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仔猪水肿病大肠杆菌SLT-Ⅱe基因突变菌株的构建

中文摘要第1-9页
英文摘要第9-10页
1 引言第10-18页
   ·仔猪水肿病的概述第10-12页
     ·流行特点第10页
     ·发病原因第10-11页
     ·临床症状第11页
     ·病理变化第11-12页
   ·病原学第12-15页
     ·主要致病因子第12-14页
     ·致病机理第14-15页
   ·仔猪水肿病的诊断与预防第15-16页
   ·本研究的目的和意义第16-18页
2 材料和方法第18-27页
   ·实验材料第18-20页
     ·质粒和菌株第18页
     ·实验动物及细胞系第18页
     ·主要试剂第18页
     ·主要仪器第18-19页
     ·PCR扩增引物第19-20页
   ·实验方法第20-27页
     ·SLT-Ⅱe基因及L-SLT-Ⅱe基因的扩增第20页
     ·SLT-Ⅱe基因及L-SLT-Ⅱe基因克隆载体的构建第20-21页
     ·SLT-Ⅱe突变基因(SLT-Ⅱe~*)的扩增第21-22页
     ·SLT-Ⅱe突变基因(SLT-Ⅱe~*)重组自杀质粒的构建第22-23页
     ·野生菌株O_(139)与重组自杀质粒的同源重组第23-25页
     ·突变菌株O_(139)(SLT-Ⅱe~*)(Nal~R)的毒力检测第25-27页
3 结果第27-39页
   ·SLT-Ⅱe基因及L-SLT-Ⅱ基因的PCR扩增第27页
   ·SLT-Ⅱe基因及L-SLT-Ⅱe基因克隆载体的构建第27-29页
     ·pMD-SLT-Ⅱe的鉴定第27-29页
     ·pMD-L-SLT-Ⅱe的鉴定第29页
   ·SLT-Ⅱe突变基因(SLT-Ⅱe~*)重组自杀质粒的构建第29-33页
     ·L~*-SLT-Ⅱe基因及R~*-SLT-Ⅱe基因的PCR扩增第29-30页
     ·pMD-L~*-SLT-Ⅱe的鉴定第30-31页
     ·pMD-R~*-SLT-Ⅱe的鉴定第31页
     ·SLT-Ⅱe突变基因(SLT-Ⅱe~*)的PCR扩增第31页
     ·pMD-SLT-Ⅱe~*克隆载体的鉴定第31-32页
     ·SLT-Ⅱe~*基因重组自杀质粒pCVD442::SLT-Ⅱe~*的鉴定第32-33页
   ·突变菌株O_(139)(SLT-Ⅱe~*)(Nal~R)筛选及鉴定结果第33页
   ·细菌过滤上清蛋白含量测定结果第33-35页
   ·Vero细胞毒性检测第35页
   ·突变菌株对小鼠的毒性检测第35-39页
4 讨论第39-42页
   ·实验中的问题分析第39-40页
     ·pCVD442自杀质粒的生物学功能第39页
     ·野生菌与突变菌的菌液上清蛋白含量计算第39页
     ·突变菌株对Vero细胞的毒性第39-40页
     ·突变菌株对小鼠毒性第40页
   ·突变菌株作为仔猪水肿病口服疫苗菌种的前景第40-42页
5 结论第42-43页
致谢第43-44页
参考文献第44-49页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第49页

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