提要 | 第1-5页 |
英文缩写词表 | 第5-9页 |
前言 | 第9-11页 |
第一章 文献回顾 | 第11-26页 |
第一节活化巨噬细胞的抗肿瘤作用 | 第11-16页 |
1. 巨噬细胞的活化 | 第11-13页 |
2. 巨噬细胞杀伤肿瘤细胞的机制 | 第13-14页 |
3. 巨噬细胞杀伤介质 | 第14-16页 |
第二节 蛋白质组学及其工具 | 第16-23页 |
1. 蛋白质组与蛋白质组学 | 第16-18页 |
2. 蛋白质组学工具 | 第18-21页 |
3. 蛋白质组学技术新方向 | 第21页 |
4. 膜蛋白质组学研究进展 | 第21-23页 |
第三节 立题依据及课题特色 | 第23-26页 |
1. 立题依据 | 第23-25页 |
2. 课题特色 | 第25-26页 |
第二章 材料与方法 | 第26-34页 |
第一节 材料 | 第26-28页 |
1. 实验动物 | 第26页 |
2. 细胞株 | 第26页 |
3. 质粒和菌株 | 第26页 |
4. 主要试剂 | 第26-28页 |
第二节 实验方法 | 第28-34页 |
1. 巨噬细胞的活化及肿瘤细胞杀伤实验 | 第28-29页 |
2. 蛋白质组学分析 | 第29-30页 |
3. 鉴定结果整理及生物信息学分析 | 第30页 |
4. 活化巨噬细胞特异表达蛋白的筛选 | 第30页 |
5. NMAAP1 基因的克隆 | 第30-33页 |
6. pET 表达载体的构建 | 第33页 |
7. 统计学处理 | 第33-34页 |
第三章 实验结果 | 第34-104页 |
第一节 活化巨噬细胞的分离与细胞毒活性检测 | 第34-37页 |
1. 小鼠腹腔巨噬细胞的分离 | 第34页 |
2. 活化巨噬细胞的细胞毒活性 | 第34-35页 |
3. 巨噬细胞杀伤活性特点 | 第35-36页 |
4. 巨噬细胞表面TNF-α的表达 | 第36页 |
5. 肿瘤细胞死亡方式的检测 | 第36-37页 |
第二节 膜蛋白SDS-PAGE 分离及LC-MS/MS 鉴定 | 第37-83页 |
1. 巨噬细胞膜蛋白提取 | 第37页 |
2. SDS-PAGE 分离 | 第37-38页 |
3. LC-MS/MS 分析 | 第38-41页 |
4. 鉴定结果分析 | 第41-83页 |
第三节 活化相关蛋白的筛选及生物信息学分析 | 第83-101页 |
1. 活化巨噬细胞特异表达蛋白的筛选 | 第83-100页 |
2. 新蛋白细胞定位预测 | 第100-101页 |
第四节 NMMP1 基因的克隆及表达载体构建 | 第101-104页 |
1. 巨噬细胞RNA 提取及RT-PCR | 第101页 |
2. 目标基因片段的T 克隆 | 第101页 |
3. 测序结果 | 第101-103页 |
4. 表达载体的构建 | 第103-104页 |
第四章 讨论 | 第104-116页 |
第一节 巨噬细胞接触依赖性杀伤机制 | 第106-108页 |
第二节 蛋白质组学技术鉴定活化巨噬细胞膜蛋白 | 第108-110页 |
第三节 巨噬细胞活化相关蛋白的筛选 | 第110-111页 |
第四节 对活化巨噬细胞特异表达蛋白的进一步研究策略 | 第111-112页 |
第五节 膜蛋白定量研究 | 第112-113页 |
第六节 生物信息学在膜蛋白质组学研究中的应用 | 第113-114页 |
第七节 本课题对巨噬细胞生物学研究的意义 | 第114-116页 |
第五章 结论 | 第116-125页 |
攻读博士期间发表及待发表的学术论文 | 第125-126页 |
中文摘要 | 第126-130页 |
ABSTRACT | 第130-134页 |
致谢 | 第134页 |