中文摘要 | 第1-9页 |
英文摘要 | 第9-10页 |
1 引言 | 第10-15页 |
·口蹄疫的流行及其危害 | 第10页 |
·口蹄疫病毒(FMDV) | 第10-13页 |
·FMDV的生物学特性 | 第10-11页 |
·FMDV基因组及其编码蛋白质的基本结构 | 第11-12页 |
·FMDV的抗原性 | 第12-13页 |
·FMDV的遗传变异 | 第13页 |
·RACE—cDNA末端的快速扩增 | 第13-14页 |
·3′RACE | 第14页 |
·5′RACE | 第14页 |
·本试验的目的和意义 | 第14-15页 |
2 材料与方法 | 第15-23页 |
·试验材料 | 第15-16页 |
·病毒 | 第15页 |
·菌种、质粒载体和细胞 | 第15页 |
·酶类和主要试剂 | 第15页 |
·仪器和设备 | 第15-16页 |
·试验方法 | 第16-23页 |
·引物设计与合成 | 第16页 |
·常规RNA的提取及反转录 | 第16-17页 |
·3′末端快速扩增法扩增FMDV 3′末端序列(3′RACE) | 第17页 |
·5′末端快速扩增法扩增FMDV 5′末端序列(5′RACE) | 第17-19页 |
·RT-PCR扩增目的基因 | 第19-20页 |
·目的基因克隆及鉴定 | 第20-23页 |
3 结果与分析 | 第23-34页 |
·基因的扩增 | 第23页 |
·pMD18-T-X的鉴定 | 第23页 |
·HLJOC12/03毒株的核苷酸序列与其氨基酸序列 | 第23-24页 |
·HLJOC12/03毒株各基因的序列分析 | 第24-34页 |
·核苷酸序列比较 | 第26页 |
·氨基酸序列比较 | 第26-27页 |
·FMDV HLJOC12/03株核糖体进入位点(IRES)预测的二级结构图 | 第27-28页 |
·FMDV HLJOC12/03株5′UTR预测的二级结构图 | 第28-29页 |
·与参考毒株绘制L、VP1、3C系统进化树 | 第29-30页 |
·VP1结构蛋白B细胞抗原表位的预测 | 第30-31页 |
·5′ UTR的序列分析 | 第31页 |
·L蛋白编码区的序列分析 | 第31-32页 |
·P1序列分析 | 第32页 |
·P2核苷酸序列及其编码的氨基酸序列分析 | 第32-33页 |
·P3核苷酸序列及其编码的氨基酸序列分析 | 第33页 |
·3′UTR的序列分析 | 第33-34页 |
4 讨论 | 第34-37页 |
·HLJOC12/03基因组序列比较 | 第34页 |
·选择压力下,HLJOC12/03的变异特点 | 第34页 |
·HLJOC12/03中IRES的特点 | 第34-35页 |
·HLJOC12/03中VP1的抗原性 | 第35页 |
·根据L、3C、VP1的核苷酸序列绘制系统发生树的暗示 | 第35页 |
·3A在FMDV中的作用 | 第35-36页 |
·本研究的难点和突破口 | 第36-37页 |
5 结论 | 第37-38页 |
致谢 | 第38-39页 |
参考文献 | 第39-45页 |
攻读硕士期间发表的学术论文 | 第45页 |