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三种食源性致病菌的LAMP检测方法研究

致谢第1-8页
摘要第8-10页
Abstract第10-16页
图清单第16-19页
附表清单第19-20页
1 绪论第20-34页
   ·阪崎肠杆菌第20-21页
     ·阪崎肠杆菌的生物学特性第20页
     ·阪崎肠杆菌毒力、耐热性和污染来源第20-21页
   ·阪崎肠杆菌的检测方法研究现状第21-23页
     ·阪崎肠杆菌传统检测方法第21-22页
     ·阪崎肠杆菌分子检测方法第22-23页
   ·单增李斯特菌第23-25页
     ·单增李斯特菌分类第23页
     ·单增李斯特菌生物学特征第23页
     ·单增李斯特菌的毒力因子第23-24页
     ·单增李斯特菌流行病学第24-25页
   ·单增李斯特菌检测方法研究现状第25-26页
     ·传统分离鉴定方法第25页
     ·免疫学检测方法第25页
     ·分子生物学检测方法第25-26页
   ·志贺氏菌第26-28页
     ·志贺氏菌分类第26页
     ·志贺氏菌生物学特征第26页
     ·志贺氏菌的毒力相关基因第26-27页
     ·志贺氏菌流行病学第27页
     ·常规生化检测方法第27页
     ·免疫学方法第27页
     ·分子生物学检测方法第27-28页
   ·环介导等温扩增(LAMP)技术第28-32页
     ·LAMP法的概述和扩增原理第28-29页
     ·LAMP法的特点第29-30页
     ·LAMP法的引物设计[89]第30-31页
     ·LAMP法的反应体系第31页
     ·LAMP反应产物的检测第31-32页
     ·LAMP法的应用第32页
   ·荧光定量PCR技术及应用第32-33页
     ·荧光定量PCR技术第32-33页
     ·荧光定量PCR技术的应用第33页
   ·本文研究内容与意义第33-34页
     ·本论文研究内容第33-34页
     ·本论文研究意义第34页
2 材料与方法第34-44页
   ·试验材料第34-36页
     ·菌株第34-35页
     ·培养基第35页
     ·仪器设备第35页
     ·生化试剂与样品第35-36页
   ·试验方法第36-44页
     ·菌种的培养第36页
     ·细菌DNA模板的提取第36-37页
     ·三个菌的LAMP引物和PCR引物设计第37-39页
     ·目的基因核心片段的PCR扩增第39页
     ·PCR产物切胶回收纯化第39-40页
     ·标准质粒的构建第40-41页
     ·荧光定量PCR检测方法的建立第41-42页
     ·LAMP反应体系的建立第42页
     ·LAMP反应结果的判断第42页
     ·LAMP反应条件的优化第42-43页
     ·LAMP引物特异性试验第43页
     ·LAMP灵敏度试验第43页
     ·模拟食样LAMP与荧光定量PCR检测方法灵敏度比对试验第43页
     ·模拟食样LAMP与荧光定量PCR检测方法特异性比对试验第43页
     ·实际样品检测第43-44页
3 结果与分析第44-69页
   ·目的基因核心片段标准质粒的构建与鉴定第44-45页
     ·目的基因标准质粒电泳鉴定第44页
     ·标准质粒测序鉴定第44-45页
   ·食品中阪崎肠杆菌LAMP现场快速检测技术的建立第45-56页
     ·阪崎肠杆菌LAMP反应引物设计与筛选第45-47页
     ·高效阪崎肠杆菌LAMP检测方法的建立第47-50页
     ·阪崎肠杆菌LAMP检测方法的特异性与灵敏度分析第50-52页
     ·阪崎肠杆菌LAMP检测目测方法研究第52-53页
     ·模拟食样LAMP与荧光定量PCR检测方法比对试验第53-55页
     ·实际样品中阪崎肠杆菌的检测第55-56页
     ·小结第56页
   ·食品中单增李斯特菌LAMP现场快速检测技术的建立第56-62页
     ·单增李斯特菌LAMP最适反应温度的确定第56-57页
     ·单增李斯特菌LAMP检测方法特异性分析第57页
     ·单增李斯特菌LAMP检测方法灵敏度分析第57-58页
     ·单增李斯特菌LAMP检测目测方法研究第58-59页
     ·模拟食样中单增李斯特菌LAMP与荧光定量PCR方法检测特异性比对试验第59-60页
     ·模拟食样中单增李斯特菌LAMP与荧光定量PCR方法检测灵敏度比对试验第60-61页
     ·实际样品中单增李斯特菌的检测第61-62页
     ·小结第62页
   ·食品中志贺氏菌LAMP现场快速检测技术的建立第62-69页
     ·志贺氏菌LAMP最适反应温度的确定第62-63页
     ·志贺氏菌LAMP检测方法特异性分析第63页
     ·志贺氏菌LAMP检测方法灵敏度分析第63-64页
     ·志贺氏菌LAMP检测目测方法研究第64-65页
     ·模拟食样中志贺氏菌LAMP与荧光定量PCR方法检测特异性比对试验第65-66页
     ·模拟食样中志贺氏菌LAMP与荧光定量PCR方法检测灵敏度比对试验第66-67页
     ·实际样品中志贺氏菌的检测第67-68页
     ·小结第68-69页
4 讨论第69-70页
   ·靶基因的选择第69页
   ·LAMP反应中的影响因素第69页
     ·LAMP引物的设计第69页
     ·模板DNA质量第69页
     ·甜菜碱第69页
   ·LAMP检测的污染防控第69-70页
5 结论、创新点与展望第70-72页
   ·结论第70-71页
   ·创新点第71页
   ·展望第71-72页
参考文献第72-78页
作者简历第78页

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