中文摘要 | 第1-4页 |
英文摘要 | 第4-8页 |
符号说明 | 第8-10页 |
第一章 反转录病毒载体研究进展 | 第10-22页 |
1 反转录病毒的生物学特性 | 第11-12页 |
2 反转录病毒载体 | 第12-15页 |
3 反转录病毒载体的类型 | 第15-17页 |
4 反转录病毒载体中外源治疗性基因的表达调控 | 第17-18页 |
5 反转录病毒载体的安全性 | 第18-20页 |
6 反转录病毒载体的应用及前景 | 第20-22页 |
第二章 猪内源性反转录病毒载体的构建 | 第22-38页 |
1 材料与方法 | 第23-32页 |
·材料 | 第23-24页 |
·外周血淋巴细胞的分离与基因组DNA 的制备 | 第24-25页 |
·PERV 载体的构建 | 第25-30页 |
·含 GFP 基因的 pPM-1-GFP、pPM-2-GFP 及 pMSCV-GFP的构建与鉴定 | 第30-32页 |
2 结果 | 第32-37页 |
3 讨论 | 第37-38页 |
第三章 猪内源性反转录病毒载体表达系统的评价 | 第38-51页 |
1 材料与方法 | 第38-44页 |
·材料 | 第38-39页 |
·纯化质粒及浓度纯度检测 | 第39-40页 |
·含GFP 基因的反转录病毒载体转染PK15 细胞系及筛选鉴定 | 第40-43页 |
·含GFP基因的反转录病毒载体分别与包装质粒共转染HEK293-T细胞 | 第43-44页 |
·pPM-2-GFP-1 与包装质粒共转染PK-15 细胞 | 第44页 |
2 结果 | 第44-49页 |
3 讨论 | 第49-51页 |
参考文献 | 第51-57页 |
附录 | 第57-67页 |
附录1 PM-1 和PM-2 载体的构建技术路线 | 第57-58页 |
附录2 重叠PCR 扩增技术路线 | 第58-59页 |
附录3 PM-1 载体序列及序列分析 | 第59-63页 |
附录4 PM-2 载体序列及序列分析 | 第63-67页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第67-68页 |
致谢 | 第68-69页 |