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鸭圆环病毒的流行病学调查

中文摘要第1-11页
英文摘要第11-13页
前言第13-35页
 一、鸡传染性贫血病毒第13-20页
  1. 病原学第14-15页
   ·CIAV 的发现和命名第14页
   ·CIAV 的病毒学分类第14页
   ·CIAV 的形态结构和理化特性第14-15页
  2. 分子生物学第15-16页
   ·病毒基因组第15-16页
   ·病毒编码的蛋白第16页
  3. 流行病学第16-17页
  4. 临床症状与病理学变化第17-18页
  5. 诊断方法第18-19页
   ·病原学诊断第18页
   ·血清学诊断第18-19页
   ·分子生物学诊断第19页
  6. CIAV 的防制第19-20页
 二、猪圆环病毒第20-29页
  1. 病原学第20-21页
   ·病毒分类与形态第20页
   ·病毒理化特性第20-21页
  2. 分子生物学特征第21-23页
   ·病毒基因组结构第21页
   ·病毒的复制与转录第21-22页
   ·病毒编码的蛋白第22-23页
  3. 流行病学第23-24页
  4. PCV 的致病机理第24-26页
  5. 诊断方法第26-28页
   ·病原学方法第26-27页
   ·血清学方法第27-28页
  6. PCV 的防制第28-29页
 三、鸭圆环病毒第29-35页
   ·鸭圆环病毒的病原学第29页
   ·鸭圆环病毒的基因组第29-31页
   ·鸭圆环病毒的流行病学第31-32页
   ·鸭圆环病毒的致病机理第32-33页
   ·鸭圆环病毒的诊断第33-35页
 实验一 我国自然发病鸭群中鸭圆环病毒的 流行病学调查第35-45页
 1. 材料和方法第36-39页
   ·材料第36页
     ·鸭只收集第36页
     ·主要试剂和仪器第36页
   ·方法第36-39页
     ·引物的设计第36-37页
     ·DNA 的提取第37页
     ·探针标记及组织样品杂交检测第37-38页
     ·组织样品PCR检测第38页
     ·PCR产物的核酸杂交第38-39页
 2. 结果第39-44页
   ·组织DNA 直接斑点分子杂交第39页
   ·PCR检测结果第39-40页
   ·PCR产物特异性验证第40-41页
   ·不同地区来源的样品检出率第41-42页
   ·两种病毒单一及混合感染情况第42页
   ·不同组织器官的样品检出率第42-44页
 3. 讨论第44-45页
实验二 鸭圆环病毒 FJ0601 株 Rep 蛋白的原核表达 及其抗血清制备第45-60页
 1. 材料与方法第45-55页
   ·材料第45-47页
     ·载体与受体菌第45-46页
     ·仪器与试剂第46页
     ·聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)试剂第46-47页
   ·方法第47-55页
     ·引物设计与合成第47页
     ·FJ0601 株Rep 基因原核表达载体的构建第47-52页
     ·DuCV-pGEX-Rep 重组质粒在大肠杆菌中的诱导表达第52-53页
     ·SDS-PAGE第53-54页
     ·重组菌表达产物多克隆抗血清的制备第54-55页
     ·抗GST-Rep 融合蛋白抗体的特异性检验第55页
 2. 结果第55-58页
   ·DuCV Rep 基因的PCR 扩增结果第55-56页
   ·pGEX-Rep 重组质粒的筛选和酶切鉴定第56页
   ·重组菌菌体裂解物的凝胶电泳结果第56-57页
   ·抗GST-Rep 融合蛋白抗体的特异性第57-58页
 3. 讨论第58-60页
实验三 检测 DuCV 抗体间接 ELISA 方法的建立 及初步应用第60-75页
 1. 材料与方法第61-66页
   ·材料第61-63页
     ·病毒、菌种和质粒第61页
     ·主要试剂和仪器第61-62页
     ·用于蛋白纯化的溶液的配制第62页
     ·ELISA 所用溶液第62-63页
   ·方法第63-66页
     ·引物设计与合成第63页
     ·FJ0601 株Cap 基因原核表达载体的构建第63页
     ·重组质粒在大肠杆菌中的诱导表达和Western Blot分析第63页
     ·重组蛋白的变、复性及其纯化第63-64页
     ·间接ELISA 条件的优化第64-65页
       ·抗原包被浓度与血清最佳稀释度的选择第64-65页
       ·包被液的选择第65页
       ·抗原包被条件的确定第65页
       ·血清最佳反应时间的确定第65页
       ·底物最佳反应时间的确定第65页
     ·间接ELISA 的操作程序和结果判定第65页
     ·间接 ELISA 的特异性试验和重复性试验第65-66页
     ·间接ELISA 方法的初步应用第66页
 2. 结果第66-73页
   ·DuCV Cap 基因的克隆与鉴定第66页
   ·表达产物的分析第66-68页
   ·间接ELISA 最佳反应条件的建立第68-70页
     ·抗原包被浓度与血清最佳稀释度的确定第68页
     ·包被液的确定第68-69页
     ·抗原包被条件的确定第69页
     ·血清最佳反应时间的确定第69-70页
     ·底物最佳反应时间的确定第70页
   ·间接ELISA 临界值的确定及结果的判定第70-71页
   ·间接ELISA 的特异性和重复性试验第71页
   ·间接ELISA 方法的初步应用第71-73页
 3. 讨论第73-75页
研究的主要结论第75-76页
参考文献第76-86页
致谢第86-87页
个人简介第87-88页
附录:硕士在读期间发表的论文情况第88页

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