| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-11页 |
| 文献综述 | 第11-23页 |
| 第一章 猪瘟病毒NS2 蛋白研究进展 | 第11-15页 |
| ·NS2 蛋白与猪瘟病毒非致细胞病变型型向致细胞病变型转化 | 第12-13页 |
| ·猪瘟病毒NS2 蛋白酶作用以及切割NS2-3 复合体 | 第13-14页 |
| ·NS2 蛋白特性与宿主细胞相互作用研究 | 第14-15页 |
| 第二章 酵母双杂交系统及发展应用 | 第15-23页 |
| ·酵母双杂交系统的理论甚础 | 第15-16页 |
| ·酵母双杂交系统的改进与发展 | 第16-19页 |
| ·酵母双杂交技术的应用 | 第19-21页 |
| ·酵母双杂交系统的优点与局限性 | 第21页 |
| ·酵母双杂交系统优点 | 第21页 |
| ·酵母双杂技系统缺点 | 第21页 |
| ·酵母双杂交技术前景展望 | 第21-23页 |
| 试验研究 | 第23-46页 |
| 第三章 诱饵载体pGBKT7-NS2-C360 的构建及鉴定 | 第23-31页 |
| ·材料 | 第23-25页 |
| ·菌株和质粒 | 第23页 |
| ·试剂及试剂盒 | 第23页 |
| ·培养基及其配制 | 第23-24页 |
| ·主要仪器设备 | 第24-25页 |
| ·方法 | 第25-27页 |
| ·诱饵载体pGBKT7-NS2-C360 的构建 | 第25-26页 |
| ·重组质粒pGBKT7-NS2-C360 对酵母细胞毒性以及自激活性的检测 | 第26-27页 |
| ·结果 | 第27-29页 |
| ·PCR 扩增NS2-C360 目的基因 | 第27-28页 |
| ·诱饵质粒pGBKT7-NS2-C360 的酶切分析和PCR 鉴定 | 第28页 |
| ·酵母菌落PCR 鉴定 | 第28-29页 |
| ·诱饵蛋白自激活与毒性检测 | 第29页 |
| ·讨论 | 第29-30页 |
| ·小结 | 第30-31页 |
| 第四章 猪血管内皮细胞双链cDNA 的制备 | 第31-36页 |
| ·材料 | 第31页 |
| ·细胞 | 第31页 |
| ·试剂与试剂盒 | 第31页 |
| ·仪器设备 | 第31页 |
| ·方法 | 第31-33页 |
| ·猪血管内皮细胞的复苏与培养 | 第31页 |
| ·细胞总RNA 的提取与纯度分析 | 第31-32页 |
| ·第一链cDNA 合成 | 第32页 |
| ·长距离PCR（LD-PCR）扩增dsDNA | 第32-33页 |
| ·dsDNA 产物的纯化 | 第33页 |
| ·结果 | 第33-34页 |
| ·总RNA 的提取 | 第33-34页 |
| ·cDNA 的合成与纯化 | 第34页 |
| ·讨论 | 第34-35页 |
| ·小结 | 第35-36页 |
| 第五章 酵母双杂交筛选与CSFV NS2 蛋白相互作用的蛋白 | 第36-46页 |
| ·材料 | 第36-37页 |
| ·菌株、质粒 | 第36页 |
| ·试剂及试剂盒 | 第36页 |
| ·培养基及配制 | 第36-37页 |
| ·仪器 | 第37页 |
| ·方法 | 第37-40页 |
| ·pGBKT7-NS2-C360，pGADT7-Rec，双链cDNA 共转化AH109 | 第37-38页 |
| ·对照菌株的转化 | 第38-39页 |
| ·阳性菌落的筛选与鉴定 | 第39-40页 |
| ·文库质粒的解救与测序 | 第40页 |
| ·结果 | 第40-43页 |
| ·共转化结果 | 第40-41页 |
| ·阳性克隆筛选结果 | 第41页 |
| ·阳性克隆的鉴定 | 第41-42页 |
| ·测序结果 | 第42-43页 |
| ·讨论 | 第43-45页 |
| ·小结 | 第45-46页 |
| 结论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-52页 |
| 附录 | 第52-55页 |
| 缩略词 | 第55-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 作者简介 | 第58页 |
