| 中文摘要 | 第1-6页 |
| 英文摘要 | 第6-10页 |
| 1. 前言 | 第10-18页 |
| ·IBV的流行现状和存在的问题 | 第10-11页 |
| ·鸡细胞因子作为免疫增强剂的研究进展 | 第11-15页 |
| ·鸡白介素-1β的研究进展 | 第15-17页 |
| ·本研究的前期工作基础 | 第17页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第17-18页 |
| 2. 实验材料和仪器 | 第18-22页 |
| ·实验动物、IBV三基因DNA疫苗及攻毒保护实验所用毒株 | 第18页 |
| ·宿主菌和载体 | 第18-19页 |
| ·化学试剂 | 第19页 |
| ·分子生物学试剂 | 第19-20页 |
| ·主要仪器 | 第20页 |
| ·培养基及溶液的配制 | 第20-21页 |
| ·其它 | 第21-22页 |
| 3. 实验方法 | 第22-29页 |
| ·引物设计 | 第22页 |
| ·山地乌骨鸡外周血淋巴分离及IL-1β的诱导 | 第22页 |
| ·山地乌骨鸡外周血淋巴细胞总RNA的提取 | 第22-23页 |
| ·山地乌骨鸡IL-1β RT-PCR体外扩增及鉴定 | 第23-26页 |
| ·山地乌骨鸡IL-1β序列测定与分析 | 第26页 |
| ·山地乌骨鸡IL-1β基因真核表达质粒的构建及鉴定 | 第26-28页 |
| ·pDNAIL-1β及IBV DNA三基因真核表达质粒的大量提取 | 第28页 |
| ·pDNAIL-1β及IBV DNA疫苗的配制 | 第28页 |
| ·动物免疫实验设计 | 第28-29页 |
| ·特异性抗体的测定 | 第29页 |
| ·CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞的测定 | 第29页 |
| ·攻毒实验 | 第29页 |
| 4. 实验结果 | 第29-40页 |
| ·山地乌骨鸡外周血淋巴细胞总RNA的提取及完整性鉴定 | 第30页 |
| ·山地乌骨鸡IL-1β基因的RT-PCR | 第30页 |
| ·山地乌骨鸡IL-1β基因菌落PCR及酶切鉴定 | 第30-31页 |
| ·山地乌骨鸡IL-1β基因的序列测定与分析 | 第31-33页 |
| ·山地乌骨鸡IL-1β基因真核表达质粒的构建、鉴定 | 第33页 |
| ·pDNAIL-1β及IBV DNA疫苗三基因质粒的大量制备 | 第33-34页 |
| ·动物免疫实验 | 第34页 |
| ·特异性抗体的测定 | 第34-35页 |
| ·CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞测定 | 第35-40页 |
| ·攻毒实验结果 | 第40页 |
| 5. 讨论 | 第40-44页 |
| ·山地乌骨鸡IL-1β的诱导 | 第40-41页 |
| ·山地鸟骨鸡IL-1β RT-PCR | 第41页 |
| ·山地乌骨鸡IL-1β基因序列分析 | 第41页 |
| ·山地乌骨鸡IL-1β基因真核表达质粒的构建 | 第41-42页 |
| ·采用流式细胞技术测定T淋巴细胞亚群的动态变化 | 第42-43页 |
| ·pDNAIL-1β真核表达质粒对IBV DNA疫苗免疫增强作用 | 第43-44页 |
| 6. 结论 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
| 在读期间发表论文 | 第52页 |
