摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-11页 |
文献综述 | 第11-25页 |
第一章 IL-1β研究进展 | 第11-25页 |
·IL-1 的发现及IL-1 家族简介 | 第11-13页 |
·IL-1 家族 | 第11-12页 |
·IL-1 受体家族 | 第12-13页 |
·IL-1β的产生、加工、释放 | 第13-14页 |
·IL-1β生物学特性 | 第14-17页 |
·IL-1 在神经、新陈代谢、内分泌方面的作用 | 第14-15页 |
·IL-1 可诱导多种细胞因子产生 | 第15页 |
·IL-1 对血管内皮细胞、平滑肌细胞的作用 | 第15页 |
·IL-1 参与诱导炎症 | 第15-16页 |
·IL-1 对天然免疫细胞的作用 | 第16页 |
·IL-1 对获得性免疫细胞的作用 | 第16-17页 |
·IL-1β相关疾病 | 第17-25页 |
·白血病 | 第17-18页 |
·过敏 | 第18-19页 |
·自身炎症性疾病 | 第19-20页 |
·自身免疫性疾病 | 第20页 |
·动脉粥样硬化 | 第20-21页 |
·肿瘤 | 第21页 |
·IL-1 与感染 | 第21-25页 |
试验研究 | 第25-51页 |
第二章 奶山羊IL-1β的克隆及原核表达 | 第25-42页 |
·材料 | 第25-28页 |
·实验动物 | 第25页 |
·菌株、载体 | 第25页 |
·主要试剂 | 第25页 |
·主要仪器 | 第25-26页 |
·主要溶液及配方 | 第26-28页 |
·方法 | 第28-35页 |
·CaIL-1β的基因克隆 | 第28-30页 |
·克隆载体pGEM-T- CaIL-1β的构建 | 第30-32页 |
·表达载体pET32a-CaIL-1β的构建 | 第32页 |
·重组质粒pET32a-CaIL-1β的诱导表达及表达条件的优化 | 第32-33页 |
·表达产物存在形式的检测 | 第33页 |
·表达产物的纯化 | 第33-34页 |
·表达产物的Wenstern blot 检测 | 第34页 |
·活性检测 | 第34-35页 |
·结果与分析 | 第35-40页 |
·RT-PCR 结果 | 第35页 |
·重组质粒pGEM-T- CaIL-1β的鉴定 | 第35-37页 |
·重组表达载体pET32a-CaIL-1β的鉴定 | 第37页 |
·表达条件的优化 | 第37-38页 |
·表达蛋白存在形式的检测 | 第38页 |
·表达产物的纯化 | 第38-39页 |
·目的蛋白的Western blot 检测 | 第39页 |
·原核表达CaIL-1β活性检测 | 第39-40页 |
·讨论 | 第40-41页 |
·小结 | 第41-42页 |
第三章 奶山羊IL-1β在Sf9 细胞中的表达 | 第42-51页 |
·材料 | 第42-43页 |
·菌株、载体、细胞系 | 第42页 |
·主要试剂 | 第42页 |
·主要仪器 | 第42页 |
·主要溶液及配方 | 第42-43页 |
·方法 | 第43-47页 |
·引物的设计与合成 | 第43页 |
·奶山羊IL-1β的扩增 | 第43页 |
·重组转移载体pFastBac-HTb-CaIL-1β的构建 | 第43-45页 |
·重组杆状病毒穿梭载体Bacmid-CaIL-1β的构建 | 第45-47页 |
·重组杆状病毒reBac-CaIL-1β的制备 | 第47页 |
·重组蛋白在Sf9 细胞中的表达及Wenstern blot 检测 | 第47页 |
·结果与分析 | 第47-49页 |
·CaIL-1β的扩增 | 第47页 |
·重组转移载体pFastBac-HTb-CaIL-1β的鉴定 | 第47-48页 |
·重组杆状病毒穿梭载体 Bacmid-CaIL-1β的鉴定 | 第48页 |
·Bacmid-CaIL-1β转染Sf9 细胞结果 | 第48-49页 |
·CaIL-1β在Sf9 细胞上的表达 | 第49页 |
·讨论 | 第49-50页 |
·小结 | 第50-51页 |
结论 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-60页 |
附录 | 第60-63页 |
致谢 | 第63-64页 |
作者简介 | 第64页 |