提要 | 第1-7页 |
英文缩略词表 | 第7-9页 |
第一章 绪论 | 第9-39页 |
第一节 RNA 干涉在抗病毒治疗中的应用研究进展 | 第9-33页 |
第二节 丙型肝炎基因治疗的研究进展 | 第33-39页 |
第二章 丙型肝炎N55A 基因真核表达载体的构建 | 第39-60页 |
第一节 实验材料和实验方法 | 第40-52页 |
一、实验材料 | 第40-43页 |
二、实验方法 | 第43-52页 |
(一) HCV N55A 基因的获取 | 第43-45页 |
(二) 克隆载体pGEM-T/ HCV N55A 的构建 | 第45-48页 |
(三) 表达载体pCI-neo/ HCV N55A 的构建 | 第48-52页 |
第二节 结果 | 第52-60页 |
一、HCV N55A 基因的PCR 结果 | 第52页 |
二、克隆载体pGEM-T/ HCV N55A 的双酶切结果 | 第52-53页 |
三、克隆载体pGEM-T/ HCV N55A 的测序结果 | 第53-59页 |
四、表达载体pCI-neo/ HCV N55A 的双酶切结果 | 第59-60页 |
第三章 HL-7702 细胞培养及pCI-neo/ HCV NS5A 表达质粒转染HL-7702 细胞 | 第60-70页 |
第一节 实验材料和实验方法 | 第61-69页 |
一、实验材料 | 第61-63页 |
二、实验方法 | 第63-69页 |
(一) 人肝细胞株HL-7702 细胞的复苏、传代与培养 | 第63-64页 |
(二) 表达载体pCI-neo/ HCV N55A 转染HL-7702 细胞 | 第64-66页 |
(三) 瞬时表达 HCV NS5A 蛋白细胞系的鉴定 | 第66-69页 |
第二节 结果 | 第69-70页 |
第四章 HCV N55A 不同位点表达siRNA 质粒的构建及对蛋白表达的影响 | 第70-83页 |
第一节 实验材料和实验方法 | 第72-79页 |
一、实验材料 | 第72页 |
二、实验方法 | 第72-79页 |
(一) 表达siRNA 质粒的制备 | 第72-74页 |
(二) 转染条件 | 第74-76页 |
(三) 表达siRNA 质粒转染含HCV N55A 基因的HL-7702 细胞 | 第76-79页 |
第二节 结果 | 第79-83页 |
一、表达siRNA 质粒测序结果 | 第79-81页 |
二、表达siRNA 质粒电泳结果 | 第81-82页 |
三、转染不同质粒对HCV N55A 蛋白表达的影响 | 第82-83页 |
第五章 讨论 | 第83-91页 |
结论 | 第91-92页 |
本研究创新点 | 第92-93页 |
参考文献 | 第93-111页 |
攻读博士期间发表论文、科研、获奖情况 | 第111-112页 |
中文摘要 | 第112-116页 |
英文摘要 | 第116-121页 |
致谢 | 第121页 |