致谢 | 第1-8页 |
摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-16页 |
图清单 | 第16-19页 |
附表清单 | 第19-20页 |
1 绪论 | 第20-34页 |
·阪崎肠杆菌 | 第20-21页 |
·阪崎肠杆菌的生物学特性 | 第20页 |
·阪崎肠杆菌毒力、耐热性和污染来源 | 第20-21页 |
·阪崎肠杆菌的检测方法研究现状 | 第21-23页 |
·阪崎肠杆菌传统检测方法 | 第21-22页 |
·阪崎肠杆菌分子检测方法 | 第22-23页 |
·单增李斯特菌 | 第23-25页 |
·单增李斯特菌分类 | 第23页 |
·单增李斯特菌生物学特征 | 第23页 |
·单增李斯特菌的毒力因子 | 第23-24页 |
·单增李斯特菌流行病学 | 第24-25页 |
·单增李斯特菌检测方法研究现状 | 第25-26页 |
·传统分离鉴定方法 | 第25页 |
·免疫学检测方法 | 第25页 |
·分子生物学检测方法 | 第25-26页 |
·志贺氏菌 | 第26-28页 |
·志贺氏菌分类 | 第26页 |
·志贺氏菌生物学特征 | 第26页 |
·志贺氏菌的毒力相关基因 | 第26-27页 |
·志贺氏菌流行病学 | 第27页 |
·常规生化检测方法 | 第27页 |
·免疫学方法 | 第27页 |
·分子生物学检测方法 | 第27-28页 |
·环介导等温扩增(LAMP)技术 | 第28-32页 |
·LAMP法的概述和扩增原理 | 第28-29页 |
·LAMP法的特点 | 第29-30页 |
·LAMP法的引物设计[89] | 第30-31页 |
·LAMP法的反应体系 | 第31页 |
·LAMP反应产物的检测 | 第31-32页 |
·LAMP法的应用 | 第32页 |
·荧光定量PCR技术及应用 | 第32-33页 |
·荧光定量PCR技术 | 第32-33页 |
·荧光定量PCR技术的应用 | 第33页 |
·本文研究内容与意义 | 第33-34页 |
·本论文研究内容 | 第33-34页 |
·本论文研究意义 | 第34页 |
2 材料与方法 | 第34-44页 |
·试验材料 | 第34-36页 |
·菌株 | 第34-35页 |
·培养基 | 第35页 |
·仪器设备 | 第35页 |
·生化试剂与样品 | 第35-36页 |
·试验方法 | 第36-44页 |
·菌种的培养 | 第36页 |
·细菌DNA模板的提取 | 第36-37页 |
·三个菌的LAMP引物和PCR引物设计 | 第37-39页 |
·目的基因核心片段的PCR扩增 | 第39页 |
·PCR产物切胶回收纯化 | 第39-40页 |
·标准质粒的构建 | 第40-41页 |
·荧光定量PCR检测方法的建立 | 第41-42页 |
·LAMP反应体系的建立 | 第42页 |
·LAMP反应结果的判断 | 第42页 |
·LAMP反应条件的优化 | 第42-43页 |
·LAMP引物特异性试验 | 第43页 |
·LAMP灵敏度试验 | 第43页 |
·模拟食样LAMP与荧光定量PCR检测方法灵敏度比对试验 | 第43页 |
·模拟食样LAMP与荧光定量PCR检测方法特异性比对试验 | 第43页 |
·实际样品检测 | 第43-44页 |
3 结果与分析 | 第44-69页 |
·目的基因核心片段标准质粒的构建与鉴定 | 第44-45页 |
·目的基因标准质粒电泳鉴定 | 第44页 |
·标准质粒测序鉴定 | 第44-45页 |
·食品中阪崎肠杆菌LAMP现场快速检测技术的建立 | 第45-56页 |
·阪崎肠杆菌LAMP反应引物设计与筛选 | 第45-47页 |
·高效阪崎肠杆菌LAMP检测方法的建立 | 第47-50页 |
·阪崎肠杆菌LAMP检测方法的特异性与灵敏度分析 | 第50-52页 |
·阪崎肠杆菌LAMP检测目测方法研究 | 第52-53页 |
·模拟食样LAMP与荧光定量PCR检测方法比对试验 | 第53-55页 |
·实际样品中阪崎肠杆菌的检测 | 第55-56页 |
·小结 | 第56页 |
·食品中单增李斯特菌LAMP现场快速检测技术的建立 | 第56-62页 |
·单增李斯特菌LAMP最适反应温度的确定 | 第56-57页 |
·单增李斯特菌LAMP检测方法特异性分析 | 第57页 |
·单增李斯特菌LAMP检测方法灵敏度分析 | 第57-58页 |
·单增李斯特菌LAMP检测目测方法研究 | 第58-59页 |
·模拟食样中单增李斯特菌LAMP与荧光定量PCR方法检测特异性比对试验 | 第59-60页 |
·模拟食样中单增李斯特菌LAMP与荧光定量PCR方法检测灵敏度比对试验 | 第60-61页 |
·实际样品中单增李斯特菌的检测 | 第61-62页 |
·小结 | 第62页 |
·食品中志贺氏菌LAMP现场快速检测技术的建立 | 第62-69页 |
·志贺氏菌LAMP最适反应温度的确定 | 第62-63页 |
·志贺氏菌LAMP检测方法特异性分析 | 第63页 |
·志贺氏菌LAMP检测方法灵敏度分析 | 第63-64页 |
·志贺氏菌LAMP检测目测方法研究 | 第64-65页 |
·模拟食样中志贺氏菌LAMP与荧光定量PCR方法检测特异性比对试验 | 第65-66页 |
·模拟食样中志贺氏菌LAMP与荧光定量PCR方法检测灵敏度比对试验 | 第66-67页 |
·实际样品中志贺氏菌的检测 | 第67-68页 |
·小结 | 第68-69页 |
4 讨论 | 第69-70页 |
·靶基因的选择 | 第69页 |
·LAMP反应中的影响因素 | 第69页 |
·LAMP引物的设计 | 第69页 |
·模板DNA质量 | 第69页 |
·甜菜碱 | 第69页 |
·LAMP检测的污染防控 | 第69-70页 |
5 结论、创新点与展望 | 第70-72页 |
·结论 | 第70-71页 |
·创新点 | 第71页 |
·展望 | 第71-72页 |
参考文献 | 第72-78页 |
作者简历 | 第78页 |