中文摘要 | 第1-11页 |
英文摘要 | 第11-13页 |
前言 | 第13-35页 |
一、鸡传染性贫血病毒 | 第13-20页 |
1. 病原学 | 第14-15页 |
·CIAV 的发现和命名 | 第14页 |
·CIAV 的病毒学分类 | 第14页 |
·CIAV 的形态结构和理化特性 | 第14-15页 |
2. 分子生物学 | 第15-16页 |
·病毒基因组 | 第15-16页 |
·病毒编码的蛋白 | 第16页 |
3. 流行病学 | 第16-17页 |
4. 临床症状与病理学变化 | 第17-18页 |
5. 诊断方法 | 第18-19页 |
·病原学诊断 | 第18页 |
·血清学诊断 | 第18-19页 |
·分子生物学诊断 | 第19页 |
6. CIAV 的防制 | 第19-20页 |
二、猪圆环病毒 | 第20-29页 |
1. 病原学 | 第20-21页 |
·病毒分类与形态 | 第20页 |
·病毒理化特性 | 第20-21页 |
2. 分子生物学特征 | 第21-23页 |
·病毒基因组结构 | 第21页 |
·病毒的复制与转录 | 第21-22页 |
·病毒编码的蛋白 | 第22-23页 |
3. 流行病学 | 第23-24页 |
4. PCV 的致病机理 | 第24-26页 |
5. 诊断方法 | 第26-28页 |
·病原学方法 | 第26-27页 |
·血清学方法 | 第27-28页 |
6. PCV 的防制 | 第28-29页 |
三、鸭圆环病毒 | 第29-35页 |
·鸭圆环病毒的病原学 | 第29页 |
·鸭圆环病毒的基因组 | 第29-31页 |
·鸭圆环病毒的流行病学 | 第31-32页 |
·鸭圆环病毒的致病机理 | 第32-33页 |
·鸭圆环病毒的诊断 | 第33-35页 |
实验一 我国自然发病鸭群中鸭圆环病毒的 流行病学调查 | 第35-45页 |
1. 材料和方法 | 第36-39页 |
·材料 | 第36页 |
·鸭只收集 | 第36页 |
·主要试剂和仪器 | 第36页 |
·方法 | 第36-39页 |
·引物的设计 | 第36-37页 |
·DNA 的提取 | 第37页 |
·探针标记及组织样品杂交检测 | 第37-38页 |
·组织样品PCR检测 | 第38页 |
·PCR产物的核酸杂交 | 第38-39页 |
2. 结果 | 第39-44页 |
·组织DNA 直接斑点分子杂交 | 第39页 |
·PCR检测结果 | 第39-40页 |
·PCR产物特异性验证 | 第40-41页 |
·不同地区来源的样品检出率 | 第41-42页 |
·两种病毒单一及混合感染情况 | 第42页 |
·不同组织器官的样品检出率 | 第42-44页 |
3. 讨论 | 第44-45页 |
实验二 鸭圆环病毒 FJ0601 株 Rep 蛋白的原核表达 及其抗血清制备 | 第45-60页 |
1. 材料与方法 | 第45-55页 |
·材料 | 第45-47页 |
·载体与受体菌 | 第45-46页 |
·仪器与试剂 | 第46页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)试剂 | 第46-47页 |
·方法 | 第47-55页 |
·引物设计与合成 | 第47页 |
·FJ0601 株Rep 基因原核表达载体的构建 | 第47-52页 |
·DuCV-pGEX-Rep 重组质粒在大肠杆菌中的诱导表达 | 第52-53页 |
·SDS-PAGE | 第53-54页 |
·重组菌表达产物多克隆抗血清的制备 | 第54-55页 |
·抗GST-Rep 融合蛋白抗体的特异性检验 | 第55页 |
2. 结果 | 第55-58页 |
·DuCV Rep 基因的PCR 扩增结果 | 第55-56页 |
·pGEX-Rep 重组质粒的筛选和酶切鉴定 | 第56页 |
·重组菌菌体裂解物的凝胶电泳结果 | 第56-57页 |
·抗GST-Rep 融合蛋白抗体的特异性 | 第57-58页 |
3. 讨论 | 第58-60页 |
实验三 检测 DuCV 抗体间接 ELISA 方法的建立 及初步应用 | 第60-75页 |
1. 材料与方法 | 第61-66页 |
·材料 | 第61-63页 |
·病毒、菌种和质粒 | 第61页 |
·主要试剂和仪器 | 第61-62页 |
·用于蛋白纯化的溶液的配制 | 第62页 |
·ELISA 所用溶液 | 第62-63页 |
·方法 | 第63-66页 |
·引物设计与合成 | 第63页 |
·FJ0601 株Cap 基因原核表达载体的构建 | 第63页 |
·重组质粒在大肠杆菌中的诱导表达和Western Blot分析 | 第63页 |
·重组蛋白的变、复性及其纯化 | 第63-64页 |
·间接ELISA 条件的优化 | 第64-65页 |
·抗原包被浓度与血清最佳稀释度的选择 | 第64-65页 |
·包被液的选择 | 第65页 |
·抗原包被条件的确定 | 第65页 |
·血清最佳反应时间的确定 | 第65页 |
·底物最佳反应时间的确定 | 第65页 |
·间接ELISA 的操作程序和结果判定 | 第65页 |
·间接 ELISA 的特异性试验和重复性试验 | 第65-66页 |
·间接ELISA 方法的初步应用 | 第66页 |
2. 结果 | 第66-73页 |
·DuCV Cap 基因的克隆与鉴定 | 第66页 |
·表达产物的分析 | 第66-68页 |
·间接ELISA 最佳反应条件的建立 | 第68-70页 |
·抗原包被浓度与血清最佳稀释度的确定 | 第68页 |
·包被液的确定 | 第68-69页 |
·抗原包被条件的确定 | 第69页 |
·血清最佳反应时间的确定 | 第69-70页 |
·底物最佳反应时间的确定 | 第70页 |
·间接ELISA 临界值的确定及结果的判定 | 第70-71页 |
·间接ELISA 的特异性和重复性试验 | 第71页 |
·间接ELISA 方法的初步应用 | 第71-73页 |
3. 讨论 | 第73-75页 |
研究的主要结论 | 第75-76页 |
参考文献 | 第76-86页 |
致谢 | 第86-87页 |
个人简介 | 第87-88页 |
附录:硕士在读期间发表的论文情况 | 第88页 |