| 符号说明 | 第1-9页 |
| 中文摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 1 前言 | 第13-35页 |
| ·植物离体器官发生 | 第13页 |
| ·植物细胞全能性 | 第13-14页 |
| ·激素在植物发育及再生过程中的作用 | 第14-15页 |
| ·细胞分裂素 | 第15-24页 |
| ·细胞分裂素的生物合成 | 第17-19页 |
| ·细胞分裂素的降解 | 第19页 |
| ·细胞分裂素的运输 | 第19-20页 |
| ·细胞分裂素信号转导 | 第20-24页 |
| ·信号转导中的受体 | 第21-22页 |
| ·信号转导中的磷酸转运蛋白 AHP 和反应调节因子 ARR | 第22-24页 |
| ·生长素 | 第24-28页 |
| ·生长素的生物合成 | 第25-26页 |
| ·生长素的运输 | 第26-27页 |
| ·生长素信号转导 | 第27-28页 |
| ·生长素和细胞分裂素的相互作用 | 第28-34页 |
| ·本研究的目的意义 | 第34-35页 |
| 2 材料与方法 | 第35-57页 |
| ·实验材料 | 第35-36页 |
| ·植物材料及生长条件 | 第35页 |
| ·菌株和质粒 | 第35页 |
| ·工具酶及生化试剂 | 第35-36页 |
| ·主要实验仪器 | 第36页 |
| ·PCR 引物 | 第36页 |
| ·实验方法 | 第36-57页 |
| ·拟南芥幼苗培养及种植 | 第36页 |
| ·表达载体的构建 | 第36-42页 |
| ·植物组织总RNA 的提取 | 第36-37页 |
| ·反转录cDNA 第一链的合成 | 第37-38页 |
| ·植物基因组DNA 的提取及纯化 | 第38-39页 |
| ·PCR 扩增 | 第39页 |
| ·连接反应 | 第39页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备转化及碱法小量质粒DNA 的提取 | 第39-40页 |
| ·质粒DNA 的酶切鉴定 | 第40页 |
| ·DNA 序列测定 | 第40页 |
| ·诱导型ARR14 毕赤酵母表达载体的构建 | 第40-41页 |
| ·B 类ARR myc 标记过表达载体的构建 | 第41-42页 |
| ·拟南芥的转化与转基因植株的分析 | 第42-44页 |
| ·根癌农杆菌GV3101 感受态细胞的制备与转化 | 第42页 |
| ·拟南芥的转化 | 第42-43页 |
| ·转基因植株的分析 | 第43-44页 |
| ·qRT-PCR 分析 | 第44页 |
| ·重组质粒电击转化毕赤酵母 | 第44-49页 |
| ·主要试剂的配制 | 第44-46页 |
| ·碱裂解法大量制备重组表达质粒 | 第46-47页 |
| ·重组表达质粒的线性化 | 第47-48页 |
| ·毕赤酵母 GS115 感受态细胞的制备 | 第48页 |
| ·重组表达质粒电击转化酵母感受态细胞 | 第48-49页 |
| ·酵母转化子的筛选与鉴定 | 第49-50页 |
| ·酵母基因组DNA 的提取 | 第49页 |
| ·酵母转化子的PCR 鉴定 | 第49-50页 |
| ·毕赤酵母中蛋白的诱导表达及表达产物的分离纯化 | 第50-51页 |
| ·目的基因在毕赤酵母中的诱导表达 | 第50页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE 分析 | 第50-51页 |
| ·表达产物的分离纯化 | 第51页 |
| ·凝胶迁移率实验（EMSA） | 第51-53页 |
| ·探针的生物素标记 | 第51页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第51-52页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶转膜 | 第52-53页 |
| ·核酸（DNA）固定检测方法 | 第53页 |
| ·染色质免疫共沉淀（CHIP） | 第53-57页 |
| 3 结果与分析 | 第57-70页 |
| ·B 类ARR 在离体再生过程中具有重要作用 | 第57-59页 |
| ·拟南芥离体苗再生系统 | 第57-58页 |
| ·B 类ARR 调控离体苗的再生 | 第58-59页 |
| ·生长素合成基因对离体苗的再生是必需的 | 第59-63页 |
| ·YUC 对离体苗的再生具有重要作用 | 第59-60页 |
| ·YUC 基因的表达模式 | 第60-63页 |
| ·细胞分裂素对生长素相关基因具有重要调节作用 | 第63-64页 |
| ·B 类ARR 与生长素相关基因的相互作用 | 第64-67页 |
| ·生长素相关基因启动子上细胞分裂素响应元件序列分析 | 第64-65页 |
| ·ARR14 蛋白的体外表达 | 第65-67页 |
| ·ARR14 毕赤酵母转化 | 第65-66页 |
| ·ARR14 在毕赤酵母中的诱导表达 | 第66-67页 |
| ·EMSA 分析 | 第67-70页 |
| ·EMSA 预实验 | 第67-68页 |
| ·EMSA 验证 | 第68-69页 |
| ·染色质免疫共沉淀（CHIP） | 第69-70页 |
| 4 讨论 | 第70-73页 |
| ·细胞分裂素与生长素之间的相互作用调节苗的再生 | 第70页 |
| ·B 类ARR 对调节生长素相关基因的表达具有重要的调节作用 | 第70-71页 |
| ·ARR14 调节生长素的响应及合成相关基因的表达 | 第71-72页 |
| ·B 类ARR 对生长素相关基因的调节 | 第72-73页 |
| 5 结论 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-82页 |
| 附录 | 第82-85页 |
| 致谢 | 第85-86页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第86页 |
