| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 1 引言 | 第12-28页 |
| ·动物细胞表达抗体介绍 | 第12-14页 |
| ·动物细胞表达抗体发展 | 第12页 |
| ·CHO细胞表达系统 | 第12-14页 |
| ·动物细胞无血清培养研究进展 | 第14-17页 |
| ·无血清培养基概述 | 第14-15页 |
| ·无血清培养基发展 | 第15页 |
| ·无血清培养基组成 | 第15-17页 |
| ·生物反应器大规模培养研究进展 | 第17-25页 |
| ·CHO细胞培养方式 | 第17-20页 |
| ·CHO细胞代谢特征 | 第20-22页 |
| ·CHO细胞培养过程参数控制 | 第22-23页 |
| ·CHO细胞表达能力提高策略 | 第23-25页 |
| ·培养基优化方法 | 第25-26页 |
| ·Plackett-Burman设计法 | 第25页 |
| ·部分因子设计法和最速上升法 | 第25-26页 |
| ·响应面优化法 | 第26页 |
| ·TNFR-Fc抗体融合蛋白简介 | 第26-27页 |
| ·研究目的、意义及内容 | 第27-28页 |
| ·研究目的及意义 | 第27页 |
| ·研究内容 | 第27-28页 |
| 2 实验材料与仪器 | 第28-32页 |
| ·细胞株 | 第28-30页 |
| ·细胞培养基 | 第30页 |
| ·细胞培养添加成分 | 第30页 |
| ·主要试剂 | 第30页 |
| ·主要仪器 | 第30-32页 |
| 3 实验方法 | 第32-40页 |
| ·摇瓶中的细胞培养 | 第32页 |
| ·细胞冻存与复苏 | 第32页 |
| ·无血清培养基优化 | 第32-35页 |
| ·Plackett-Burman设计筛选主要影响因子 | 第32-33页 |
| ·中心组合试验优化重要的营养物质 | 第33-34页 |
| ·统计分析 | 第34-35页 |
| ·生物反应器中细胞培养 | 第35-36页 |
| ·生物反应器的批式培养 | 第35页 |
| ·生物反应器的流加培养 | 第35-36页 |
| ·流加培养基和流加工艺 | 第36页 |
| ·测定和分析方法 | 第36-40页 |
| ·细胞密度及活性检测 | 第36-37页 |
| ·氨基酸分析 | 第37页 |
| ·TNFR-Fc含量测定 | 第37-38页 |
| ·生化分析 | 第38页 |
| ·唾液酸含量测定 | 第38-40页 |
| 4 结果与分析 | 第40-63页 |
| ·CHO-GS细胞无血清培养基的设计 | 第40-51页 |
| ·基础SFM配方 | 第40-41页 |
| ·氨基酸浓度优化 | 第41-43页 |
| ·Plackett-Burman筛选主要影响因子 | 第43-46页 |
| ·铁对细胞生长与表达的影响 | 第46页 |
| ·中心组合试验优化主要影响因子 | 第46-51页 |
| ·CHO-GS细胞在CHO-SFM与EX-CELL~(TM) 302中的摇瓶培养 | 第51-53页 |
| ·细胞生长和蛋白表达 | 第51-52页 |
| ·TNFR-Fc的唾液酸含量 | 第52-53页 |
| ·细胞在CHO-SFM中的适应性及稳定性 | 第53-54页 |
| ·生物反应器的细胞培养 | 第54-63页 |
| ·生物反应器的批式培养 | 第54-58页 |
| ·生物反应器的流加培养 | 第58-63页 |
| 5 讨论 | 第63-64页 |
| ·MTT计数法 | 第63页 |
| ·生物反应器的流加培养 | 第63页 |
| ·展望 | 第63-64页 |
| 6 结论 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-73页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第73页 |