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中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)卵黄蛋白的生化性质及基因克隆

摘要第1-5页
Abstract第5-12页
第1章 绪论第12-32页
   ·研究目的第12-13页
   ·研究意义第13-14页
   ·研究进展第14-32页
     ·卵黄蛋白和卵黄蛋白原的性质研究进展第14-16页
     ·卵黄蛋白及卵黄蛋白原的产生部位第16-18页
       ·卵巢第16-17页
       ·肝胰腺第17页
       ·脂肪体第17页
       ·双重来源第17-18页
     ·卵黄蛋白与卵黄蛋白原的营养价值第18-20页
       ·营养价值第19页
       ·生理功能第19-20页
     ·卵黄蛋白免疫学研究第20-21页
     ·卵黄蛋白原基因分子克隆的研究进展第21-32页
       ·昆虫卵黄蛋白原基因克隆的研究进展第21-24页
       ·脊椎动物Vg基因研究进展第24-26页
       ·甲壳动物卵黄蛋白原基因分子克隆的研究进展第26-28页
       ·甲壳动物卵黄蛋白原基因的表达研究进展第28-32页
第2章 中国明对虾卵黄蛋白及卵黄蛋白原的纯化第32-43页
   ·引言第32页
   ·材料与方法第32-35页
     ·材料第32-33页
     ·仪器第33页
     ·方法第33-35页
       ·样品的制备第33页
       ·卵黄蛋白的鉴定第33-34页
       ·色谱法纯化卵黄蛋白第34页
       ·选择沉淀法和电洗脱法纯化卵黄蛋白第34页
       ·卵黄蛋白抗体的制备第34-35页
       ·中国明对虾血淋巴中卵黄蛋白原的鉴定第35页
       ·卵黄蛋白原的纯化第35页
   ·结果第35-37页
     ·卵黄蛋白的鉴定第35-36页
       ·对比电泳结果第35-36页
       ·脂蛋白染色第36页
     ·卵黄蛋白的提纯第36页
       ·凝胶过滤层析结果第36页
       ·离子交换柱层析结果第36页
       ·选择沉淀电泳结果第36页
       ·电洗脱结果第36页
     ·中国明对虾血淋巴中卵黄蛋白原的鉴定第36页
       ·免疫双扩散结果第36页
       ·对比电泳结果第36页
     ·卵黄蛋白原的提纯第36-37页
       ·卵黄蛋白原的阴离子交换柱层析纯化第36页
       ·卵黄蛋白原的选择沉淀纯化第36-37页
       ·卵黄蛋白原的电洗脱结果第37页
   ·讨论第37-43页
第3章 中国明对虾卵黄蛋白原与卵黄蛋白的部分生化性质第43-53页
   ·引言第43页
   ·材料与方法第43-45页
     ·材料第43页
     ·仪器第43-44页
     ·方法第44-45页
       ·糖蛋白染色第44页
       ·脂蛋白的染色第44页
       ·磷蛋白染色第44页
       ·总分子量测定第44页
       ·亚基数目以及分子量的测定第44-45页
       ·类胡萝卜素辅基检测第45页
       ·糖含量的测定第45页
       ·二硫键数目的测定第45页
       ·等电点的测定第45页
       ·卵黄蛋白原热稳定性检测第45页
   ·结果第45-46页
     ·糖蛋白染色第45页
     ·脂蛋白染色第45-46页
     ·磷蛋白染色第46页
     ·总分子量测定第46页
     ·亚基数目及分子量第46页
     ·类胡萝卜素检测第46页
     ·糖含量的测定第46页
     ·等电点测定第46页
     ·二硫键数目的测定第46页
     ·卵黄蛋白原热稳定性检测第46页
   ·讨论第46-53页
第4章 中国明对虾雌性蛋白在部分组织中的免疫观察第53-60页
   ·引言第53页
   ·材料与方法第53-54页
     ·材料第53-54页
     ·仪器第54页
     ·方法第54页
       ·免疫扩散法在对虾体内检测雌性蛋白第54页
       ·常规组织观察第54页
       ·免疫组织学观察(间接荧光免疫)第54页
   ·结果第54-56页
     ·免疫扩散法在对虾体内检测雌性蛋白第54-55页
     ·不同物种的种间免疫扩散反应第55-56页
     ·免疫组织学观察第56页
   ·讨论第56-60页
第5章 中国明对虾幼体发育过程中卵黄蛋白含量的变化第60-67页
   ·引言第60页
   ·材料和方法第60-61页
     ·实验材料第60页
     ·实验仪器及试剂第60-61页
     ·实验方法第61页
       ·样品的制备第61页
       ·样品中Vn含量的ELISA检测第61页
   ·结果第61-62页
   ·讨论第62-67页
     ·VN在中国明对虾幼体发育时期的变化情况第62-63页
     ·VN对中国明对虾幼体生长的影响第63-64页
     ·VN的幼体饵料研究第64-67页
第6章 中国明对虾卵黄蛋白原CDNA的克隆和序列分析第67-104页
   ·引言第67页
   ·材料与方法第67-75页
     ·材料第67页
     ·仪器与试剂第67-69页
     ·方法第69-75页
       ·引物设计第69-70页
       ·卵黄蛋白原cDNA中间片段的克隆第70-73页
       ·卵黄蛋白原CDNA3'-RACE和5'-RACE第73-74页
       ·序列分析第74-75页
   ·结果第75-99页
     ·卵巢总RNA的提取第75页
     ·卵黄蛋白原CDNA中间片段扩增结果第75-76页
     ·卵黄蛋白原CDNA 3'-RACE和5'-RACE第76-77页
     ·中国明对虾卵黄蛋白原CDNA全序列及分析第77-87页
     ·九种虾类基于VG氨基酸序列的系统发生分析第87-99页
   ·讨论第99-104页
第7章 中国明对虾卵黄蛋白原基因表达特征的初步研究第104-111页
   ·引言第104页
   ·卵黄蛋白原基因表达特征的研究第104-107页
     ·材料第104-105页
     ·仪器与试剂第105页
     ·方法第105-107页
       ·引物设计第105页
       ·中国明对虾雌雄肌肉基因组DNA的提取第105-106页
       ·PCR扩增雌雄虾的卵黄蛋白原基因片段第106页
       ·中国明对虾成熟雌虾各组织总RNA的提取第106-107页
       ·RT-PCR第107页
   ·结果第107-109页
   ·讨论第109-111页
参考文献第111-128页
研究成果第128-129页
致谢第129页

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