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hIL-10基因瞬时转染HEK293细胞介导的免疫学效应研究

提要第1-5页
英文缩略词表第5-9页
引言第9-11页
第一章 文献回顾第11-19页
 一、白细胞介素家族第11-12页
 二、IL-10 生物学特性第12-14页
 三、IL-10 生物学功能第14-16页
 四、IL-10 与免疫抑制第16-19页
第二章 实验研究第19-64页
 第一节 hIL-10 基因克隆及真核表达载体pcDNA3.0-hIL-10 的构建第19-36页
  一、实验材料第19-22页
   1. 主要试剂第19-20页
   2. 主要仪器设备第20页
   3. 主要试剂的配制第20-22页
  二、实验方法第22-29页
   1. hIL-10 特异性 PCR 引物设计与合成第22页
   2. 正常人外周血单个核细胞(PBMC)的分离培养与活化第22-24页
   3. hIL-10 基因的PCR 扩增第24-25页
   4. hIL-10 基因片段的 TA 克隆第25-28页
   5. 真核表达载体pcDNA3.0-hIL-10 重组基因的构建第28-29页
   6. pcDNA3.0-hIL-10 重组基因的纯化第29页
  三、实验结果第29-36页
   1. RT‐PCR 法获得人 IL-10 基因片段第29-30页
   2. pMD18-T-hIL-10 重组基因的鉴定第30-33页
   3. 真核表达载体pcDNA3.0-hIL-10 重组基因的鉴定第33-36页
   4. pcDNA3.0-hIL-10 重组基因的纯化第36页
 第二节 重组基因pcDNA3.0-hIL-10 瞬时转染HEK293 细胞介导的免疫学效应第36-57页
  一、实验材料第36-38页
   1 细胞株与病毒第36页
   2. 主要试剂第36-37页
   3. 主要仪器第37页
   4. 主要试剂的配制第37-38页
  二、实验方法第38-46页
   1. 检测细胞内表达的 IL-10 特异性 PCR 引物设计与合成第38页
   2. 逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)检测不同细胞株中1L-10 表达第38-40页
   3. 重组基因pcDNA3.0-hIL-10 瞬时转染人胚肾细胞 HEK293第40-43页
   4. 重组基因pcDNA3.0-hIL-10 瞬时转染对 HEK293 细胞免疫学行为的影响第43-46页
   5. 统计学方法第46页
  三、实验结果第46-57页
   1. 转染细胞的选择第46-47页
   2. pcDNA3.0- hIL–10 瞬时转染 HEK293 细胞的情况第47-50页
   3. pcDNA3.0-hIL-10 瞬时转染对HEK293 细胞免疫学行为的影响第50-57页
 讨论第57-63页
 小结第63-64页
参考文献第64-71页
中文摘要第71-74页
Abstract第74-77页
致谢第77-78页
攻读硕士期间已(待)发表的文章第78页

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