| 中文摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-24页 |
| 1 生长素、生长素响应基因、启动子及元件 | 第11-16页 |
| ·生长素 | 第11-13页 |
| ·生长素响应基因 | 第13-15页 |
| ·Aux/IAA基因家族 | 第14页 |
| ·SAUR基因家族 | 第14-15页 |
| ·GH3基因家族 | 第15页 |
| ·生长素响应基因启动子和元件 | 第15-16页 |
| 2 生长素的极性运输及对植物发育及器官形态模式的作用 | 第16-20页 |
| ·花器官、雌蕊发育及模式建成 | 第17-20页 |
| 3 生长素输出载体PIN蛋白家族 | 第20-21页 |
| 4 本研究的目的与意义 | 第21-24页 |
| 第二章 植物生长素响应特异启动子DR5的设计及报告载体的构建 | 第24-37页 |
| 1 材料与试剂 | 第24页 |
| ·菌株与质粒 | 第24页 |
| ·酶与试剂盒 | 第24页 |
| 2 实验方法 | 第24-30页 |
| ·生长素特异响应启动子DR5的设计 | 第24-25页 |
| ·引物设计 | 第25页 |
| ·生长素响应特异报告载体pBI121-DR5::GFP的构建及检测 | 第25-30页 |
| ·pBI121-GFP载体的构建及检测 | 第25-29页 |
| ·pBI121-DR5::GFP载体的构建及检测 | 第29-30页 |
| 3 结果与分析 | 第30-35页 |
| ·生长素响应特异启动子DR5的合成结果 | 第30页 |
| ·生长素响应特异报告载体pB1121-DR5::GFP的构建及检测 | 第30-35页 |
| ·pBI121-GFP载体的构建 | 第31-34页 |
| (1) 绿色荧光蛋白基因GFP扩增结果 | 第31-32页 |
| (2) 绿色荧光蛋白基因GFP和pBI121载体的双酶切结果 | 第32-33页 |
| (3) 载体pBI121-GFP菌落PCR结果 | 第33页 |
| (4) 载体pBI121-GFP双酶切检测结果 | 第33-34页 |
| ·pBI121-DR5::GFP的构建 | 第34-35页 |
| (1) 载体pBI121-GFP和pUC19-DR5的双酶切结果 | 第34页 |
| (2) 载体pBI121-DR5::GFP菌落PCR及酶切检测结果 | 第34-35页 |
| 4 讨论 | 第35-37页 |
| 第三章 植物生长素报告载体转化荠菜 | 第37-45页 |
| 1 材料与试剂 | 第37-38页 |
| ·菌株与质粒 | 第37页 |
| ·培养基 | 第37页 |
| ·植物材料及植物培养基 | 第37页 |
| ·酶、试剂与试剂盒 | 第37-38页 |
| 2 实验方法 | 第38-40页 |
| ·植物表达载体pBI121-DR5::GFP转化根癌农杆菌 | 第38-39页 |
| ·农杆菌GV3101感受态细胞的制备 | 第38页 |
| ·农杆菌GV3101感受态细胞的转化 | 第38页 |
| ·农杆菌GV3101菌落PCR检测 | 第38-39页 |
| ·农杆菌侵染转化野生型荠菜 | 第39-40页 |
| ·转基因荠菜荧光显微观察 | 第40页 |
| 3 结果与分析 | 第40-43页 |
| ·pBI121-DR5::GFP转化农杆菌GV3101菌落PCR检测 | 第40页 |
| ·转基因荠菜鉴定 | 第40-43页 |
| ·转基因荠菜卡那霉素筛选 | 第40-41页 |
| ·转基因荠菜分子检测 | 第41页 |
| ·转基因荠菜GFP荧光显微观察结果 | 第41-43页 |
| 4 讨论 | 第43-45页 |
| ·荠菜遗传转化方法的分析 | 第43页 |
| ·荠菜遗传转化过程中畸形心皮分析 | 第43-44页 |
| ·荠菜种子发芽效率及筛选培养基分析 | 第44-45页 |
| 第四章 荠菜生长素输出载体PIN3蛋白基因cDNA的克隆 | 第45-59页 |
| 1 材料与试剂 | 第45-46页 |
| ·植物材料 | 第45页 |
| ·菌株与质粒 | 第45页 |
| ·酶、试剂与试剂盒 | 第45页 |
| ·试剂 | 第45-46页 |
| 2 实验方法 | 第46-49页 |
| ·荠菜总RNA的提取及质量检测 | 第46页 |
| ·荠菜花蕾总RNA的抽提 | 第46页 |
| ·RNA质量检测 | 第46页 |
| ·RT-PCR扩增荠菜PIN3基因 | 第46-49页 |
| ·引物设计 | 第46-47页 |
| ·荠菜cDNA第一链的合成 | 第47页 |
| ·荠菜PIN3蛋白基因PCR扩增 | 第47-48页 |
| ·将回收的目的基因片段克隆到pMD18-T Vector上 | 第48页 |
| ·目的基因的检测 | 第48-49页 |
| (1) 菌落PCR检测 | 第48-49页 |
| (2) 双酶切检测 | 第49页 |
| 3 实验结果与分析 | 第49-57页 |
| ·荠菜花蕾总RNA提取 | 第49页 |
| ·荠菜PIN3蛋白基因PCR扩增 | 第49-50页 |
| ·荠菜PIN3蛋白基因鉴定 | 第50-51页 |
| ·荠菜PIN3蛋白基因及蛋白序列分析 | 第51-57页 |
| ·荠菜PIN3蛋白质等电点及分子量预测 | 第53-54页 |
| ·荠菜PIN3蛋白质跨膜区的预测分析 | 第54-55页 |
| ·荠菜PIN3蛋白质信号肽切割位点预测分析 | 第55页 |
| ·荠菜PIN3成熟蛋白二级结构的预测分析 | 第55-56页 |
| ·荠菜PIN3蛋白与拟南芥PIN蛋白家族比较分析 | 第56-57页 |
| 4 讨论 | 第57-59页 |
| 第五章 结论与展望 | 第59-61页 |
| 1 结论 | 第59页 |
| 2 展望 | 第59-61页 |
| 参考文献 | 第61-66页 |
| 附录A: DR5启动子合成报告单 | 第66-68页 |
| 附录B: 荠菜PIN3基因测序报 | 第68-71页 |
| 附录C: 缩略词表 | 第71-72页 |
| 附录D: 主要试剂配置 | 第72-74页 |
| 附录E: 载体图谱 | 第74-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |
| 作者简介 | 第76页 |
