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奶山羊IL-1β基因的克隆表达

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-11页
文献综述第11-25页
 第一章 IL-1β研究进展第11-25页
   ·IL-1 的发现及IL-1 家族简介第11-13页
     ·IL-1 家族第11-12页
     ·IL-1 受体家族第12-13页
   ·IL-1β的产生、加工、释放第13-14页
   ·IL-1β生物学特性第14-17页
     ·IL-1 在神经、新陈代谢、内分泌方面的作用第14-15页
     ·IL-1 可诱导多种细胞因子产生第15页
     ·IL-1 对血管内皮细胞、平滑肌细胞的作用第15页
     ·IL-1 参与诱导炎症第15-16页
     ·IL-1 对天然免疫细胞的作用第16页
     ·IL-1 对获得性免疫细胞的作用第16-17页
   ·IL-1β相关疾病第17-25页
     ·白血病第17-18页
     ·过敏第18-19页
     ·自身炎症性疾病第19-20页
     ·自身免疫性疾病第20页
     ·动脉粥样硬化第20-21页
     ·肿瘤第21页
     ·IL-1 与感染第21-25页
试验研究第25-51页
 第二章 奶山羊IL-1β的克隆及原核表达第25-42页
   ·材料第25-28页
     ·实验动物第25页
     ·菌株、载体第25页
     ·主要试剂第25页
     ·主要仪器第25-26页
     ·主要溶液及配方第26-28页
   ·方法第28-35页
     ·CaIL-1β的基因克隆第28-30页
     ·克隆载体pGEM-T- CaIL-1β的构建第30-32页
     ·表达载体pET32a-CaIL-1β的构建第32页
     ·重组质粒pET32a-CaIL-1β的诱导表达及表达条件的优化第32-33页
     ·表达产物存在形式的检测第33页
     ·表达产物的纯化第33-34页
     ·表达产物的Wenstern blot 检测第34页
     ·活性检测第34-35页
   ·结果与分析第35-40页
     ·RT-PCR 结果第35页
     ·重组质粒pGEM-T- CaIL-1β的鉴定第35-37页
     ·重组表达载体pET32a-CaIL-1β的鉴定第37页
     ·表达条件的优化第37-38页
     ·表达蛋白存在形式的检测第38页
     ·表达产物的纯化第38-39页
     ·目的蛋白的Western blot 检测第39页
     ·原核表达CaIL-1β活性检测第39-40页
   ·讨论第40-41页
   ·小结第41-42页
 第三章 奶山羊IL-1β在Sf9 细胞中的表达第42-51页
   ·材料第42-43页
     ·菌株、载体、细胞系第42页
     ·主要试剂第42页
     ·主要仪器第42页
     ·主要溶液及配方第42-43页
   ·方法第43-47页
     ·引物的设计与合成第43页
     ·奶山羊IL-1β的扩增第43页
     ·重组转移载体pFastBac-HTb-CaIL-1β的构建第43-45页
     ·重组杆状病毒穿梭载体Bacmid-CaIL-1β的构建第45-47页
     ·重组杆状病毒reBac-CaIL-1β的制备第47页
     ·重组蛋白在Sf9 细胞中的表达及Wenstern blot 检测第47页
   ·结果与分析第47-49页
     ·CaIL-1β的扩增第47页
     ·重组转移载体pFastBac-HTb-CaIL-1β的鉴定第47-48页
     ·重组杆状病毒穿梭载体 Bacmid-CaIL-1β的鉴定第48页
     ·Bacmid-CaIL-1β转染Sf9 细胞结果第48-49页
     ·CaIL-1β在Sf9 细胞上的表达第49页
   ·讨论第49-50页
   ·小结第50-51页
结论第51-52页
参考文献第52-60页
附录第60-63页
致谢第63-64页
作者简介第64页

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