| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-18页 |
| 1 细菌原生质体制备 | 第10-12页 |
| ·菌龄对细菌原生质体制备的影响 | 第10-11页 |
| ·溶菌酶对细菌原生质体制备的影响 | 第11-12页 |
| ·预处理方式对细菌原生质体制备的影响 | 第12页 |
| ·渗透压稳定剂对细菌原生质体制备的影响 | 第12页 |
| ·其他影响因素 | 第12页 |
| 2 细菌原生质体融合 | 第12-13页 |
| 3 细菌原生质体融合及融合后再生 | 第13-15页 |
| ·亲本菌株标记的筛选 | 第13-14页 |
| ·细菌原生质体再生的影响因素 | 第14页 |
| ·融合子的筛选、检出及稳定性培养 | 第14-15页 |
| 4 微生物原生质体融合的应用及细菌原生质体融合与其他微生物原生质体融合的区别 | 第15-16页 |
| 5 原生质体融合技术在兽医科学领域的展望 | 第16页 |
| 6 鸭源大肠杆菌病及多杀性巴氏杆菌病疫苗的研究 | 第16-18页 |
| 第二章 亲本菌株耐药标记的筛选 | 第18-27页 |
| 1 试材料验 | 第18-19页 |
| ·供试菌株 | 第18页 |
| ·主要试剂 | 第18-19页 |
| ·主要培养基 | 第19页 |
| ·主要仪器 | 第19页 |
| 2 方法 | 第19-21页 |
| ·鸭源大肠杆菌耐药标记筛选 | 第19-20页 |
| ·鸭源大肠杆菌纯化培养 | 第19页 |
| ·鸭源大肠杆菌药物敏感测定 | 第19-20页 |
| ·鸭源大肠杆菌最低药物抑菌浓度(MIC)测定 | 第20页 |
| ·多杀性巴氏杆菌耐药标记筛选 | 第20-21页 |
| ·多杀性巴氏杆菌纯化培养 | 第20页 |
| ·多杀性巴氏杆菌药物敏感实验 | 第20-21页 |
| ·多杀性巴氏杆菌最低药物抑菌浓度测定 | 第21页 |
| ·耐药菌株药物浓度应用试验 | 第21页 |
| 3 结果 | 第21-24页 |
| ·亲本菌株ZYD_2、YB_2药敏试验结果 | 第21-23页 |
| ·亲本菌株ZYD_2和YB_2的新霉素MIC测定结果 | 第23-24页 |
| ·YB_2的MIC测定结果 | 第23页 |
| ·ZYD_2的MIC测定结果 | 第23-24页 |
| ·亲本菌株药物浓度应用试验 | 第24页 |
| 4 讨论 | 第24-27页 |
| 第三章 鸭源大肠杆菌和多杀性巴氏杆菌的原生质体融合 | 第27-38页 |
| 1 实验材料 | 第27-29页 |
| ·供试菌株 | 第27页 |
| ·主要试剂 | 第27页 |
| ·培养基 | 第27-28页 |
| ·普通琼脂培养基 | 第27-28页 |
| ·琼脂培养基 | 第28页 |
| ·高渗再生培养基 | 第28页 |
| ·麦康凯选择性培养基 | 第28页 |
| ·溶液配制 | 第28页 |
| ·主要仪器 | 第28-29页 |
| 2 方法 | 第29-31页 |
| ·亲本菌株生长曲线测定 | 第29页 |
| ·不同时间段亲本菌株培养物OD值测定 | 第29页 |
| ·亲本菌株活菌计数 | 第29页 |
| ·多杀性巴氏杆菌原生质体制备与再生 | 第29-30页 |
| ·YB_2原生质体制备 | 第29-30页 |
| ·YB_2原生质体再生 | 第30页 |
| ·大肠杆菌原生质体的制备与再生 | 第30-31页 |
| ·ZYD_2原生质体的制备 | 第30页 |
| ·ZYD_2原生质体再生 | 第30-31页 |
| ·原生质体制备率和再生率的计算公式 | 第31页 |
| ·原生质体融合及融合菌株的筛选 | 第31页 |
| ·融合菌株稳定性试验及表型鉴定 | 第31页 |
| 3 结果 | 第31-35页 |
| ·亲本菌株生长曲线 | 第31-32页 |
| ·原生质体制备条件筛选 | 第32-33页 |
| ·融合菌株培养特性、菌落形态、菌体形态及生化鉴定 | 第33-35页 |
| 4 讨论 | 第35-38页 |
| 第四章 融合菌株双重PCR的检测 | 第38-44页 |
| 1 实验材料 | 第38-40页 |
| ·供试菌株 | 第38页 |
| ·主要试剂和培养基 | 第38-39页 |
| ·主要仪器 | 第39-40页 |
| 2 方法 | 第40-42页 |
| ·融合菌株DNA基因组的抽提 | 第40页 |
| ·双重PCR的检测 | 第40页 |
| ·目的片段的纯化与克隆 | 第40-42页 |
| ·目的片段的纯化 | 第40-41页 |
| ·产物与pGM-T载体连接 | 第41页 |
| ·连接产物的转化 | 第41-42页 |
| ·目的片段测序 | 第42页 |
| 3 结果 | 第42-43页 |
| ·融合菌株双重PCR检测 | 第42-43页 |
| ·双重PCR产物测序及比对结果 | 第43页 |
| 4 讨论 | 第43-44页 |
| 第五章 微量凝集试验检测免疫鸭外周血抗体水平 | 第44-52页 |
| 1 实验材料 | 第44-45页 |
| ·供试菌株 | 第44页 |
| ·主要试剂 | 第44页 |
| ·培养基 | 第44页 |
| ·主要器材 | 第44-45页 |
| 2 方法 | 第45-47页 |
| ·融合菌株疫苗制备 | 第45页 |
| ·蜂胶佐剂制备 | 第45页 |
| ·抗原制备及灭活 | 第45页 |
| ·融合菌株疫苗制备 | 第45页 |
| ·血清制备 | 第45-46页 |
| ·阳性血清和阴性血清制备 | 第45-46页 |
| ·待检血清制备 | 第46页 |
| ·微量凝集试验抗原制备 | 第46页 |
| ·最佳反应条件的确定 | 第46-47页 |
| 3 结果 | 第47-50页 |
| ·最佳反应条件 | 第47-48页 |
| ·外周血抗体水平 | 第48-50页 |
| 4 讨论 | 第50-52页 |
| 第六章 结论 | 第52-54页 |
| 参考文献 | 第54-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 发表论文情况 | 第60页 |
