| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-8页 |
| 第一章 引言 | 第8-10页 |
| 第二章 材料与方法 | 第10-20页 |
| ·试剂及仪器 | 第10-11页 |
| ·实验步骤 | 第11-19页 |
| ·试剂的配制 | 第11-12页 |
| ·细胞培养 | 第12-14页 |
| ·人β干扰素真核表达质粒pCDNA3.1-IFN-β的构建 | 第14页 |
| ·质粒转化扩增 | 第14页 |
| ·质粒的提取纯化 | 第14-15页 |
| ·质粒的酶切鉴定及测序鉴定 | 第15-16页 |
| ·确定G418 的筛选剂量 | 第16-17页 |
| ·质粒DNA 对hMSCs 的转染 | 第17页 |
| ·间接细胞免疫荧光染色检测IFN-β表达 | 第17页 |
| ·转染细胞表达IFN-β的分析及鉴定 | 第17-18页 |
| ·IFN-β-hMSCs 与前列腺癌细胞株PC-3 共培养 | 第18-19页 |
| ·检测IFN-β-hMSCs 对于PC-3 生长情况的影响 | 第19页 |
| ·ELISA 法分析IFN-β-hMSCs 表达IFN-β情况 | 第19页 |
| ·统计学处理 | 第19-20页 |
| 第三章 结果 | 第20-29页 |
| ·细胞培养 | 第20-21页 |
| ·PC-3 体外稳定传代培养 | 第20页 |
| ·人骨髓间充质干细胞(hMSCs)的生长 | 第20-21页 |
| ·质粒酶切电泳及鉴定 | 第21-23页 |
| ·质粒转染hMSCs 后,G418 抗性筛选结果 | 第23页 |
| ·质粒转染hMSCs 转染率的间接判定 | 第23页 |
| ·间接细胞免疫荧光染色检测IFN-β表达 | 第23-24页 |
| ·IFN-β-hMSCs 对于PC-3 生长情况的影响 | 第24-27页 |
| ·基因转染后人骨髓间充质干细胞表达IFN-β的情况 | 第27-29页 |
| 第四章 讨论 | 第29-37页 |
| ·前列腺癌基因治疗研究现状 | 第29-30页 |
| ·体外研究中IFN-β对人前列腺癌细胞系PC-3 的生物学效应 | 第30-31页 |
| ·以质粒为载体的目的基因表达系统 | 第31-34页 |
| ·骨髓间充质干细胞作为基因运载细胞的研究 | 第34-37页 |
| 第五章 结论与展望 | 第37-38页 |
| ·结论 | 第37页 |
| ·进一步工作的方向 | 第37-38页 |
| 致谢 | 第38-39页 |
| 参考文献 | 第39-42页 |
| 附录(质粒pCDNA3.1-IFN-β测序报告) | 第42-43页 |
| 综述 | 第43-56页 |
| 参考文献 | 第51-56页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第56页 |