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G1和M期体细胞核在核移植后形态重建模式研究

摘要第1-9页
Abstract第9-11页
1 前言第11-21页
   ·体细胞核移植(克隆)研究的历史概况第11页
   ·体细胞核移植相关机理研究现状第11-15页
     ·受体胞质的选择第12页
     ·供核体细胞与受体卵母细胞的细胞周期协调第12-14页
     ·体细胞核移植的效率第14-15页
   ·哺乳动物体细胞核移植基本程序第15-17页
     ·供核体细胞的准备第15页
     ·卵母细胞的培养第15页
     ·重构胚的构建和激活第15-17页
   ·体细胞核移植技术的应用价值第17-20页
     ·体细胞克隆技术在畜牧业生产中的应用第17-18页
     ·体细胞克隆技术对转基因动物生产的影响第18页
     ·体细胞克隆技术在临床上的潜在应用方向第18-19页
     ·体细胞克隆技术在动物保护方面的应用价值第19页
     ·体细胞核移植技术在医药生产方面的价值第19页
     ·体细胞核移植对帮助阐明一些生物学基础问题的价值第19-20页
   ·本研究的目的和意义第20-21页
2 材料与方法第21-28页
   ·实验材料第21-22页
     ·猪卵巢与猪胎儿第21页
     ·试剂盒与试剂第21页
     ·主要器材第21-22页
     ·缓冲液及主要试剂的配制第22页
   ·试验方法第22-28页
     ·卵母细胞的采集第22页
     ·亮甲酚兰(BCB)染色第22-23页
     ·卵母细胞体外成熟培养第23页
     ·供核体细胞的准备第23-25页
     ·体细胞核移植第25-26页
     ·胚胎培养及发育的观察第26页
     ·体细胞核移植后重构胚核形态的观察及去核率的检测第26-27页
     ·统计分析第27-28页
3 结果与分析第28-35页
   ·BCB 染色筛选优质猪卵母细胞第28-29页
     ·BCB 染色对猪卵母细胞成熟的影响第28页
     ·BCB 染色对猪卵母细胞孤雌发育的影响第28-29页
     ·BCB 染色对猪核移植胚胎发育的影响第29页
   ·不同周期体细胞核移植重构胚早期发育的比较第29-35页
     ·2-甲氧乙醇(2ME)法筛选细胞的结果第29-30页
     ·去核率的检测第30页
     ·不同周期体细胞核移植胚胎早期核形态学事件第30-34页
     ·不同周期供体细胞对核移植胚胎发育的影响第34-35页
4 讨论第35-39页
   ·BCB 筛选卵母细胞的作用第35-36页
     ·BCB 筛选与形态学筛选的关系第35页
     ·BCB 浓度的确定第35页
     ·BCB 染色对筛选高质量猪卵母细胞的效果第35-36页
   ·不同细胞周期供体核移植胚胎早期发育的比较第36-39页
     ·供体细胞周期的确定第36-37页
     ·细胞周期同步化方法第37页
     ·核移植胚胎第一次卵裂前核的形态学事件第37-38页
     ·供体细胞周期对核移植胚胎早期发育的影响第38-39页
5 结论第39-40页
致谢第40-41页
参考文献第41-47页
附录第47-50页
攻读硕士期间发表的文章第50页

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