| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-10页 |
| 第1章 文献综述 | 第10-16页 |
| ·理化性质 | 第10-11页 |
| ·氯胺酮药学作用机理和毒副作用 | 第11-12页 |
| ·药学作用机理 | 第11页 |
| ·对N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)受体的拮抗用 | 第11页 |
| ·与其他受体相互作用 | 第11页 |
| ·毒副作用 | 第11-12页 |
| ·氯胺酮检测研究进展 | 第12-15页 |
| ·氯胺酮体内代谢 | 第12页 |
| ·尿液中氯胺酮检测研究 | 第12-14页 |
| ·血液中氯胺酮检测研究 | 第14页 |
| ·毛发中氯胺酮检测研究 | 第14-15页 |
| ·研究目的与意义 | 第15页 |
| ·展望 | 第15-16页 |
| 第2章 噬菌体展示肽库淘选氯胺酮模拟表位的研究 | 第16-31页 |
| ·材料 | 第17-19页 |
| ·实验材料 | 第17页 |
| ·仪器和设备 | 第17页 |
| ·主要试剂和培养基的配制 | 第17-19页 |
| ·淘选部分 | 第17-18页 |
| ·ELISA部分 | 第18-19页 |
| ·实验方法 | 第19-23页 |
| ·E.coli ER2738菌株的保藏 | 第19-20页 |
| ·E.coli ER2738菌株生长曲线的绘制 | 第20页 |
| ·抗氯胺酮单克隆抗体的纯化 | 第20页 |
| ·SDS-PAGE鉴定氯胺酮单克隆抗体 | 第20页 |
| ·噬菌体展示肽库第一轮淘选方法 | 第20-21页 |
| ·噬菌体扩增与纯化 | 第21页 |
| ·噬菌体滴度测定 | 第21页 |
| ·第二到四轮淘选方法 | 第21页 |
| ·噬菌体单菌落的扩增 | 第21-22页 |
| ·氯胺酮模拟表位的鉴定 | 第22页 |
| ·间接非竞争ELISA方法检测噬菌体克隆 | 第22页 |
| ·间接竞争ELISA方法鉴定氯胺酮模拟表位 | 第22页 |
| ·噬菌体基因组DNA纯化与测序 | 第22-23页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳鉴定噬菌体基因组DNA | 第23页 |
| ·结果 | 第23-29页 |
| ·抗氯胺酮单克隆抗体SDS-PAGE电泳结果 | 第23-24页 |
| ·E.coli ER2738生长曲线 | 第24页 |
| ·淘选回收率计算 | 第24页 |
| ·氯胺酮模拟抗原表位噬菌体筛选结果 | 第24-26页 |
| ·模拟表位噬菌体基因组DNA、随机插入序列测序结果分析 | 第26-29页 |
| ·基因组DNA琼脂糖凝胶电泳结果 | 第26页 |
| ·模拟表位噬菌体插入DNA测序结果分析 | 第26页 |
| ·模拟表位的计算机分析结果 | 第26-29页 |
| ·讨论 | 第29-30页 |
| ·洗脱时间对淘选的影响 | 第29页 |
| ·减少非目的噬菌体出现机率的方法 | 第29-30页 |
| ·小结 | 第30-31页 |
| 第3章 氯胺酮间接竞争ELISA检测方法的建立 | 第31-41页 |
| ·材料 | 第31-32页 |
| ·实验材料 | 第31页 |
| ·仪器和设备 | 第31页 |
| ·主要试剂配制 | 第31-32页 |
| ·实验方法 | 第32-34页 |
| ·间接非竞争ELISA实验方法的建立 | 第32页 |
| ·酶标板均一性检测 | 第32页 |
| ·间接竞争ELISA实验方法的建立 | 第32-33页 |
| ·间接竞争ELISA最佳条件的优化 | 第33页 |
| ·包被条件的优化 | 第33页 |
| ·封闭液的优化 | 第33页 |
| ·HRP标记抗IgG抗体反应时间的优化 | 第33页 |
| ·棋盘滴定法确定最佳抗原包被浓度和最佳抗体稀释倍数 | 第33页 |
| ·间接竞争ELISA检测氯胺酮标准曲线的制作 | 第33-34页 |
| ·交叉反应实验 | 第34页 |
| ·精密度 | 第34页 |
| ·灵敏度与最低检出限 | 第34页 |
| ·结果与分析 | 第34-39页 |
| ·酶标板均一性的检测 | 第34-35页 |
| ·间接竞争ELISA方法最佳条件的优化 | 第35-37页 |
| ·最佳包被条件的确定 | 第35页 |
| ·最佳封闭液的确定 | 第35页 |
| ·HRP标记抗IgG抗体最佳反应时间的确定 | 第35页 |
| ·抗原最佳包被浓度与抗体最佳稀释倍数确定 | 第35页 |
| ·最佳实验条件确定 | 第35-37页 |
| ·标准曲线的制作 | 第37页 |
| ·交叉反应实验 | 第37-38页 |
| ·精密度 | 第38-39页 |
| ·灵敏度和最低检出限 | 第39页 |
| ·讨论 | 第39-40页 |
| ·小结 | 第40-41页 |
| 第4章 噬菌体模拟表位间接竞争ELISA方法的建立 | 第41-55页 |
| ·材料 | 第41-42页 |
| ·实验材料 | 第41页 |
| ·仪器和设备 | 第41页 |
| ·主要试剂配制 | 第41-42页 |
| ·方法 | 第42-44页 |
| ·间接非竞争ELISA实验方法的建立 | 第42页 |
| ·间接竞争ELISA实验方法的建立 | 第42页 |
| ·间接竞争ELISA最佳条件的优化 | 第42-43页 |
| ·包被条件的优化 | 第43页 |
| ·封闭液的优化 | 第43页 |
| ·HRP标记抗M13单克隆抗体反应时间的优化 | 第43页 |
| ·棋盘滴定法确定最佳抗原包被浓度和最佳抗体稀释倍数 | 第43页 |
| ·间接竞争ELISA检测氯胺酮标准曲线的制作 | 第43页 |
| ·灵敏度与最低检出限 | 第43-44页 |
| ·精密度 | 第44页 |
| ·结果与分析 | 第44-53页 |
| ·间接竞争ELISA方法最佳条件的确定 | 第44-48页 |
| ·最佳包被条件的确定 | 第44页 |
| ·最佳封闭液的确定 | 第44页 |
| ·HRP标记抗M13单克隆抗体最佳反应时间的确定 | 第44-46页 |
| ·抗氯胺酮单克隆抗体最佳包被浓度与噬菌体最佳稀释倍数确定 | 第46-47页 |
| ·最佳实验条件确定 | 第47-48页 |
| ·标准曲线的制作 | 第48-52页 |
| ·灵敏度和最低检出限 | 第52页 |
| ·精密度 | 第52-53页 |
| ·讨论 | 第53-54页 |
| ·噬菌体保存实验探讨 | 第53页 |
| ·模拟表位分析 | 第53-54页 |
| ·小结 | 第54-55页 |
| 第5章 结论 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-60页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第60页 |
