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IFN-β基因修饰的人骨髓间充质干细胞抗前列腺癌细胞系PC-3效应的实验研究

摘要第1-4页
ABSTRACT第4-8页
第一章 引言第8-10页
第二章 材料与方法第10-20页
   ·试剂及仪器第10-11页
   ·实验步骤第11-19页
     ·试剂的配制第11-12页
     ·细胞培养第12-14页
     ·人β干扰素真核表达质粒pCDNA3.1-IFN-β的构建第14页
     ·质粒转化扩增第14页
     ·质粒的提取纯化第14-15页
     ·质粒的酶切鉴定及测序鉴定第15-16页
     ·确定G418 的筛选剂量第16-17页
     ·质粒DNA 对hMSCs 的转染第17页
     ·间接细胞免疫荧光染色检测IFN-β表达第17页
     ·转染细胞表达IFN-β的分析及鉴定第17-18页
     ·IFN-β-hMSCs 与前列腺癌细胞株PC-3 共培养第18-19页
     ·检测IFN-β-hMSCs 对于PC-3 生长情况的影响第19页
     ·ELISA 法分析IFN-β-hMSCs 表达IFN-β情况第19页
   ·统计学处理第19-20页
第三章 结果第20-29页
   ·细胞培养第20-21页
     ·PC-3 体外稳定传代培养第20页
     ·人骨髓间充质干细胞(hMSCs)的生长第20-21页
   ·质粒酶切电泳及鉴定第21-23页
   ·质粒转染hMSCs 后,G418 抗性筛选结果第23页
   ·质粒转染hMSCs 转染率的间接判定第23页
   ·间接细胞免疫荧光染色检测IFN-β表达第23-24页
   ·IFN-β-hMSCs 对于PC-3 生长情况的影响第24-27页
   ·基因转染后人骨髓间充质干细胞表达IFN-β的情况第27-29页
第四章 讨论第29-37页
   ·前列腺癌基因治疗研究现状第29-30页
   ·体外研究中IFN-β对人前列腺癌细胞系PC-3 的生物学效应第30-31页
   ·以质粒为载体的目的基因表达系统第31-34页
   ·骨髓间充质干细胞作为基因运载细胞的研究第34-37页
第五章 结论与展望第37-38页
   ·结论第37页
   ·进一步工作的方向第37-38页
致谢第38-39页
参考文献第39-42页
附录(质粒pCDNA3.1-IFN-β测序报告)第42-43页
综述第43-56页
 参考文献第51-56页
攻读学位期间的研究成果第56页

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