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巨噬细胞接触依赖性杀伤机制的研究及活化相关膜蛋白的鉴定

提要第1-5页
英文缩写词表第5-9页
前言第9-11页
第一章 文献回顾第11-26页
 第一节活化巨噬细胞的抗肿瘤作用第11-16页
  1. 巨噬细胞的活化第11-13页
  2. 巨噬细胞杀伤肿瘤细胞的机制第13-14页
  3. 巨噬细胞杀伤介质第14-16页
 第二节 蛋白质组学及其工具第16-23页
  1. 蛋白质组与蛋白质组学第16-18页
  2. 蛋白质组学工具第18-21页
  3. 蛋白质组学技术新方向第21页
  4. 膜蛋白质组学研究进展第21-23页
 第三节 立题依据及课题特色第23-26页
  1. 立题依据第23-25页
  2. 课题特色第25-26页
第二章 材料与方法第26-34页
 第一节 材料第26-28页
  1. 实验动物第26页
  2. 细胞株第26页
  3. 质粒和菌株第26页
  4. 主要试剂第26-28页
 第二节 实验方法第28-34页
  1. 巨噬细胞的活化及肿瘤细胞杀伤实验第28-29页
  2. 蛋白质组学分析第29-30页
  3. 鉴定结果整理及生物信息学分析第30页
  4. 活化巨噬细胞特异表达蛋白的筛选第30页
  5. NMAAP1 基因的克隆第30-33页
  6. pET 表达载体的构建第33页
  7. 统计学处理第33-34页
第三章 实验结果第34-104页
 第一节 活化巨噬细胞的分离与细胞毒活性检测第34-37页
  1. 小鼠腹腔巨噬细胞的分离第34页
  2. 活化巨噬细胞的细胞毒活性第34-35页
  3. 巨噬细胞杀伤活性特点第35-36页
  4. 巨噬细胞表面TNF-α的表达第36页
  5. 肿瘤细胞死亡方式的检测第36-37页
 第二节 膜蛋白SDS-PAGE 分离及LC-MS/MS 鉴定第37-83页
  1. 巨噬细胞膜蛋白提取第37页
  2. SDS-PAGE 分离第37-38页
  3. LC-MS/MS 分析第38-41页
  4. 鉴定结果分析第41-83页
 第三节 活化相关蛋白的筛选及生物信息学分析第83-101页
  1. 活化巨噬细胞特异表达蛋白的筛选第83-100页
  2. 新蛋白细胞定位预测第100-101页
 第四节 NMMP1 基因的克隆及表达载体构建第101-104页
  1. 巨噬细胞RNA 提取及RT-PCR第101页
  2. 目标基因片段的T 克隆第101页
  3. 测序结果第101-103页
  4. 表达载体的构建第103-104页
第四章 讨论第104-116页
 第一节 巨噬细胞接触依赖性杀伤机制第106-108页
 第二节 蛋白质组学技术鉴定活化巨噬细胞膜蛋白第108-110页
 第三节 巨噬细胞活化相关蛋白的筛选第110-111页
 第四节 对活化巨噬细胞特异表达蛋白的进一步研究策略第111-112页
 第五节 膜蛋白定量研究第112-113页
 第六节 生物信息学在膜蛋白质组学研究中的应用第113-114页
 第七节 本课题对巨噬细胞生物学研究的意义第114-116页
第五章 结论第116-125页
攻读博士期间发表及待发表的学术论文第125-126页
中文摘要第126-130页
ABSTRACT第130-134页
致谢第134页

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