第60-61页 |
| 3 讨论 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-63页 |
| 全文结论 | 第63-65页 |
| 论文发表情况 | 第65-67页 |
| 致谢 | 第67页 |