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芽孢杆菌的生防菌株筛选及其抑病机理

摘要第1-12页
ABSTRACT第12-15页
1 前言第15-32页
   ·芽孢杆菌的生防应用及其作用机理第15-22页
     ·芽孢杆菌的生防应用第15-16页
     ·芽孢杆菌的生防机理研究现状第16-19页
       ·芽孢杆菌对植物的促生长作用第16页
       ·芽孢杆菌与病原生物的定殖竞争第16-17页
       ·芽孢杆菌对植物诱导抗性作用第17-18页
       ·芽孢杆菌对病原生物的拮抗作用第18-19页
     ·芽孢杆菌抗菌物质第19-22页
       ·芽孢杆菌抗菌蛋白第19-20页
       ·芽孢杆菌抗菌肽第20-22页
   ·青枯病的发生与防治策略第22-30页
     ·青枯病的危害情况第22-23页
     ·青枯病的病原与发病特点第23-24页
     ·青枯病的致病因素和作用机理第24页
     ·青枯病的防治策略第24-30页
       ·抗病育种第24-25页
       ·农业防治第25-26页
       ·化学防治第26页
       ·生物防治第26-30页
   ·本研究的目的和意义第30-32页
2 基于青枯菌-根结线虫复合侵染的生防菌筛选第32-51页
   ·材料与方法第32-36页
     ·供试菌株和病原物来源第32页
     ·供试植物第32页
     ·培养基第32-33页
     ·室内平板初筛试验第33页
     ·针对单一病原的生防菌筛选第33页
       ·拮抗菌株对番茄青枯病的防治效果测定第33页
       ·拮抗菌株对番茄根结线虫病的防治效果测定第33页
     ·拮抗菌株对番茄生长的影响第33页
     ·针对青枯病菌-根结线虫复合侵染的生防菌筛选第33-34页
       ·青枯病菌与根结线虫复合侵染预试验第33-34页
       ·拮抗菌株对青枯病菌-根结线虫复合病害的防治效果测定第34页
       ·自然病土条件下生防菌复筛第34页
     ·数据分析第34页
     ·拮抗菌株鉴定第34-36页
       ·拮抗菌株的常规鉴定第34页
       ·拮抗菌株的分子鉴定第34-36页
   ·结果与分析第36-48页
     ·供试菌株对病原菌的拮抗作用第36-37页
     ·拮抗细菌对番茄青枯病的防治效果第37页
     ·拮抗细菌对番茄根结线虫病的防治效果第37-40页
     ·拮抗细菌对番茄生长的影响第40-42页
     ·青枯病菌与根结线虫复合侵染情况第42-43页
     ·拮抗细菌对复合侵染的防治作用第43页
     ·自然土条件下拮抗细菌的重复筛选第43-45页
       ·自然土中拮抗细菌对青枯病的防效第43-44页
       ·自然土中拮抗细菌对复合病的防效第44-45页
     ·拮抗菌株的鉴定第45-48页
       ·生理生化鉴定第45页
       ·基于16S rDNA的分子鉴定第45-48页
   ·小结与讨论第48-51页
     ·抑病根际芽孢杆菌的筛选第48-49页
     ·复合病害的防治研究第49页
     ·促生作用与菌株防治根结线虫病的相关性第49-51页
3 芽孢杆菌对番茄青枯病的抑病机理初探第51-60页
   ·材料与方法第51-52页
     ·供试菌株与病原物第51页
     ·供试植物第51页
     ·培养基第51页
     ·平板法测定菌株的抗菌活性第51-52页
     ·抗生素标记法初步测定菌株对番茄幼苗的定殖第52页
     ·菌株在番茄根茎及根围土的定殖力测定第52页
     ·菌株对番茄青枯病的诱导抗性效果测定第52页
     ·抗病相关酶活性的测定第52页
     ·菌株不同组份的抑病效果测定第52页
   ·结果与分析第52-58页
     ·菌株对青枯病菌的拮抗作用第52-53页
     ·菌株的定殖竞争作用第53-55页
       ·菌株在番茄幼苗中的定殖力初测第53-54页
       ·菌株在番茄体内及根围土中的定殖消长动态第54-55页
     ·菌株的诱导抗病作用第55-57页
       ·菌株诱导番茄抗青枯病的效果测定第55-56页
       ·菌株诱导番茄叶片抗病相关酶活性变化情况第56-57页
     ·菌株不同组份的抑病效果第57-58页
     ·菌株的作用方式与其抑病效果的相关性分析第58页
   ·讨论第58-60页
4 菌株EN5的定殖情况及其对植株根围微生物的影响第60-74页
   ·材料与方法第60-64页
     ·供试菌株与植物品种第60页
     ·微生物分离培养基配方第60-61页
     ·生理细菌分离试剂第61页
     ·利福平标记菌株的获得第61页
     ·菌株EN5定殖的扫描电镜观察第61-62页
       ·菌株接种和取样第61页
       ·样品处理和观察第61-62页
     ·菌株EN5定殖力影响因素第62页
       ·土壤微生物对菌株EN5定殖力的影响第62页
       ·不同接种处理对菌株EN5定殖力的影响第62页
       ·不同作物对菌株EN5定殖力的影响第62页
     ·菌株EN5的定殖对植株根围微生物的影响第62-64页
       ·菌株处理和取样第62页
       ·菌株定殖对植株内3类微生物群体的影响第62-63页
       ·菌株定殖对根围土微生物群体的影响第63-64页
     ·菌株EN5定殖对根围土细菌群落遗传多样性的影响第64页
       ·根围土细菌样品的制备及总DNA提取第64页
       ·ERIC-PCR遗传多样性分析第64页
   ·结果与分析第64-71页
     ·菌株EN5定殖力的电镜观察结果第64-66页
       ·菌株在根系的分布第64-65页
       ·菌株在茎部的分布第65-66页
     ·菌株EN5定殖力的影响因素第66-68页
       ·土壤灭菌对菌株定殖力的影响第66-67页
       ·接种方式对菌株定殖力的影响第67-68页
       ·菌株EN5在不同作物中的定殖情况第68页
     ·菌株EN5对植株根围微生物群体的影响第68-71页
       ·对植株根围3类主要微生物群体的影响第68-69页
       ·对根围土特殊生理微生物类群的影响第69-70页
       ·根围土细菌遗传多样性的ERIC-PCR分析第70-71页
   ·小结与讨论第71-74页
5 菌株EN16和SW1诱导植物抗病的生化机制第74-87页
   ·材料与方法第74-76页
     ·供试生防菌株和病原物第74页
     ·供试植物第74页
     ·诱导条件对菌株诱导效应的影响第74-75页
       ·挑战接种间隔期的影响第74页
       ·诱导接种方法的影响第74-75页
     ·抗病相关酶活性测定第75页
       ·接种和取样第75页
       ·过氧化物酶(POD)活性测定第75页
       ·多酚氧化酶(PPO)活性测定第75页
       ·苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性测定第75页
     ·菌株处理对病程相关蛋白的诱导第75-76页
       ·菌株处理对叶片胞间隙病程相关蛋白的诱导第75-76页
       ·菌株处理对叶片酸性病程相关蛋白的诱导第76页
     ·ELISA检测菌株诱导烟草抗TMV的效果第76页
   ·结果与分析第76-84页
     ·诱导条件对菌株诱导效应的影响第76-77页
     ·菌株EN16和SW1诱导番茄抗病相关酶的活性变化第77-81页
       ·菌株单独处理对番茄叶片抗病相关酶活性的影响第77-79页
       ·挑战接种后番茄叶片抗病相关酶活性的变化第79-81页
     ·菌株处理对病程相关蛋白的诱导第81-83页
       ·菌株对胞间隙病程相关蛋白的诱导第81-82页
       ·菌株对酸性病程相关蛋白的诱导第82-83页
     ·ELISA测定菌株对烟草体内TMV相对浓度的影响第83-84页
   ·小结与讨论第84-87页
     ·根际细菌的诱导抗性第84-85页
     ·根际细菌诱导抗性的生化机制第85-87页
6 枯草芽孢杆菌SB1抑制青枯病菌的活性物质及其机理第87-105页
   ·材料与方法第87-91页
     ·供试菌株和植物第87页
     ·培养基第87页
     ·平板法测定菌株的拮抗作用第87页
     ·野生菌株与突变菌株的防效测定第87-88页
     ·培养条件优化第88页
     ·发酵产物的抗菌特性初步分析第88页
       ·高温高压对发酵产物活性的影响第88页
       ·紫外线和蛋白酶处理对发酵产物活性的影响第88页
       ·酸碱度对发酵产物活性的影响第88页
       ·不同溶剂对抗菌粗提物的溶解性及抗菌活性的影响第88页
     ·抗菌物质的分离鉴定第88-89页
     ·菌株抗菌素基因的检测及序列测定第89-90页
     ·菌株抗菌物质对青枯病菌的作用方式第90-91页
       ·电镜观察抗菌物质对青枯病菌形态的影响第90页
       ·紫外光谱法检测抗菌物质与病菌DNA的相互作用第90页
       ·SDS-PAGE电泳分析抗菌物质对病菌蛋白质的影响第90-91页
   ·结果与分析第91-102页
     ·菌株抗菌物质的产生与其防病效果的相关性第91-92页
     ·不同培养基条件下菌株产抗菌物质的情况第92-93页
     ·抗菌物质的理化性质第93-95页
     ·抗菌物质的初步鉴定第95-96页
     ·菌株中抗菌素基因的检测第96-98页
     ·抗菌物质的作用方式第98-102页
       ·对青枯病菌形态的影响第98-99页
       ·对青枯病菌DNA的影响对青枯病菌蛋白质的影响第99-100页
       ·对青枯病菌蛋白质的影响第100-102页
   ·小结与讨论第102-105页
7 芽孢杆菌3种抗菌素的检测第105-115页
   ·材料与方法第105-108页
     ·供试菌株和免疫家兔第105页
     ·主要试剂第105-106页
     ·引物第106页
     ·基因组DNA提取第106页
     ·PCR扩增第106页
     ·地高辛标记DNA探针制备第106页
     ·斑点杂交检测第106-107页
     ·表面活性素多克隆抗体的制备第107-108页
     ·抗血清效价测定第108页
     ·间接竞争ELISA法检测样品第108页
   ·结果与分析第108-112页
     ·PCR检测第108-109页
     ·杂交检测第109-111页
       ·探针的制备和分析第109-111页
       ·样品的杂交检测第111页
     ·ELISA检测产表面活性素菌株第111-112页
   ·小结与讨论第112-115页
8 总结第115-118页
 1 主要结果第115-116页
 2 本研究的特色和创新第116页
 3 有待研究的问题第116-118页
参考文献第118-128页
附录1 缩写词英汉对照第128-130页
附录2 本研究使用的主要试剂与溶液的配制第130-134页
附录3 攻博期间发表(投稿)的论文第134-135页
致谢第135页

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